核衣壳蛋白(N)是传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白之一. 以前的研究结果显示IBV-ZJ971毒株以引起腺胃肿大为特征,IBV-X和N毒株以引起肾炎为特征.为了探讨不同组织嗜性传染性支气管炎病毒N基因的变异,我们依据已发表的IBV- Beaudette 毒株N基因的序列设计和合成引物,RT-PCR扩增IBV-ZJ971、N、X和H52的核衣壳蛋白基因,并测序、分析和在E.coli中进行表达.结果显示:IBV-ZJ971、N、X和H52毒株的N基因的ORF由1230 bp组成,编码409个氨基酸.与来源于GenBank中的IBV毒株比较,IBV-ZJ971、N、X和H52与其它IBV毒株的核苷酸同源性分别是87.0-98.6%、86.6-99.7%、86.3-99.7%、87.2%-98.5%,氨基酸的同源性分别是90.0-97.8%、 90.5-98.8%、 90.0-98.8%、 91-98%.IBV-ZJ971毒株的N蛋白不同于其他IBV的独特变异是111,117, 142, 171 和 401位点上的氨基酸改变,IBV-N和X毒株的N蛋白不同与其它IBV的独特变异是46, 48, 189,190, 220, 223, 236, 237, 240, 286, 299, 301 334, 335, 336 and 351位点上的氨基酸改变.说明IBV嗜腺胃毒株(ZJ971)和嗜肾毒株(N和X)的N基因以散在的点突变为特征.将IBV-ZJ971毒株的N基因在E.coli中表达,并用western-blotting检测,发现IBV-ZJ971的N蛋白是一分子量约为45 kD的蛋白.

鸡白细胞介素2(IL-2)是一种在机体免疫调节中具有多种功能的细胞因子.本研究将萧山鸡白细胞介素2基因克隆入原核表达载体pET-28b,获得了重组表达载体pET-28b-IL-2,将此重组表达载体转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达萧山鸡IL-2.SDS-PAGE结果表明,萧山鸡IL-2在大肠杆菌中得到了表达,以此表达产物制成油乳剂苗免疫家兔,用ELISA和Western blotting检测兔血中的多克隆抗体,结果均为阳性.因而为进一步开展鸡IL-2的结构和功能研究奠定了基础.

选择96头体重28 kg左右的杜长大三元杂交猪,按试验要求分成四组,分别饲喂不同苏氨酸与赖氨酸比例(0.62,0.67,0.72和0.78)的饲粮,研究不同苏氨酸与赖氨酸比例对生长肥育猪生长性能和胴体组成的影响.结果表明,不同苏氨酸与赖氨酸比例对猪生长性能和胴体组成有一定的影响,其中以0.72比例组效果最为显著,全程日增重提高了4.92%,瘦肉率提高了6.47%,肌肉重增加了11.50%(P<0.05),但不同苏氨酸与赖氨酸比例对生长肥育猪内脏器官未产生显著影响.

利用Y-型嗅觉仪研究了螟蛉绒茧蜂对水稻、二化螟和稻纵卷叶螟幼虫及虫粪挥发物的行为反应.健康水稻苗、两种害虫的幼虫及虫粪的挥发物对螟蛉绒茧蜂雌成蜂都有显著引诱作用.在两种害虫为害水稻苗与健康水稻苗之间,螟蛉绒茧蜂雌成蜂显著地选择虫害苗,但当去除虫害苗中的幼虫和虫粪后,寄生蜂对二者的选择无显著差异.水稻苗以两种害虫唾液处理或机械损伤处理后,其挥发物对螟蛉绒茧蜂的吸引作用无显著改变.在两种害虫幼虫、虫粪及其为害苗的挥发物之间,螟蛉绒茧蜂显著地趋向稻纵卷叶螟幼虫、虫粪及其为害苗.结果表明,螟蛉绒茧蜂栖境定位和寄主选择过程中所利用的挥发物主要来自寄主植物、寄主幼虫和虫粪.

