|
整期
收藏
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2022 (1): 1-134.
摘要(
68 )
PDF(74670KB)(
447
)
|
|
铁观音对阿尔茨海默病小鼠行为的影响及机制
收藏
姜炫旭,周辉,叶钰珊,刘仲华,魏月德,杨江帆,金恩惠,何普明,李博,吴媛媛,屠幼英
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2022 (1): 68-77.
DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2021.05.191
研究清香型铁观音(Tgy-Q)、浓香型铁观音(Tgy-N)和陈香型铁观音(Tgy-C)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)小鼠行为学的改善作用,及其对AD小鼠氧化应激及炎症等的作用机制。以C57BL/6J小鼠10只作为对照,6月龄雌性APP/PS1小鼠40只分成模型组、多奈哌齐组、Tgy-Q、Tgy-N和Tgy-C组,连续70 d灌胃给药,进行Y迷宫和旷场行为学实验,结束后处死,收集血浆和脑组织,检测小鼠血浆中超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量,并通过免疫组化实验观察胶质细胞的形态变化。Y迷宫实验结果表明,3组铁观音提取物处理组小鼠自发交替反应率分别比模型组增加17.3%、17.6%、19.8%(P<0.001),各组小鼠工作记忆能力较模型组有显著提高。旷场实验结果发现:与模型组相比,Tgy-C组小鼠中央区域的运动距离增加93.0%,Tgy-N组增加82.0%,Tgy-Q组增加49.2%;中央区域停留时间以Tgy-C组小鼠的效果最佳,增加105.0%(P<0.01),其次为Tgy-N组,增加84.1%(P<0.01),Tgy-Q组增加66.8%(P<0.05)。Tgy-C组小鼠的空间探索能力及焦虑行为改善更好。本实验中氧化应激水平下降是抗AD作用的主要作用机制。研究发现,与模型组组比,Tgy-Q、Tgy-N、Tgy-C处理的小鼠血浆丙二醛含量分别降低18.44%、12.97%、15.11%;超氧化物歧化酶活性分别升高15.31%、13.69%、18.80%。免疫组化实验结果表明,3种铁观音提取物对AD小鼠脑部小胶质细胞和星型胶质细胞形态的恢复有改善作用。综上所述,铁观音提取物对AD小鼠模型具有一定的缓解或保护作用,为科学饮用铁观音提取物抗AD功效提供了新的理论依据。
|
|
绵羊成纤维细胞OAR-L1高效转染方法的探索
收藏
吴飞,吴杰,陈学秋,周静茹,张惠,黄艳,时恒枝,杨怡,马光旭,杜爱芳
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2022 (1): 96-105.
DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2021.01.192
为了在绵羊肺成纤维细胞OAR-L1中高效表达外源蛋白,探索适合该细胞的转染方法,本研究比较了聚乙烯亚胺(polyethyleneimine, PEI)、脂质体2000转染试剂(LipofectamineTM 2000 transfection reagent, Lipo 2000)、成纤维细胞转染试剂盒(CytofectTM fibroblast transfection kit, CF2)以及慢病毒介导的细胞转染方法在OAR-L1细胞中表达外源蛋白的效果。结果显示:以pLentiCMV-EGFP-Puro或pLentiCMV-mCherry-Puro荧光质粒转染OAR-L1细胞时,细胞密度和转染试剂用量均可影响PEI、Lipo 2000和CF2介导的细胞转染效率,且三者最佳转染效率均不超过30%,而慢病毒介导的细胞侵染不受细胞密度和病毒液用量的限制,获得的荧光细胞数目也显著高于前三者。包装好的病毒液可以在4或-80 ℃条件下至少保存15 d而侵染效果不受影响。在OAR-L1细胞中共表达2种外源蛋白时,包装获得的2种慢病毒液等比例混合后再侵染的方式能获得更高的共转率。综上所述,慢病毒侵染是一种能够实现在OAR-L1细胞中高效表达外源蛋白的细胞转染方式,本研究结果为其他难转染细胞系转染方式的选择提供了一定的参考。
|
|