利用PCR技术克隆西花蓟马(Frankliniella occidentalis)的rDNA ITS2和COⅠ基因5'末端的部分序列,结合GenBank中相应序列对两者的突变类型、核苷酸多态性、单倍型多态性、种内平均遗传距离以及系统进化等进行比较分析.结果表明,COⅠ基因较rDNA ITS2更适合于F. occidentalis的种内遗传分析;F. occidentalis可能是由两个(或多个)株系或隐存种组成的复合体;入侵我国的F. occidentalis以温室系(greenhouse strain)为主体,也存在一定数量的羽扇豆系(lupin strain).据此,推测F. occidentalis最先是被传播至云南,再从云南扩散至北京、哈尔滨等地.本研究结果对了解我国F. occidentalis的遗传多样性、株系组成以及入侵机制具有一定意义.
为阐明水稻β-石竹烯在调节水稻、害虫及其天敌相互关系中的作用,克隆鉴定了一个水稻β-石竹烯合成酶基因OsCAS,并对其原核表达与遗传转化进行研究.该基因的cDNA全长1731 bp,包含一个1728 bp的开放阅读框,编码一个由576个氨基酸组成的蛋白,预测分子量66.5 kDa.系统进化树分析表明,水稻OsCAS基因编码蛋白的氨基酸序列与同为单子叶植物玉米的β-石竹烯合成酶氨基酸序列同源性达99%,而与其他植物(拟南芥、青篙、黄瓜)的同源性仅51%.褐飞虱为害和茉莉酸处理能明显上调OsCAS基因的表达水平.同时原核表达了OsCAS基因,并利用农杆菌转化系统获得OsCAS基因过量表达和RNAi的水稻品系,为分析OsCAS基因的生化与生物学功能奠定了基础.
拟南芥活体转基因种子的筛选仍主要采用无菌培养技术,存在操作麻烦,容易污染而造成转基因材料损失等问题.本研究在传统组织培养筛选技术的基础上,通过去除原培养基成分中对种子发芽和筛选不必需的蔗糖和有机成分,降低大量元素的浓度,缩短筛选时间,从而免除了传统转基因种子筛选中培养基和种子消毒的繁琐步骤,建立了一种不依赖于无菌培养的转基因种子筛选方法.与无菌培养筛选比较,筛选效果相同,但简化了试验步骤,提高了筛选操作的可靠性.
利用RT-PCR扩增 MSTN cDNA全序列,然后进行克隆、测序;将重组质粒 pEGFP-N1-MSTN-2通过脂质体瞬时转染番鸭成纤维细胞,用RT-PCR和SDS-PAGE检测其蛋白表达.结果表明,番鸭体内存在2种MSTN基因转录本,MSTN-1(EU336991)和MSTN-2(EU336992),大小分别为1128 bp和754 bp,同源性为94%;且MSTN-2是一个全新的MSTN转录本,含有1个开放阅读框,可编码124个氨基酸.将pEGFP-N1-MSTN-2转染番鸭成纤维细胞48 h后,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白表达,蛋白大小约为14 kDa.这对于进一步研究MSTN基因功能及作用机理具有重要意义.
宁波出入境检验检疫局植检实验室在对本地热处理企业线虫处理效果进行监测时,从一批采自余姚四明山林场的黄山松(Pinus taiwanensi)木包装中截获一种伞滑刃属线虫.对该线虫进行培养、形态学观察、测量以及分子研究,鉴定为程氏伞滑刃线虫(Bursaphelenchus chengi Li, Trinh, Waeyenberge & Moens, 2008).该线虫属abietinus组,侧区有2条侧线,雄虫交合刺成对,强壮,长约18 ～22 μm,末端约1/3处强烈向腹面弯曲.雌虫尾端略向腹面弯曲,末端钝圆或尖,有时有不规则的尾尖突.该线虫与树皮象伞滑刃线虫(B. hylobianum)、安东尼伞滑刃线虫(B. antoniae)在形态上十分接近,但ITS-RFLP图谱以及序列分析结果有明显差异.目前仅南京口岸曾从来自我国台湾的木质包装中截获该线虫.
