以玉树的茎、叶、根为外植体,研究不同培养基和植物生长调节剂对其再生的影响.结果表明,在附加0.1～10 μmol·L-1 NAA和10 μmol·L-1 BA的MS培养基上,不定芽形成率达到100%,每1个外植体再生芽数达到10个以上.将再生芽转接到含有1 μmol·L-1 NAA或者1 μmol·L-1 IBA的1/2MS培养基上,发育成健壮小植株.生根植株移栽到大田,生长良好,8个月后株高达27 cm.

超积累生态型东南景天被处理在含1000 μmol·L-1 Zn(NO3)2或200 μmol·L-1 CdCl2的营养液中25 d,每5 d测定植株地上和地下部Zn/Cd含量以及地上部总硫、谷胱甘肽(GSH)含量的变化,分析硫离子浓度对重金属积累能力的影响.结果表明:处理的前15 d,地上部Zn/Cd的积累量呈线形增加,后10 d积累速度下降;总硫和GSH的含量在前15 d迅速增加,后10 d逐渐下降;根中Zn含量变化与地上部GSH、总硫变化趋势相似,而Cd含量在第5 d时最高,以后逐渐下降.以上结果提示:含硫有机物不是东南景天Zn/Cd超积累的主要配体,GSH主要是解除体内游离态Zn/Cd的毒性;增加硫元素的供应对提高Zn/Cd的积累有一定作用.

通过PCR方法从水稻cDNA文库中克隆到1个水稻AP2/EREBP类的转录因子基因Os922,并构建增强表达载体CoU-Os922.使用光照共培养方法将根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105转化到粳稻(Oryza sativa L.)秀水11的幼胚,得到转基因水稻植株.对所得潮霉素抗性水稻植株的PCR和Southern blot分析表明,Os922基因已整合到受体基因组中.T1代转基因植株根的生长被葡萄糖抑制,表现出对葡萄糖的敏感性,表明Os922基因可能与糖信号传导有关.

采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出AGPase胞质型大亚基基因(large subunit,LSUⅠ)的cDNA全长(1947 bp,GenBank No.DQ839506),同源性比较结果表明,与GenBank上已报道的LSUⅠ基因同源性达99%,虽与其有2处碱基不同(与Z21969相比,分别在851 bp处的T变为C和926 bp处的G变为A),但他们的氨基酸序列相同,故不影响其功能.以pBI121质粒为基础,通过中间载体pBSK,构建了由35S启动子调控的LSUⅠ基因的正义表达载体pBI121LSU Ⅰ S;将该基因反向置于pBI121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了LSUⅠ的反义表达载体pBI121LSU Ⅰ A.同时还克隆出LSUⅠ基因的250 bp片段,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGCLsuⅠ,这为研究该基因的功能打下了很好的基础.

为研究海水鱼中Follsitatin基因的组织表达特异性,利用PCR方法获得牙鲆Follistatin基因启动子并进行序列分析,用RT-PCR和显微注射方法研究Follistatin基因与肌肉发育的关系.结果表明,所获得的启动子含有USF、F47、MyoD、NF-Y等多种转录因子结合位点;在牙鲆成体组织中,Follistatin基因在体肾、肠、心脏、头肾、脾中有表达,而在肌肉和肝脏中没有表达;显微注射证明Follistatin基因参与了肌肉的早期发育.

为研究海水鱼中Follistatin基因的序列特征,从受精后67 h的牙鲆受精卵中克隆获得牙鲆Follistatin基因cDNA序列,并对其进行序列分析.结果表明,在牙鲆中并没有发现Follistatin基因的可变式剪切现象;牙鲆Follistatin基因cDNA序列全长963 bp.序列分析结果显示:牙鲆与Takifugu rubripes的亲缘关系最近.Follistatin蛋白中高度保守的半胱氨酸和甘氨酸残基的生物学功能可能是维持蛋白空间结构的稳定.

对茶园土壤中耐酸铝微生物进行分离纯化,并选择其中的3株真菌,用通用引物NS1和NS8 PCR扩增出全长18S rDNA基因,测序后与GenBank数据库中的相似序列构建系统发育树,结合真菌形态分析,初步鉴定为:Aspergillus zonatus,Penicillium sp.和Rhizopus sp..他们都具有很强的耐酸铝特性,其中F2株甚至可以在200 mmol·L-1的Al3+、pH2.2的条件下生长.在pH3.5的琼脂平板培养基上,铝对3株真菌生长速率的影响总体表现为:随Al3+浓度的增加而下降,其中F6株较为明显,而低浓度的铝(10 mmol·L-1)对F2株生长有一定促进作用.在pH3.5的土壤提取液培养基(S-LB)中培养7d后,3株真菌的培养液pH均升高到7.0左右,铝的含量也由于pH的升高而降低;在含1.0%葡萄糖的土壤提取液培养基中,培养液pH却降低到2.7左右,并且铝的含量几乎没有变化.这些结果揭示了分离的真菌可能具有不同的耐酸铝机制.