在室内调查了分别以2龄、3龄和4龄小菜蛾幼虫作寄主时,及20、26、28和32 ℃下菜蛾盘绒茧蜂和菜蛾啮小蜂间竞争结果.当2龄或3龄小菜蛾幼虫供2种蜂同时产卵寄生时,绒茧蜂的寄生率显著高于啮小蜂的寄生率;分别与其单独寄生时比,前者无显著差异,而后者则显著下降;二种蜂的合计寄生率与任一种蜂单独存在时的相比,以2龄幼虫作寄主时无显著差异,但以3龄幼虫作寄主时则显著提高.当4龄小菜蛾幼虫供2种蜂同时产卵寄生时,绒茧蜂的寄生率与啮小蜂的寄生率之间无显著差异;二种蜂的合计寄生率显著比绒茧蜂单独存在时的高,但与啮小蜂单独存在时的寄生率相比无显著差异.当2种蜂共存时,在所测试的4个温度下,绒茧蜂的寄生率均高于啮小蜂的寄生率,与其单独寄生时的相比,绒茧蜂的寄生率无显著变化,而啮小蜂的寄生率均显著下降.这些结果表明寄主龄期比温度对这两种蜂种间竞争的影响更大.

研究了Bt水稻两个纯合品系TT9-3和TT9-4在田间对飞虱、叶蝉及其卵寄生蜂扩散规律的影响.结果表明:在Bt稻区与对照(IR72)区间相互扩散的飞虱有白背飞虱(Sogatella furcifea)、褐飞虱(Nilaparvata lugens);叶蝉有黑尾叶蝉(Nephotetix cincticeps)、白翅叶蝉(Erythroneura subrufa)和电光叶蝉(Deltpcephalus dorsalis);其中以白背飞虱和黑尾叶蝉为主.扩散数量叶蝉多于飞虱;扩散方向以Bt稻区向对照区扩散为主,其中TT9-3与IR72、TT9-4与IR72间白背飞虱与黑尾叶蝉的扩散量差异均达显著水平(P<0.05).在Bt稻区与对照区间相互扩散的飞虱和叶蝉的卵寄生蜂有稻虱缨小蜂(Anagrus spp.)和叶蝉柄翅小蜂(Lynaenon longicrus),数量上后者多于前者,扩散方向也以Bt稻区向对照区扩散为主.

为了证实GFLV-H P38蛋白的性质及其在寄主扩散中的作用,根据葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus, GFLV)法国分离物F13 RNA2序列合成特异性引物,利用RT-PCR从GFLV-H基因组中扩增出P38蛋白基因的cDNA片段,并克隆到pGEM-T-easy vector上.序列分析表明该基因包含1044个核苷酸,编码347个氨基酸.序列比较发现GFLV-H P38蛋白基因与GFLV-F13对应基因核苷酸和氨基酸的同源性分别为90%和96%;与线虫传多面体病毒属中的南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus, ArMV)和番茄环斑病毒(Tomato ringspot virus, TomRSV)对应基因氨基酸同源性分别为85%和38.6%,与烟草黑环病毒(Tabacco black ring virus, TBLV)、葡萄铬色花叶病毒(Grapevine chrome mosaic virus, GCMV)和树莓环斑病毒(Raspberry ringspot virus, RRSV) 的同源性均低于30%.

从美国引进对刺吸式口器害虫具侵染力的玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)菌株Pfr116,用5种培养液在25 ℃下进行深层培养,以菌丝生物量作为指标筛选出了适合于工业生产的发酵液配方(w/v):食用蔗糖2%,马铃薯20%,蛋白胨0.1%,NaNO3 0.01%,KCl 0.01%,MgSO4 0.025%,MnSO4 0.005%,FeSO4 0.005%及KH2PO4 0.05%.用此培养液对Pfr116 菌株进行48 h的深层发酵,可获>20 mg/mL的干菌丝产量,与萨氏培养液的菌丝产量无显著差异.通过对液培初始接种量和pH值进行优化,确定最佳初始接种量为培养液的菌丝含量1.5 ～2.0 mg/mL,最佳初始pH值为5～7.

研究了灵芝(Ganoderma lucidum)CJXN-9802的原生质体形成和影响原生质再生的各因素,其中包括酶,温度,渗透压调节剂和菌龄等.并对灵芝原生质体进行了紫外照射诱变,筛选获得了快速生长的诱变菌株.诱变株之一的灵芝CJXN-980222菌株硒含量有很大的提高,比出发株提高9.4%,生物量比出发株高14.3%.

铁蛋白是与铁离子结合的一种铁贮藏蛋白,用来调节细胞内的自由铁离子浓度.本研究利用农杆菌介导的转化方法将豌豆铁蛋白(pea ferritin, Fer)基因转化到水稻秀水11品种中.经对转基因水稻(T0代)进行了PCR检测,及Southern杂交分析,结果表明,Fer基因已整合到水稻基因组中.通过测定光合作用过程中最大光化学量子产量(Fv/Fm值)分析了由百草枯处理引起的水稻叶片的氧化损害.结果表明,转Fer基因的叶片呈现出不同程度的抗百草枯氧化的能力.用水稻稻瘟病菌接种水稻叶片,发现转Fer基因植株可以减少或延缓病原菌侵染后活性氧的产生.另外,对不同组织中的铁含量测定结果表明,转Fer基因水稻的种子和叶片组织中铁的含量明显提高.这些结果说明Fer在水稻中已表达,增加了转基因植株中铁的贮藏量,同时减少了体内的游离铁从而也减轻了转基因植株的氧化损伤.

