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鸭疫里氏杆菌赘生物提取及其理化特性研究
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韦强 鲍国连 王一成 徐丽华 季权安
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005 (3): 250-254.
为了提取纯净的鸭疫里氏杆菌赘生物,比较了4种培养基培养RAⅡ型菌和4种提取赘生物试验的方法,结果表明,马丁琼脂培养的RA菌赘生物含量较高,杂质少,适宜于作为提取赘生物用的培养基;差速离心结合滤膜过滤法能有效地把细菌和赘生物分离开来,提取到较纯的赘生物.赘生物的核酸检测和蛋白质电泳分析表明,赘生物无核酸存在,蛋白质电泳图谱与菌体相似形态学观察表明,提取的赘生物可分为大、中、小三类,大的和中等的赘生物外层为一层厚的壁,中央为三角形或四边形样的核物质;小的赘生物为圆形,有一层很薄的外膜,中央为点状或星状的核.研究结果为该菌的分类提供了一定的科学依据.
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IBDV VP2/4/3-ChIL-2融合基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达
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万旺军 谢荣辉 李龙 许健 于涟
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005 (3): 255-262.
构建含有传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)VP2/4/3和鸡白细胞介素2(Chicken Interleukin 2,ChIL-2)融合基因的真核表达载体pCI-VP2/4/3-IL-2、pCI-IL-2-VP2/4/3,并在Vero细胞中进行表达.应用重叠延伸剪切技术(splicing by overlapping extension),分别经3次PCR获得融合基因片段VP2/4/3-IL-2、IL-2-VP2/4/3,定向插入真核表达载体pCI中,获得重组质粒pCI-VP2/4/3-IL-2、pCI-IL-2-VP2/4/3,在脂质体介导下,分别转染Vero细胞.RT-PCR检测证实导入的外源基因在Vero细胞中得到了转录;间接免疫荧光试验(IFA)和Western-blot检测证实重组质粒在Vero细胞中正确表达了插入的外源基因编码的融合蛋白,且表达的融合蛋白具有免疫反应性.重组真核表达载体pCI-VP2/4/3-IL-2、pCI-IL-2-VP2/4/3的成功构建及其在Vero细胞中的有效表达,为进一步探讨ChIL-2作为分子免疫佐剂对IBDV DNA疫苗的特异性免疫增强作用奠定了基础.
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纳米硒对肥育猪肌肉品质的影响
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夏枚生 张红梅 胡彩虹
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005 (3): 263-268.
以亚硒酸钠为对照,研究了纳米硒对肥育猪肌肉品质的影响.234头体重45 kg左右的杜长大肥育猪按饲养试验要求分为13组,每组3个重复,每个重复6头.将纳米硒和亚硒酸钠2种硒源分别以0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、1.00mg/kg6个硒水平添加到基础日粮中,配制成12种试验日粮,基础日粮作对照.结果显示:①亚硒酸钠添加浓度在0~0.20 mg/kg,背最长肌滴水损失随着硒添加浓度的增加而降低;添加浓度在0.30~1.00mg/kg,滴水损失随着硒添加浓度的增加而升高;1.00 mg/kg硒添加水平滴水损失显著高于0.20~0.50 mg/kg硒添加水平(P<0.05).纳米硒添加浓度在0.20~1.00mg/kg滴水损失始终保持在低峰平台.硒源添加浓度在0.40~1.00 mg/kg硒时,纳米硒组滴水损失显著低于亚硒酸钠组(P<0.05).②硒源添加浓度在0.10~0.30 mg/kg时,两种硒源对背最长肌GSH-Px活性、-AOC和MDA含量的影响无显著差异(P>0.05);硒源添加浓度在0.40~1.00mg/kg硒时,纳米硒组GSH-Px活性和T-AOC显著高于亚硒酸钠组(P<0.05),MDA含量显著低于亚硒酸钠组(P<0.05).③硒源添加浓度在0.10~0.30 mg/kg时,两种硒源对背最长肌硒含量的影响无显著差异;在0.40~1.00mg/kg硒添加水平上,纳米硒组背最长肌硒含量显著高于亚硒酸钠组.④空白组背最长肌肌红蛋白含量显著低于加硒组(P<0.05),硒源和硒添加水平对背最长肌肌红蛋白没有显著影响(P>0.05).上述结果提示,纳米硒的Weinberg剂量-效应的最适剂量范围要宽于亚硒酸钠,高剂量添加时比亚硒酸钠更能提高肌肉组织抗氧化能力,降低肉的滴水损失;肌肉硒沉积率优于亚硒酸钠.