利用银染AFLP分子标记技术,对不同来源的18份番茄青枯病抗病材料和2份感病材料进行亲缘关系和遗传多样性分析.从64对引物中筛选出扩增效果稳定、多态性好的5对引物组合分别对20份材料的基因组DNA进行扩增,共扩增出清晰的条带201条,其中74条具有多态性,多态性位点百分率为36.8%.这一结果表明供试的抗青枯病番茄材料在DNA水平上的酶切位点分布存在一定的差异.应用NTSYS软件计算供试材料间的遗传相似系数,其变化范围为0.76～1.00.以遗传相似系数0.88为阈值进行UPGMA聚类分析,20份供试材料分成2个复合组和5个独立组.以上结果在DNA水平上为番茄抗青枯病育种的亲本选配提供了参考依据.
从笃斯越橘的根部获得1株对12种受试病原真菌都具有拮抗活性的内生细菌DUT菌株,该菌株对菜豆炭疽病病原真菌(Colletotrichum lindemuthianum)抑菌率达70.5%,对2种越橘叶斑病病原菌拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis sp.)和柯氏帚梗柱孢霉(Cylindrocladium colhounii)的抑制率分别达68.6%和57.7%.通过对其形态特征观察、生理生化特性鉴定及16S rDNA序列同源性分析,鉴定该细菌为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens).对DUT菌培养特性研究结果表明,该菌培养8 h可达对数生长期;最适生长pH值为7.5;最适生长温度为28～30 ℃.利用双抗生素标记的DUT菌株回接越橘,该菌株可在越橘体内定殖.DUT菌能够产生几丁质酶,发酵36 h后粗酶液的酶活力可达20.11 U·mL-1.
为获得高产α-半乳糖苷酶,通过单因素实验,研究黑曲霉变种Aspergillus niger v. Tiegh CGMCC1182在固态发酵条件下产α-半乳糖苷酶的培养基组成和发酵条件,继而采用Ln18(37)正交试验设计,对影响黑曲霉A. niger v.Tiegh CGMCC1182产α-半乳糖苷酶的7个主要因素进行研究,对影响产酶的重要因素进一步优化.结果表明,黑曲霉变种A. niger v. Tiegh CGMCC1182产α-半乳糖苷酶的最适培养基组成为:麸皮∶豆粕=7∶3(W/W),在此基础上添加2.0%的棉子糖、2.5%的(NH4)2SO4和0.5%的MgSO4;产酶最适发酵条件为:培养温度30 ℃,培养基含水率55%,培养基装量为250 mL三角瓶中装入14 g培养基,接入10%(V/W)的孢子悬浮液(孢子浓度107个·mL-1),静置培养68 h获得最高α-半乳糖苷酶产量,酶活达308.5 U·g-1.
以疣孢霉发酵液粗多糖作为激发子,分析其对云芝、粗柄侧耳和花脸香蘑生物量、菌丝体蛋白质含量及酯酶变化情况的影响,并测定发酵液纤维素酶活性.结果表明,疣孢霉粗多糖能诱导菌丝体产量上升3.2%～86.2%;激发子浓度达到800 μg·mL-1时,云芝、花脸香蘑和粗柄侧耳菌丝体蛋白质含量较对照分别增加63.76%、47.73%和39.03%,发酵液纤维素酶活分别为对照的4.98倍、2.87倍和1.63倍.电泳结果显示,3种供试食用菌菌株菌丝体酯酶谱带随着激发子浓度的变化,明显出现条带增加或缺失,酶活强度也发生变化,表明病原真菌多糖对真菌菌丝体也具有类似激发子的作用.