于2004-2006年采用诱蝇谜对云南潞江坝桔小实蝇成虫种群动态进行诱捕监测,并就气候因子及寄主植物对该种群变动的影响进行系统分析.云南潞江坝桔小实蝇成虫种群表现出全年性发生,并明显分为种群高位(5～11月)和低位(12～4月)2个时期,成虫种群增长呈单峰型,高峰期出现在8月.芒果、龙眼、柑桔、番木瓜、荔枝、番石榴是桔小实蝇在该地区的主要寄主水果,其种植面积、挂果期和产量对桔小实蝇种群数量变动影响较大,是影响该地区桔小实蝇种群变动的主要因素之一.逐步回归分析揭示,月平均气温、月平均最高气温、月降雨量、月雨日数、月日照时间和月相对湿度综合影响5～11月潞江坝桔小实蝇种群数量变动,其中雨日数和空气相对湿度的影响最为明显;月平均气温、月平均最高气温、日照时间和空气相对湿度综合影响12～4月潞江坝桔小实蝇种群数量变动,其中月平均最高气温和月平均气温的影响最为显著.

通过对焦脱镁叶绿酸-a紫外可见吸收、化学发光以及电子自旋共振(ESR)等特性的研究,证实焦脱镁叶绿酸-a具有良好的光敏助氧化作用,其光敏化作用沿Ⅱ型机制进行.通过光照条件下焦脱镁叶绿酸-a对Tn-5B1-4细胞存活率的测定和饲毒法对鳞翅目害虫的胃毒作用研究发现:焦脱镁叶绿酸-a在浓度为10 μmol·L-1处理48 h光照30 min时细胞存活率仅为6.29%;用焦脱镁叶绿酸-a处理48 h并经紫外灯和可见光照1 h后,小菜蛾(Plutella xylostella L.)3龄幼虫的死亡率各为60%和100%,明显高于对照组,证明焦脱镁叶绿酸-a对Tn-5B1-4细胞和鳞翅目害虫的生长有严重影响.说明焦脱镁叶绿酸-a具有极好的光敏助氧化生物活性.

在体外构建一个以Src蛋白为靶位点的蛋白酪氨酸激酶抑制剂快速筛选模型,为筛选Src蛋白酪氨酸激酶抑制剂奠定基础.基因工程表达GST-v-Src蛋白,收集包涵体蛋白,并经变性复性处理.以生物素化的聚Glu∶Tyr(4∶1)为激酶反应底物、以辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的磷酸酪氨酸特异性单克隆抗体(HRP-PY20)检测磷酸酪氨酸残基的酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定获得蛋白的激酶活性,并进行抑制剂筛选.该模型具有靶向性强、快速、简便可行、高通量的特点.用该方法对6种治疗肿瘤配方中常用的中草药进行筛选,筛选出3种中草药水煎剂富含Src蛋白酪氨酸激酶抑制剂成分.

为了提高抗体的表达水平,获得有保护作用的人源性破伤风抗毒素Fab(TAT-Fab)抗体,对人源性TAT-Fab抗体在大肠杆菌中的表达条件进行优化并测定其体内外生物学活性.ELISA显示所表达的TAT-Fab抗体可特异性结合破伤风外毒素,且优化后的表达水平较优化前提高近5倍;表达产物经超滤分离浓缩后,Western-blot显示在分子量约50 kDa处有一TAT-Fab抗体的特异性表达条带;小鼠保护实验显示其可特异性中和破伤风外毒素,明显延长小鼠的生存时间.以上结果表明所制备的人源性TAT-Fab抗体在体内外均具有中和破伤风外毒素的效应,为人源性破伤风抗毒素的研制和生产提供了实验依据.

