本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,探讨了减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的可行性.通过多功能分光光度仪测定细菌的OD600和eGFP在大肠杆菌和减毒沙门氏菌中的表达量,结果表明:eGFP在沙门氏菌中的表达量依赖于IPTG的浓度,最佳浓度为0.5 mmol·L-1,增加浓度至0.75 mmol·L-1不能增加eGFP的表达量;而该现象在大肠杆菌中不明显.当IPTG浓度等于或大于0.5 mmol·L-1时,沙门氏菌中eGFP的表达量显著高于大肠杆菌.若以相对荧光度(1个OD600单位的荧光值,即eGFP相对表达量)表示,两种宿主菌的最佳诱导时间均为3 h.Hela细胞侵袭力试验表明该减毒沙门氏菌仍具有侵袭力,同时以脂质体转染为对照,将携带重组质粒pcDNA3-eGFP的减毒沙门氏菌转染Hela细胞,48 h后可观察到绿色荧光,表明了该菌可作为载体将重组质粒携带到细胞内,并使外源基因得到表达.此外,利用基于微孔板的多功能分光光度仪可直接检测荧光强度和OD值,能快速、准确地进行多样本检测,可用于GFP在不同宿主菌或相同宿主菌在不同试验条件下,甚至不同表达载体在相同宿主菌中表达等方面的研究.

一株4-氯硝基苯(4-CNB)的完全降解菌Pseudomonas putida ZWL73能利用3-羟基苯甲酸(3-HBA)为惟一碳源和能源生长,而且ZWL73在对3-HBA降解的过程中,有中间产物龙胆酸生成;酶学分析的分光光度法证实,ZWL73通过GSH依赖型的龙胆酸途径代谢3-HBA,并且该途径需经3-HBA或龙胆酸诱导.

从土壤中分离筛选获得一株产低温蛋白酶菌株,并对其进行了形态和生理生化鉴定,对部分长度的16S rDNA同源性作了分析,将其鉴定为Chryseobacterium sp.HL221.通过硫酸铵沉淀、G-75和DEAE Sepharose F.F.柱层析从发酵液分离纯化得到纯酶,测得分子量为35000 Da,等电点为4.9.酶促反应最适温度25℃,最适pH为7,酶活在低于25℃,pH7～10范围内稳定.

附着胞的分化、形成和成熟是稻瘟病菌成功侵入寄主的前提.稻瘟病菌识别不同的胞外信号,可通过环化腺苷酸(cAMP)信号途径、丝分裂原激活蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导途径和Ca2+信号途径等不同的信号途径来调控附着胞发育.结合这些信号传递途径相关基因及其信号途径间关系的研究论述了调控稻瘟病菌附着胞分化和发育的信号传递的分子机理.

阴沟肠杆菌B8是从水稻叶面分离获得的具有拮抗水稻白叶枯病菌等多种病原细菌的广谱拮抗菌.为研究其拮抗机理,我们应用转座子标签法对阴沟肠杆菌B8中与抗水稻白叶枯病菌拮抗活性相关的DNA片段进行了克隆.通过自杀性质粒pZJ25介导,将Tn5转座到B8的染色体上,从而筛选到2株拮抗活性丧失的菌株B8B和B8F;用Tn5片段为探针,分别对B8、B8B、B8F进行Southern杂交,结果在B8中无特异条带,而在B8B和B8F中各有一条约20kb和9kb的EcoRⅠ特异条带;分别提取二株突变菌株的基因组DNA,BamHⅠ酶切,克隆于pBS的BamHⅠ位点上,利用Tn5上的Kan抗性,分别筛选到质粒pTLB和pTLF,获得包含Tn5部分序列的B和F二个基因片段,大小约为6kb和7kb;应用pTLB全质粒和pTLF中约0.8kb的BamHⅠ+HpaⅠ外源F片段为探针,对B8、B8B、B8F进行Southern杂交,证实我们克隆到Tn5转座位点周围的二个片段,且他们分别位于B8菌株染色体DNA的二个不同位置.

