为了明确BAR基因对水稻的影响,对转BAR基因的Bengal HU-10、Bengal HC-11、Cypress PB-6、Cypress PB-13的抗性遗传、生理特性和农艺性状进行了研究,结果表明,它们对除草剂Liberty的抗性均受一对显性核基因控制,在这4个实验材料中,BAR基因在染色体上的整合位置互不等位,株高、生育期和每穗粒数等农艺性状也不相同.转BAR基因水稻与原亲本比较,叶片中叶绿素含量、光合速率和叶绿素荧光参数、GS酶活性等均未有明显差异,但用Liberty处理2 d后,上述生理性状变化明显,且在这4个转BAR基因材料之间也有显著差异,说明与BAR基因的插入位置有关.

建立并优化了农杆菌介导转化瓜类炭疽菌(Colletotrichum lagenarium)获得T-DNA插入突变体体系,包括农杆菌使用浓度、农杆菌与炭疽菌孢子共培养时间、抗生素配合使用抑制农杆菌污染等.所用的转化载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP除了抗生素选择标记外还携带有融合GFP-GUS报告基因.转化106个孢子平均可获得约150～200个潮霉素抗性转化子.PCR检测表明,所有潮霉素抗性转化子菌株都能从其基因组DNA中扩增到转化载体中的GUS基因片段,而且都能产生GFP荧光或GUS染色阳性.转化子菌株经过连续继代培养后保持稳定.随机对36个转化子菌株进行致病性测定,发现1个转化子菌株对黄瓜致病性下降,1个丧失致病性,而大多数表现为野生型致病性.农杆菌介导转化瓜类炭疽菌体系的建立,为进一步构建大库容量的T-DNA插入突变体库、致病性突变体筛选以及致病性相关基因的克隆鉴定奠定了基础.

利用珍汕97B/密阳46构建的RIL群体(ZM-RIL)及其相应分子遗传图谱,以海南和杭州两地试验的精米透光率(%)作为稻米透明度考察指标,应用检测QTL主效应、加×加上位性效应和G×E互作效应的遗传分析方法,对该性状两个环境下数据进行联合分析.共检测到5个控制该性状的主效应QTL,分别位于第2、6(2个)、8、10染色体上,总的遗传贡献率19.15%.其中,qTR2-2增加透明度的有效基因来源于母本;其余4个(qTR6-1、qTR6-2、qTR8-2、qTR10)则来自于父本.qTR6-1还与环境存在显著的GE互作效应.此外,还检测到2对控制稻米透明度的加性上位性互作基因,但它们均未与环境存在显著互作.

构建亚非马蜂和额斑黄胡蜂前溶血肽原基因的重组供体质粒pBacHT-PhPPM和pBacHT-VmPPM,转化到穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中,得重组穿梭载体Bacmid-PhPPM和Bacmid-VmPPM,再用Lipofectin介导其DNA转染粉纹夜蛾细胞系Tn-5B1-4,最后观察细胞表达时相动态.经ELISA法证实,胞内表达产物具有良好的抗原性,证明二种重组病毒Bacmid-PhPPM和Bacmid-VmPPM已在昆虫细胞中得到了表达.

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用纯化的重组GST(谷胱甘肽S-转移酶)蛋白免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有限稀释法克隆,成功获得4B3和1H10共2株能稳定传代并分泌抗GST单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞.2株单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,抗体类型均为IgG1,κ链,经Western-blot分析表明,2株单抗与GST-IBV-S1-F融合蛋白及重组GST蛋白均具有特异性反应,验证这2株单抗可用于检测GST融合蛋白的表达情况;用1H10单抗制备的亲和凝胶柱可用于GST融合蛋白的纯化.

构建含幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)尿素酶B亚单位3'端720 bp序列表达载体pAMJ399-e,转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109后在低pH下诱导表达.经SDS-PAGE和Western blot分析表明,含pAMJ399-e的E.coli JM109所表达的外源蛋白相对分子量为26 kD,免疫印迹分析证实该重组蛋白可以被幽门螺杆菌阳性患者血清所识别;提纯重组的尿素酶B亚单位C-末端片段(rUreB-E),进行Balb/c小鼠的皮下注射免疫试验,ELISA检测发现,小鼠经rUreB-E免疫后,其血清中均可检测到抗rUreB-E的特异性IgG和IgA抗体,表明rUreB-E具有良好的免疫反应性和免疫原性.

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为了了解Bacillus cereus 357菌株生长及产生拮抗物质的影响因子,对Bacillus cereus 357菌株在KMB、PDA、LB、Davis、SMA和淡薄培养基等6种培养基上的生长及产生的拮抗物质的生物活性进行检测和比较.结果发现在这六种培养基中,KMB培养基最适合该菌株的生长,所产生的拮抗物质生物活性最大;但相同菌量相应的拮抗物质生物活性却以Davis培养基为最高;同时研究发现利用液体培养基培养与固体培养基培养对拮抗物质的产生没有影响.另外,在不同温度、不同pH值等培养条件下对B.cereus 357菌株的生长及产生的拮抗物质活性进行测定,结果表明在37℃和pH 7.5的培养条件下,该菌株产生的拮抗物质抑菌活性最大.生长曲线分析表明该菌株在对数生长终期达到最大生物活性.为今后大量制备Bacillus cereus 357产生的拮抗物质和进行生长条件的深入分析提供了实验基础.