WRKY类转录因子基因是一类植物所特有的基因,可能参与植物的发育、衰老和抗病等过程.本研究对一新克隆的受病原菌诱导的水稻WRKY(IosWRKY)基因进行了初步的功能分析.构建了IosWRKY基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中得到了有效的表达.体外分析结果表明IosWRKY融合蛋白能与顺式元件W盒(核心序列TGAC)特异结合.说明克隆的IosWRKY基因具有作为转录因子基因的最基本的特征.

从肉联厂和屠宰场附近的土壤和污水中采集到的近100个样品中,经富集培养分离到123株能产生弹性蛋白酶的菌株,反复初筛、复筛后,分离到一株产胞外弹性蛋白酶活较高且稳定的细菌,经初步鉴定属芽孢杆菌属(Bacillus sp. EL3).同时研究了其产酶最适条件, 产酶最适碳源为葡萄糖, 最适氮源为豆饼粉.并对碳源、氮源和生长因子进行了正交实验,研究发现碳源对产酶的影响最大,其次为氮源.当葡萄糖的用量为6%、豆饼粉为5%、玉米提取液为0.2%时,其具有较高的产酶水平.最适发酵初始pH为7.5 , 250 mL 最适摇瓶装液量为20 mL.在该发酵培养基中培养,35 h时达最高的产酶水平.同时还对离心后的粗酶液进行温度和pH试验, 发现该酶最适作用温度和pH分别为50 ℃和7.4, 该酶在40 ℃以下保温30 min酶活仍较高, 在60 ℃以上酶活全部丧失.在pH7.4～9.0的范围内比较稳定, 而在pH 7.0以下时, 酶活下降很快.金属离子Cu2+、Zn2+、Al3+能抑制弹性蛋白酶的活性,而Fe3+、Li2+能激活弹性蛋白酶活性,螯合剂EDTA则严重抑制弹性蛋白酶活性.

黄瓜枯萎病(Fusarium oxysporum (SChl) f. sp. cucumerinum)不但是一种土传病害而且也可通过种子传播,该病自1925年首次由Weber在美国报道以来,先后在韩国、澳大利亚、日本、以色列、埃及、意大利等国流行,造成部分地区瓜类损失达40%以上,已成为威胁黄瓜生产的重要问题.在我国,近几年来由于保护地栽培面积的不断扩大,上海、陕西、河北等21个省市和地区都有不同程度的发生,已引起有关部门的高度重视.该病病原菌尖胞镰刀菌黄瓜专化型虽然专化性较强,但是在苗期还可以严重侵害甜瓜,引起甜瓜发病.故通常提倡与非寄主作物轮作,以作为防治黄瓜枯萎病的重要措施之一.然而,国内外对于甜瓜与大蒜、黄瓜、萝卜等大棚蔬菜轮作是否能够防病尚无报道.为此,我们于2000～2001年间在浙江省嘉兴市农业科学研究院保护地大棚内进行了试验,同时也进行了室内抑菌作用研究.……

我国水稻生产氮肥用量大,氮肥利用率低.大量N素从稻田流失进入环境,对环境生态构成潜在威胁.经与IRRI协作,为金华双季稻区创立了适地养分管理新技术(SSNM).SSNM的施肥综合考虑了当地的气候条件,水稻品种的潜在产量和养分需求,土壤固有养分的供应能力,养分利用效率和平衡养分供应,以及社会经济效应等.同农民常规施肥相比,在产量略有增加的同时,SSNM可以显著提高氮肥利用率,平均减少氮肥用量约30%,从源头上遏制了氮肥引起的面源污染.多年的田间试验表明,SSNM具有在广大稻区推广的前景.

以23个棉花品种接种18个黄萎病菌株的抗感表现(病情指数)为分析对象,介绍了广义线性模型分析无重复试验互作效应的方法,并对其结果与AMMI模型分析、常规的方差分析及数据转换后的分析结果进行了比较.结果表明:常规方差分析不能对无重复试验资料分析其互作效应,广义线性模型和AMMI模型能分析无重复试验的互作效应,但广义线性模型方法是更为简便而有效方法.