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将72头体重(26.20±2.95)kg的生长猪,随机均分为3组.试验组日粮中分别添加至0.4、0.8mg·kg-1六六六(HCH),研究生长期饲喂HCH污染饲料对猪生长性能和血清指标的影响.结果表明:饲喂六六六污染饲料(0.4、0.8 mg·kg-1 HCH)对生长肥育猪的料重比、日增重无显著影响,但对血清指标有一定影响.0.4,0.8 mg·kg-1试验组血清T3分别比对照组增加49.9%和46.1%(P＜0.05);ALT活性分别提高11.2%(P＞0.05)和26.9%(P＜0.01);AKP活性分别提高19.7%和23.5%(P＜0.01);血清丙二醛(MDA)浓度分别比对照组提高28.0%和28.4%(P＜0.01),超氧化物岐化酶(SOD)活性分别下降10.05%(P＞0.05)和14.35%(P＜0.05),过氧化氢酶(CAT)活性分别下降9.02%(P＞0.05)和14.21%(P＜0.05).表明饲喂六六六污染日粮,对猪生长无显著影响,但可能已经干扰机体正常激素代谢,并产生一定的损伤.

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室内评价了牛角瓜(Calotropis procera Ait.)提取物对非洲瓜瓢虫(Henosepilachna elaterii Rossi)的生物活性及提取方法.结果表明,浸泡提取法的提取效率显著比电动振荡提取法高;植物的不同部分提取效率存在显著差异,以叶最高,花次之,根最低;叶提取物的生物活性高于花和根;初孵的幼虫不取食牛角瓜叶、花和根提取物处理过的南瓜叶;用提取物处理过的南瓜叶饲养4龄幼虫,幼虫不能化蛹就死亡;4龄幼虫前胸背板点滴牛角瓜叶或花提取物试验表明,点滴处理后幼虫的死亡率、随后的蛹死亡率和羽化的畸形成虫比例增加.但4龄幼虫先用牛角瓜叶、花和根提取物处理过的南瓜叶饲养2天,随后用未经提取物处理的南瓜叶饲养,则这些幼虫仍能完成幼虫和蛹的发育,而且育出的成虫寿命和生殖力不受影响.

离体条件下,研究了2个马铃薯品种在0～80 mmol NaCl胁迫下的试管苗生长、叶绿素含量、脯氨酸和丙二醛含量及氧化酶活性的反应.2品种苗高随盐浓度增加及培养时间的延长而显著降低.与品种紫花白相比,同一盐浓度下静石2号在苗鲜重、根长和根数等方面受抑制程度更强.盐胁迫培养3周后,试管苗叶片中叶绿素a,b与总量及类胡萝卜素含量在40～80 mmol高盐浓度下显著降低.两个品种试管苗中脯氨酸和丙二醛含量随盐浓度的增加而增加,而静石2号中脯氨酸和丙二醛的累积量和累积率都高于紫花白,表明在盐胁迫下静石2号膜脂过氧化程度相对较高.2品种SOD和POD活性均在低盐浓度(20 mmol)下显著增加而高盐浓度下降低.离体条件下,紫花白试管苗呈现出比静石2号高的SOD、POD活性以及较强的耐盐能力,表明其具有进一步在田间进行耐盐基因型筛选的必要性.

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以圣女樱桃番茄为材料,研究了在NFT栽培系统中不同灌溉条件下番茄植株在不同生育期叶水势的日变化规律.结果表明,不同供水方式对番茄叶水势的影响不同.各生育阶段均以处理Ⅰ(每间隔10 min供水15 s)番茄叶水势值最高,日变化较小,而处理Ⅲ(每间隔30 min供水15 s)叶水势值最低,且日变化较大,处理Ⅱ(每间隔20 min供水15 s)与处理Ⅲ叶水势相比差值大,与处理Ⅰ叶水势相比差值小,处理Ⅱ番茄的茎粗、叶面积以及各器官的鲜重等生物学指标以及产量均比其他处理方式高.