比较研究了6株球孢白僵菌Beuaveria bassiana(Bb)、5株玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus(Pf)和3株金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae(Ma)孢子类疏水蛋白(HLP)的含量和组分.结果表明HLP含量因菌种和菌株不同而呈现显著差异,其中Bb2861孢子HLP含量最高达23.4μg·mg-1,而Ma297的最低仅5.0μg.mg-1.HLP组分在三种生防真菌间差异明显,球孢白僵菌(12.0、15.0和17.5 kDa)和玫烟色拟青霉(15.0和17.5 kDa)的种内差异不明显.但是,金龟子绿僵菌的HLP组分种内差异较大,Ma2125主要包括17.0和14.5 kDa条带,Ma0201主要包括19.0和13.5 kDa,而Ma297主要条带仅为13.5 kDa.在对Bb2860不同菌体结构的比较研究中,发现其气生分生孢子、气生菌丝和液生菌丝的HLP含量分别为26.3、18.2和16.5μg.mg-1,相互间差异显著,且均含有15.0和17.5 kDa的主要条带.害虫生防真菌孢子HLP含量及组分的初步探明为研究其生物学功能与潜在应用奠定了基础.

自入世以来,出入境货物往来频繁,各类有害生物入侵风险增大.为了提高一线检疫人员正确快速鉴定有害生物和及时作出决策的能力,开发了基于Wap移动网络技术的进出境检疫性昆虫信息平台W-QPM.该平台由检疫昆虫信息、在线昆虫查询、在线昆虫检索、专家咨询答疑和国内检疫机构等五大功能模块组成,为在海港口岸等移动环境中工作的用户提供通过Wap手机登录W-QPM,利用多途径检索表进行物种鉴定和实时在线咨询专家.随着3G网络时代的来临,W-QPM将更易于普及与推广,为一线的检疫工作者提供快捷的信息服务和强大的技术支持.

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对不同耐盐性植物厚叶石斑木(Raphiolepis umbellata)、桑(Morus alba)和月季(Rosa chinensis)在盐胁迫下的新梢、新根生长量等形态指标,以及Na+、K+、Na+/K+,游离脯氨酸、叶绿素含量、光合速率、气孔导度、蒸腾速率等生理指标的比较研究表明:盐对3种植物生长的影响随浓度的升高和胁迫时间的延长而增加;Na+、K+等无机离子是厚叶石斑木主要的渗透调节物质,而在桑和月季中则为游离脯氨酸;叶绿素含量、光合速率等生理指标随盐浓度升高先升后降,变化幅度:月季＞桑＞厚叶石斑木;3种植物耐盐能力由强至弱依次为厚叶石斑木、桑和月季.

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针对濒危植物明党参ISSR数据以及八角莲和夏蜡梅的等位酶数据,以多态位点数(A)、多态位点百分数(PPB)、居群内基因多样度(Hs)、群体总的基因多样度(Ht)、基因分化系数(Gst)以及捕获的基因位点数为主要遗传多样性指标,利用蒙特卡罗模拟抽样法在各抽样比例下重复抽样1000次,并构建了3个植物群体的基因捕获曲线与基因增量曲线.通过两种曲线的比较分析确定这3种濒危植物的最佳取样比例皆为25%,但这并不意味着其他植物的最佳抽样比也为25%.此时明党参的多态位点数为163,多态位点百分数为40.85%,基因多样度为0.2744;八角莲的多态位点数为12,多态位点百分数为32.43%,基因杂合度为0.1943;夏蜡梅的多态位点数为10,多态位点百分数为25%,基因杂合度为0.0638,其各项遗传多样性指标与保护总群体95%遗传信息的样本非常相近.这说明通过蒙特卡罗模拟抽样与基因捕获及增量曲线综合分析确定核心种质的最佳抽样比例客观合理、切实可行.

利用遥感和GIS技术,首先根据生态区划计算出描述中国陆地景观结构的十三种景观结构指数,包括斑块密度、最大斑块指数、边界密度、面积加权斑块形状指数、面积加权斑块分维度、平均最近斑块距离、最近斑块距离的标准差、最近斑块距离的相异系数、蔓延度、分布邻接指数、结合度、香农多样性指数、辛普森多样性指数.在相关分析的基础上,使用等级聚合与因子分析方法对最近斑块距离相异系数之外的十二种指数进行分析,最后采用因子分析结果中的前三个公因子分析中国陆地景观结构,三个公因子的方差累积贡献率达88.8%,分别定义为斑块多样性因子、斑块形状复杂性因子、斑块分布均匀性因子结果表明,在人类活动影响强烈的生态区,这三种公因子取值都比较小,表明在人类活动的影响下,斑块类型多样性减少、斑块形状复杂性降低、斑块分布趋于均匀.

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