以位于太湖流域的浙江省平湖市为例,采用GIS与地统计学相结合的方法对其耕层土壤(0～20 cm)的有机质、全氮、速效磷、速效钾等4种养分要素的空间变异特征进行了分析.结果表明:有机质和全氮变异函数曲线的理论模型能很好地符合球状模型;速效磷经对数转换后也符合球状模型;而速效钾的变异函数曲线则符合指数模型.有机质、全氮和速效磷具有很强的空间相关性,说明受母质、地形、土壤类型等自然的结构性因素影响较大;速效钾具有中等的空间相关性,说明由施肥、作物、管理水平等随机因素引起的空间异质性起很大作用.整个研究区东南部土壤质地较轻,大量施肥在提高其作物产量的同时,也可能会带来农业非点源污染等问题.

利用GIS技术对庆元县山地灾害与地形、地貌、坡度和坡向作空间叠置分析结果表明:山地灾害发生密度,以高丘地形、凝灰岩低丘地貌、东南向缓坡最高;山地灾害绝对发生量,则以低山地形、凝灰岩低山地貌、东南向斜坡地段最大.

通过对千岛湖1989～1999年间水质常规监测资料的统计分析,探讨了湖区不同点位主要污染物的变化特征及其形成原因.分析表明,氮、磷是千岛湖水体的主要污染物,污染物浓度年际差异较大,各断面的总氮和总磷浓度在Ⅲ～Ⅴ类间,最高浓度是水环境功能区划标准的10倍,呈严重超标状态;在空间分布上,新安江来水和西南湖区污染最为严重,中心湖区和东南出水湖区的水质相对较好.开垦坡地和不适当的造林方式导致的水土流失及化肥农药淋失是引起湖区水体富营养化的主要原因.

以奉化‘玉露'和‘湖景蜜露'桃为试材,分别在盛花后45 d和55 d采集桃幼胚,以MS+2% 蔗糖+0.75% 琼脂为基本培养基,其中加入不同浓度配比的NAA和BA为调节激素.并置培养基于(26±1) ℃,光照强度2000～3000 lx,16 h/8 h光暗周期的环境下,研究激素配比、品种、取样时间对桃子叶再生能力的影响,并对不定芽发生部位进行了观察.结果表明:NAA 0.25 mg/L+BA 5.0 mg/L、NAA 1.0 mg/L+BA 5.0 mg/L、NAA 0.50 mg/L+BA 10.0 mg/L 3种激素配比有利于桃子叶再生;‘玉露'的再生能力较高于‘湖景蜜露',盛花后55 d的幼胚子叶比花后45 d的幼胚子叶稍易再生;桃幼胚子叶不定芽可产生于子叶的背茎面、向茎面等各部位.

为查清浙江省白豆杉资源状况,应用典型抽样的原理对浙江省白豆杉分布面积、数量、生境、植物区系及群落特点等进行实地的样方调查.调查得知,浙江省白豆杉有11个分布点,根据29个样方的调查资料推算,浙江省白豆杉的资源总量为24.22万丛,分布面积为408.08 hm2;通过对资料的整理分析,浙江省白豆杉群落的植物区系具有起源古老,珍稀植物较多,地理成分复杂,并具有明显的过渡性等特点;其群落类型属于4个植被型,8个群系组,11个群系类型,白豆杉的生长分布与其所处生境和伴生种猴头杜鹃存在着密切联系.

应用氟离子选择电极测定土壤的全氟的含量,对标准曲线测定法、TISAB标准加入法和高氯酸标准加入法进行了比较. 结果表明,TISAB标准加入法的回收率最高,加标回收率在86.9%～102.3%之间,平均回收率达96.8%. 高氯酸标准加入法次之, 平均回收率为93.8%, 标准曲线测定方法平均回收率最低, 只有88.4%. 实测结果表明, 3种方法所得数据之间无显著差异, TISAB标准加入法和高氯酸标准加入法的测量结果较为接近, 但相比较而言, 后者试剂更为简单, 价廉, 更具实用性.

阈值法是最基本的图像分割方法之一,被应用于很多领域,特别是在图像相对简单的生物图像处理方面得到了广泛使用.本文对现有的各种图像阈值分割方法进行综述,重点介绍了基于图像灰度直方图的阈值分割方法.

植物防御素是一类小肽物质,具有很广的抑菌谱.本文对植物防御素生物学特性、产生机理、空间结构以及作用机理进行了综述,并简述了其研究意义和应用前景.