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浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大学学报(农业与生命科学版)  2006, Vol. 32 Issue (4): 360-366    
论文     
农杆菌介导的黄瓜炭疽菌遗传转化
方丽　 刘海青　 宋凤鸣　 郑重
方丽（浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029）　　　　　　
刘海青（浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029）　　　　　　
宋凤鸣（浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029）　　　　　　
郑重（浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029）　
 全文: PDF(612 KB)  
摘要： 建立并优化了农杆菌介导转化瓜类炭疽菌(Colletotrichum lagenarium)获得T-DNA插入突变体体系,包括农杆菌使用浓度、农杆菌与炭疽菌孢子共培养时间、抗生素配合使用抑制农杆菌污染等.所用的转化载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP除了抗生素选择标记外还携带有融合GFP-GUS报告基因.转化106个孢子平均可获得约150～200个潮霉素抗性转化子.PCR检测表明,所有潮霉素抗性转化子菌株都能从其基因组DNA中扩增到转化载体中的GUS基因片段,而且都能产生GFP荧光或GUS染色阳性.转化子菌株经过连续继代培养后保持稳定.随机对36个转化子菌株进行致病性测定,发现1个转化子菌株对黄瓜致病性下降,1个丧失致病性,而大多数表现为野生型致病性.农杆菌介导转化瓜类炭疽菌体系的建立,为进一步构建大库容量的T-DNA插入突变体库、致病性突变体筛选以及致病性相关基因的克隆鉴定奠定了基础.
出版日期: 2006-07-27
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方丽　 刘海青　 宋凤鸣　 郑重

引用本文:

方丽　 刘海青　 宋凤鸣　 郑重. 农杆菌介导的黄瓜炭疽菌遗传转化[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2006, 32(4): 360-366.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2006/V32/I4/360

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