以刺楸嫩叶柄为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基.结果表明,刺楸组织培养的不同阶段需要不同的培养基.最适的愈伤组织诱导培养基为C2D+6-BA(6-苄氨基腺嘌呤) 0.50 mg·L-1+NAA(萘乙酸)1.00 mg·L-1;愈伤组织增殖培养基为C2D+6-BA 0.50 mg·L-1+NAA 0.50～1.00 mg·L-1;愈伤组织诱导再分化培养基为C2D+6-BA 2.50 mg·L-1+KT(激动素) 4.50 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1;生根培养基为1/2 MS + IBA(吲哚丁酸) 0.10 mg·L-1+IAA(吲哚乙酸) 0.10 mg·L-1;试管苗保存培养基为1/5 MS+ABA(脱落酸) 2.50 mg·L-1.常温条件下,利用低营养促成休眠的方法在试管内保存刺楸种质可达44个月.
以浙农113、龙井43、浙农139盆栽茶树为试验材料,研究新梢生育过程中的节间和展叶角度变化.结果表明,不同品种节间生长变化与新梢生长一样,遵循"慢-快-慢"的"S"型生育规律.3品种中,浙农139节间最长,龙井43节间较短.春季,鱼叶展后12 d节间生长量仅为最长生长量的50%左右,此时进行机采,破碎率高;18 d时,鲜叶原料不符合名优茶生产要求;鱼叶展后15 d,节间长度和展叶角度已达适合机采状态,此时机采可有效控制破碎率的增加.适当增施肥料,能增加节间生长长度,有利于机采.
对国内不同地理来源的10个马铃薯腐烂线虫群体进行同工酶表型研究,同时在2个中抗甘薯茎线虫病品种(苏薯9号、宁薯9-9)上测定马铃薯腐烂线虫群体致病力、繁殖力、雌雄比(性比)、甘薯薯块鲜重损失量.结果表明:①10个群体苹果酸脱氢酶(MDH)酶谱分为2个酶型, 酶型Ⅰ的相对迁移率(Rf值)约为0.21、0.26;酶型Ⅱ的Rf值约为0.21、0.26、0.31,而酯酶染色不成形;②在P=0.05水平上,各群体间的致病力、繁殖力、性比差异显著,其中致病力最高的群体来自河北廊坊DeHB,对苏薯9号的致病力为75%;③在苏薯9号和宁薯9-9上,各线虫群体致病力与线虫繁殖力呈正相关;④偏相关分析显示,在苏薯9号上不同线虫群体繁殖力与性比呈负相关,相关系数为-0.213,而在宁薯9-9上不同群体繁殖力与性比呈显著正相关,相关系数为0.901,说明寄主品种的改变对线虫群体性别分化影响显著;⑤在抗甘薯茎线虫病和保鲜力方面,宁薯9-9分别比苏薯9号高33.48%和19.86%.
为了快速无损获取油菜叶片叶绿素含量信息,试验研究了油菜叶片的可见-近红外反射光谱特性与叶绿素含量之间的定量关系.试验采集140个油菜叶片样本,其中70个样本用于建模,另外70个样本用于模型预测.光谱曲线扫描采用美国USB4000光纤光谱仪,叶绿素含量值采用日本Minolta 公司生产的SPAD-502仪测定.实验发现,波段范围680～730 nm处的光谱吸光度与油菜叶片叶绿素含量之间具有显著相关性.同时发现油菜叶片厚度对建模预测精度有较大影响.试验首先用待定系数法构造叶绿素含量预测方程;然后用标准遗传算法对其进行参数优化.试验确定最优光谱范围是696.82～716.53 nm.不考虑叶片厚度时,建模和预测关联度r分别是0.4823 和0.5649.考虑叶片厚度校正后,建模和预测关联度r分别提高到0.8936 和0.9178.说明基于可见-近红外反射光谱技术实现油菜叶片叶绿素含量快速无损检测是可行的.