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对内环流颗粒污泥床硝化反应器的氮损失现象进行了研究,结果表明氨逃逸是氮损失的主要致因.基于双膜理论和热力学原理,构建了氨逃逸的动力学模型,并分析了氨逃逸的影响因子.该模型预测值与反应器实际运行过程中实测的氮损失量基本吻合.进一步对影响氨逃逸的因素进行了参数灵敏度分析,结果表明,pH值对氨逃逸速率的影响程度最大.

通过对10种具有园林应用前景的蕨类植物在密林中、大棚内、小棚内三种不同光照强度下栽植,以八角金盘(Fatsia japonica)为对照,测定其比叶重、叶绿素含量、叶绿素a/b值和光合速率.基于这些指标分析,蜈蚣草(Pteris vittata)、福建观音座莲(Angiopteris fokiensis)、红盖鳞毛蕨(Dryopteriserythrosora)最耐阴,金毛狗(Cibotium barometz)、井栏边草(Petris multi fida)等较耐阴;结合实际应用,筛选出园林上适宜应用的种类:福建观音座莲、井栏边草、峨嵋凤丫蕨(Coniogramme emeiensis)、齿缘瘤足蕨(Plagiogyria dentimarginata)和狭翅铁角蕨(Asplenium wrtghtii).提出了蕨类植物在阴生环境中园林应用时的建议.

研究了水生外来植物水盾草(Cabomba carolimana)入侵沉水植物群落的不同种群生态位特征和种间联结性.选择了其扩散区域内的24个样地进行群落学调查,测定了群落中13个种群的生态位宽度、生态位重叠、多物种间总体关联性及成对物种间联结性,结果表明:①水盾草入侵沉水植物群落13个种群中,水盾草的生态位宽度最大,金鱼藻(Ceratophyllum demersum)、黑藻(Hydrilla verticillata)和苦草(Vallisneria natans)次之.②水盾草与金鱼藻、黑藻、苦草和黄花狸藻(Utricularia aurea)间生态位重叠较大,与其他物种间的生态位重叠较小.③水盾草和金鱼藻、苦草、黑藻之间具有一定的正联结,而与其他物种间的联结性不显著,基本上趋于独立出现.由此可见,水盾草在中国急剧扩散,对常见的乡土种有很大的负面影响,导致群落物种多样性下降,应加强防控研究.

生态敏感性分析是生态城市规划的基础分析和重要的规划依据,但是由于评价所涉及的地域复杂性和因素多样性,许多评价方法和体系仍处于不断探索和发展之中.生态环境系统是一个灰色系统,包括了许多具有信息不确知性和不完全性的因素.基于灰色系统理论和矢量投影原理,建立了生态敏感性分析的灰色关联投影模型.该模型将评价样本及各级质量标准视为矢量,分别向同一矢量(理想样本)进行投影.根据投影值的大小,确定样本所属的敏感性级别及样本间的优劣排序.本文以安吉为例,在建立生态敏感性评价指标体系和标准的基础上,运用所建模型对生态敏感性进行了评价.研究表明,灰色关联投影模型对于多指标的生态敏感性分析是科学的、有效的,具有一定的推广和实用价值.

该文提出了根据土层的空间变异性进行大比例尺土壤制图研究.该制图方法可顺次分为以下几步:①用GPS定位观察土壤剖面,划分土层;②确定调查区土壤类型,建立空间和属性数据库;③进行主要土层(诊断层)厚度的空间变异分析,选择和确定调查区土壤划分依据(诊断标准);④叠置分析,获得土壤类型图.通过对一个发育于页岩低丘陵土壤样区的应用研究表明,该方法制图可获得较高的准确性(94%).

运用有限元法分析了鸡蛋蛋壳的受载特性,并通过试验比较验证了模拟数值解的可行性.有限元分析获得:在相同外载加压下侧面受载的应力和变形都大于大端受载,越厚的蛋壳能承受的应力越大,蛋的形状系数对蛋的强度影响无明显相关性.为今后对鸡蛋受载特性的进一步研究提供了参考.