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浙江大学学报(农业与生命科学版). 2022 (2): 135-268.
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雷帕霉素缓解奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的作用机制
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徐连彬,任怡飞,兰伟,侯鹏飞,刘红云
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2022 (2): 240-246.
DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2021.04.291
乳腺炎是泌乳奶牛的常见疾病,每年给养殖企业造成巨大的经济损失。本研究采用不同浓度的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导奶牛乳腺上皮细胞的炎症反应,之后,在对照培养基(CK)基础上分别添加100 μg/mL LPS(LPS100)、10 mmol/L雷帕霉素(RAP10)及2种物质联合添加(LPS100+RAP10)并处理细胞24 h,结束后收集细胞及上清液用于后续测定。结果表明:在不改变细胞活力和凋亡的情况下,添加100 μg/mL LPS显著提高了上清液中白介素-8(interleukin-8, IL-8)、白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的浓度(P<0.05)。单独添加雷帕霉素不影响奶牛乳腺上皮细胞上清液中炎症因子的浓度(P>0.05),但10 mmol/L雷帕霉素处理显著降低了LPS诱导的IL-1β和TNF-α分泌量(P<0.05)。LPS提高了核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)通路中p65蛋白的磷酸化水平,但雷帕霉素的添加消除了这种提高作用(P<0.05)。与LPS100组相比,LPS100+RAP10处理降低了奶牛乳腺上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)通路中c-Jun N末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)和p38蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。综上所述,雷帕霉素通过NF-κB/MAPK通路缓解了LPS引起的乳腺上皮细胞炎症反应,该结果可为雷帕霉素用于乳腺炎的治疗提供理论参考。
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