提出一种基于支持向量回归的粮食产量预测方法,以浙江省近14年的粮食产量统计数据作为分析对象,选择影响粮食产量的农业从业人员、谷物播种面积、粮食总种植面积、农村机械总动力、农村用电量、受灾面积、成灾面积、上一年粮食收购价格、有效灌溉面积和化肥施用量等10个因素,用1991-2002年的产量数据进行建模,得到98.47%的拟合精度.应用这一模型,对2003和2004年度的粮食产量进行预测,分别达到97.5%和95.8%的预测精度.说明该方法适合用于粮食产量分析和短期预测,为粮食产量预测提供了一种新方法.
选择36头"杜长大"三元杂交断奶仔猪,按饲养试验要求分为2组,分别饲喂不含和含有0.15%β-葡聚糖、木聚糖复合酶(GXC)的大麦型饲粮,进行为期28 d的饲养试验,研究大麦型饲粮中添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶对其血清IGF-I水平和肝脏IGF-I mRNA表达的影响.结果表明,添加复合酶组日增重提高13.99%(P＜0.05),料重比降低6.32%(P＜0.05),日采食量虽有升高趋势,但差异不显著(P＞0.05);添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶显著增加断奶仔猪血清IGF-I水平和肝脏IGF-I mRNA丰度,比对照组分别提高43.91% (P＜0.01)和33.43% (P＜0.01).结果提示,添加β-葡聚糖、木聚糖复合酶不仅能够改善断奶仔猪对大麦型饲粮的利用效率,而且还影响血清IGF-I水平和肝脏IGF-I mRNA表达,从而提高仔猪对饲料的转化效率,促进其生长.
选取太湖流域南冀31处代表性滨岸带湿地采样点进行底泥-上覆水磷素状况面上调查,并选取该区腹地下渚湖湿地作为典型案例研究.面上调查表明,湿地底泥含总磷(TP)0.17～1.20 mg·g-1,最大吸附量(Qmax)为228.1～824.5 mg·kg-1,存在富磷化趋势.底泥NaOH+EDTA-P的积累与TP密切相关,并伴随其积累Olsen-P含量提高.湿地上覆水含TP 0.036～0.944 mg·L-1,普遍达到水体富营养化水平;总颗粒态磷(TPP)占TP含量的69.1%±15.0%,溶解态活性磷(DRP)相对较低;水源区湿地水体磷素水平低下.面上调查与典型案例下渚湖湿地研究发现,底泥TP及(或)Olsen-P与对应上覆水TP浓度之间没有显著相关性,仅从内源底泥富磷水平及其组分特征分析不能直接预测太湖流域南冀滨岸带湿地上覆水的磷素变化趋势.
为了解污染土壤中有机质积累与重金属积累之间的相互影响,在供试土壤中添加不同等级的有机物料和重金属元素Pb与Cu,在培养条件下研究有机物对土壤重金属稳定性的影响及不同重金属添加量对土壤生物呼吸强度和有机质矿化的影响.结果表明,随着重金属添加量的增加,土壤微生物生物量和有机质矿化速率显著下降,添加的有机物料残留增加,促进了土壤有机碳的积累.同时,有机碳的积累又增加了土壤对重金属的吸附固定,增加了土壤中重金属的稳定性,降低了其淋溶性,有利于重金属在土壤中的积聚.分析结果表明,颗粒态有机质中重金属的富集是土壤有机质矿化减弱和重金属稳定性增加的主要原因.由此推断,污染土壤中重金属和有机质可通过形成重金属-颗粒态有机质复合体发生相互促进稳定或积聚的作用.
利用浙江统计年鉴等资料,分析浙江省自1978年以来耕地资源数量和质量的变化态势.针对耕地资源减少、耕地质量下降、耕地产能低下等问题,提出在严格保护耕地的前提下,构建耕地集约利用体系:优化耕地资源配置,对关系国计民生的重要农产品如粮油、蔬菜、畜禽生产等规划一定面积建立农业功能区,进行重点建设;通过提高农业技术装备水平和创新农作制度等技术替代途径,提高耕地集约水平;最后提出了保护和集约利用耕地资源的保障机制和措施.
