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浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大学学报（农业与生命科学版）  2018, Vol. 44 Issue (2): 162-171    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2018.03.014
论文     
卵泡刺激素剂量依赖性表达基因的筛选
刘甜1，陈晓宇2，朱志伟2，于福先2，黄菁2，贾若欣2，石放雄1*，潘建治2,3*
1. 南京农业大学动物科技学院，南京 210095；2. 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，杭州310021；3. 浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所，杭州 310021
Screening of follicle-stimulating hormone dose-dependent expression genes
LIU Tian1, CHEN Xiaoyu2, ZHU Zhiwei2, YU Fuxian2, HUANG Jing2, JIA Ruoxin2, SHI Fangxiong1*, PAN Jianzhi2,3*

1. College of Animal Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Science, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, China; 3. Institute of Virology and Biotechnology, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, China

 全文: PDF(3141 KB)   HTML ( ) 
摘要：

为开发能高效检测卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone, FSH）制品生物活性的新方法，选取猪卵泡颗粒细胞，利用转录组测序技术对比FSH处理组（40 mIU/mL）和空白对照组细胞中基因的表达情况，分析并获得大量受FSH调控的候选基因，运用荧光定量聚合酶链式反应验证FSH处理后显著上调的基因，并进一步利用FSH浓度梯度（0、20、40、60、80、100 mIU/mL）处理卵泡颗粒细胞。结果显示，基因OLR1、LHCGR、SCARA5 和S100A12 的表达量呈现FSH浓度依赖性升高。在3 倍递增的FSH浓度梯度（0、1、3、9、27、81、243、729 mIU/mL）下观察各基因表达量的变化，发现在0~243 mIU/mL 的FSH 浓度范围内，LHCGR 基因的表达量与FSH 浓度呈高度线性相关（R2=0.982）。因此，可通过检测FSH刺激条件下细胞中LHCGR基因的表达量，来评估FSH制品的生物学效价。

关键词： 卵泡刺激素;  卵巢颗粒细胞;  生物学效价;  猪    
Abstract:

To develop a new and effective method for detection of follicle-stimulating hormone (FSH) bioactivity, porcine follicular granulosa cells were used as experimental materials, and expression of genes in FSH-treated group (40 mIU/mL) and blank control group was compared by transcriptome sequencing to identify FSH-regulated candidate genes. Meanwhile, real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction was used to validate significantly upregulated genes after FSH treatments, and the porcine follicular granulosa cells were treated further by FSH dose gradients (0, 20, 40, 60, 80 and 100 mIU/mL). The results indicated that the expressions of OLR1, LHCGR, SCARA5 and S100A12 increased in a FSH dose-dependent manner. In addition, the expression of these four genes was determined in FSH dose gradients (0, 1, 3, 9, 27, 81, 243 and 729 mIU/mL), and the results showed that the correlation coefficient between the expression of LHCGR and dose gradient of FSH was close to 1 (R2=0.982) in the FSH dose range of 0-243 mIU/mL. In summary, LHCGR expression has a linear relationship with FSH dose, which may be helpful to develop a novel method for biological value detection of FSH.

Key words: follicle-stimulating hormone    follicular granulosa cell    biological value    pig
出版日期: 2018-04-27
基金资助: 国家重点研发计划（2017YFD0501901）；国家国际科技合作专项（2015DFG32540）；浙江省农业（畜禽）新品种选育重大科技专项（2016C02054-6）
通讯作者: 石放雄（https://orcid.org/0000-0001-6271-6184）;潘建治（https://orcid.org/0000-0003-3505-0983)     E-mail: fxshi@njau.edu.cn; jzpan9@126.com
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刘甜
陈晓宇
朱志伟
于福先
黄菁
贾若欣
石放雄
潘建治

引用本文:

刘甜, 陈晓宇, 朱志伟, 于福先, 黄菁, 贾若欣, 石放雄, 潘建治. 卵泡刺激素剂量依赖性表达基因的筛选[J]. 浙江大学学报（农业与生命科学版）, 2018, 44(2): 162-171.

LIU Tian, CHEN Xiaoyu, ZHU Zhiwei, YU Fuxian, HUANG Jing, JIA Ruoxin, SHI Fangxiong, PAN Jianzhi. Screening of follicle-stimulating hormone dose-dependent expression genes. Journal of Zhejiang University (Agriculture and Life Sciences), 2018, 44(2): 162-171.

链接本文:

http://www.zjujournals.com/agr/CN/10.3785/j.issn.1008-9209.2018.03.014    或    http://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2018/V44/I2/162

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