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遥感监测中5种相对辐射校正方法研究
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丁丽霞 周斌 王人潮
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005 (3): 269-276.
相对辐射校正能够减小多时相遥感图像之间由大气、照度、物候和传感器标度等差异造成的影响,有利于提高动态监测精度.利用浙江省嘉善县两期TM/ETM+遥感数据,试验了5种相对辐射校正方法,包括图像回归法、伪不变特征法、暗集-亮集法、未变化集辐射归一法与直方图匹配法.这些相对辐射校正方法仅利用图像像元灰度值的统计特征,不需要其它参数,操作简便,尤其适合用于历史遥感数据本文运用均方根误差与变动范围这两个统计特征参数比较与评价了5种方法辐射校正后的图像,并用差值法进一步比较了5种方法对动态监测的影响,结果表明5种相对大气辐射校正方法都不同程度地改善了动态监测效果,对于本实验区,暗集-亮集法效果最好,其次为伪不变特征法.最后,本文还讨论了应用这5种方法的影响因素与适用条件.
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百山祖冷杉的ISSR分析优化和遗传多样性初步研究
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哀建国 邱英雄 余久华 陈小荣 丁炳扬
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005 (3): 277-282.
以百山祖冷杉DNA为材料,分析了DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶的含量以及退火温度对ISSR-PCR扩增结果的影响,经过优化实验建立了百山祖冷杉ISSR-PCR最佳反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为:约40 ng模板DNA,1.2 U Taq酶,0.4 μmol/L引物,1.5mmol/L MgCl2,0.2mmol/L dNTPs,2%去离子甲酰胺.利用优化反应体系从100个ISSR引物中,筛选出了13个稳定性高、重复性好的引物,对40个百山祖冷杉个体材料的DNA进行正式扩增,共扩增得到91条带,其中39条为多态性条带,多态位点百分率(PPB)为42.86%.百山祖冷杉的3个群体遗传多样性比较分析表明,人工辅助授粉产生的实生苗群体(PPB=37.36%)遗传多样性明显高于老树群体(PPB=16.48%)和嫁接苗群体(PPB=20.88%),这说明了人工辅助授粉繁育措施能有效提高百山祖冷杉的遗传变异水平.
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应用近等基因系研究Bt基因对水稻性状表现的影响
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沈圣泉 舒庆尧 包劲松 吴殿星 夏英武
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005 (3): 283-287.
以密阳46(MY46)为轮回亲本,采取连续回交,结合GUS标记基因辅助选择技术,育成了Bt基因近等基因系抗螟虫密阳46(RIMY46).经考察,RIMY46及其所配杂种Ⅱ32A/RIMY46的GUS反应和PCR检测均为阳性,且高抗螟虫.在早期营养生长阶段,RIMY46苗高比MY46低,分蘖数比MY46少,表明纯合态Bt基因对纯系植株的前期生长进程有一定延缓作用,这种影响随着植株长大而减小,最终除导致抽穗延迟和整精米率降低外,对其余8个农艺性状和9个稻米品质性状的影响则均不显著.比较Bt近等基因系所配杂种Ⅱ32A/RIMY46和Ⅱ32A/MY46有关性状的表现差异,结果则发现杂合态Bt基因对杂种F1性状表达均无明显的负作用.
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重金属污染土壤H2O2预处理的植物修复技术研究
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杨强 林琦 王兆炜 王远鹏
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005 (3): 315-320.
采用反应平衡法并结合盆栽试验研究了H2O2对重金属污染土壤的活化作用及对后续植物修复中重金属根际效应的影响.研究表明污染土壤施入H2O2后,水溶性总铜、总锌均较对照有显著的增加,说明H2O2对污染土壤重金属的活化有很强的效果.Fe2+加入使重金属活性降低,施加量越高,土壤溶液水溶性铜锌含量越低.经H2O2预处理的土壤栽种黑麦草后将进一步溶出铜锌,其中,对黑麦草根际水溶态铜含量的影响比锌显著.H2O2预处理并不改变污染土壤重金属的主要存在形态,但经H2O2预处理的土壤栽种黑麦草后,水溶态+交换态铜含量增幅较大说明经H2O2预处理重金属在土壤中的结合强度可能减弱,易于受根际的影响而活化.H2O2预处理土壤栽种黑麦草后,弱专性吸附态铜锌均明显增加、残渣态铜锌减少.即提取试验和盆栽试验结果均表明H2O2预处理对提高土壤中重金属的生物有效性、促进植株吸收重金属效果显著.
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