为研究樟科植物提取作为脲酶抑制剂对仔猪粪尿氮排泄的影响,选取杜长大三元杂交30日龄断奶仔猪480头,按胎次、体重相近和公母基本一致分成5个处理组,分别饲喂添加不同剂量樟科植物提取物的日粮,即空白对照组Ⅰ、150 mg·kg-1组Ⅱ、300 mg·kg-1组Ⅲ、450 mg·kg-1组Ⅳ、600 mg·kg-1组Ⅴ,每个处理设3个重复,每个重复32头猪.结果表明:第Ⅳ、Ⅲ组与第Ⅰ组相比,料肉比分别降低5.67%(P＜0.01)和4.64%(P＜0.01);第Ⅳ、Ⅴ组与第Ⅰ组相比,粪样中微生物的脲酶活性显著降低(P＜0.05);第Ⅴ、Ⅳ组的尿素分解减少,总氮保持率提高,48 h后与第Ⅰ组差异均达到极显著水平(P＜0.01).樟科植物提取物的添加使血清中总蛋白含量提高、尿素氮含量降低.试验结果表明樟科植物提取物添加在断奶仔猪日粮中能够促进仔猪生长,抑制粪中脲酶活性,减少粪尿氮排泄,最佳使用剂量为450 mg·kg-1饲料(Ⅳ组).

以皮特兰猪与我国地方猪种金华猪杂交的资源家系为材料,分析猪肉颜色指标与其他肉质和胴体指标之间的相关性.结果表明猪肉颜色指标间普遍存在显著的相关性,除明度系数L值与红度a值和色调角h值相关不显著外,其他猪肉颜色指标之间的相关系数都达到极显著水平(P＜0.0001);猪肉颜色与其他肉质指标和胴体指标之间也普遍存在相关性,其中较多为负相关.L值、彩度c值与眼肌pH、腿肌pH、眼肌面积、系水力呈显著的负相关(P＜0.05);a值、绿度b值与腿肌温度、眼肌面积呈显著的负相关(P＜0.05);b值还与系水力呈极显著负相关(P＜0.01);h值与眼肌温度、腿肌温度呈极显著的正相关(P＜0.01).

为了解土壤颗粒态有机质(POM)中重金属的富集机理,采用化学试剂选择提取方法,把POM中铜和铅分为可交换态、络合态、有机质紧结合态和矿质态等4种形态.结果表明,与细土(＜0.05 mm)相比,POM中铜和铅的有机质紧结合态、可交换态和络合态比例较高;可交换态重金属比例随POM粒径减小而下降,络合态重金属比例却随POM粒径减小而增加.污染土壤中分离获得的POM有较高比例有机质紧结合态铜和铅,而人为添加的铜和铅在POM中主要向络合态和交换态转化.研究认为,污染土壤中有机质紧结合态重金属大多可能是经植物吸收进入土壤后分解残留所致;而POM中络合态和交换态重金属主要通过有机质与土壤重金属的交换和络合作用而富集.

针对近沟渠水稻田氮素流失通量的估算问题,开发了基于一级动力学反应规律和水氮耦合平衡的氮素迁移模型,综合考虑了尿素氮施入稻田后的各个转化过程和流失过程,采用田间长期观测值与模拟值的比较进行模型参数的校准与验证.田间水稻稳定生长季内的观测数据表明,稻田氨挥发和水稻氯吸收各占施肥量的26.6%～29.4%和38.2%～44.8%,氮素通过径流、下渗和侧渗流失的通量分别占施肥量的5.6%～7.7%,4.0%～4.9%和5.0%～5.3%.这些观测值与模型模拟值较符合,各观测值与模拟值误差在20%以内,说明模型能胜任近沟渠稻田氮素多维通量的估算.

为探明杭州市城市土壤中重金属元素的分布、与土地用途之间的关系以及环境风险,采集杭州城82个样点土壤,分析其重金属含量、形态和释放潜力.结果表明,该市城市土壤中重金属均有不同程度的积累,重金属含量一般以商业区和工业区最高,农业区较低;居民区土壤重金属的积累随居民区建成时间的增加而增加.城市土壤中Cd、Co、Cr和Ni主要以残余态占优势,Cu、Pb和Zn主要以可提取态为主,土地利用方式对土壤重金属形态也有一定的影响.城市土壤重金属的稀酸提取量主要与提取平衡液的pH有关,但大部分研究土壤中酸可提取的重金属量较低.杭州市城市土壤重金属污染具有显著的空间分异特征,严重污染区域大致呈西北-东南走向,包括了城北的大部分地区、市中心和城东南一些地区.

从生物陶粒反应器中筛选出6株异养硝化细菌,采用乙酸钠-氯化铵培养基培养细菌进行硝化特性研究.经过12 d好氧培养,6株异养硝化细菌对COD的去除率在45%以上,总氮和氨氮最终去除率在60%以上,并且具有产生NOx--N的硝化性能.采用污泥驯化手段富集好氧反硝化细菌,将得到的驯化污泥分离纯化,共得到5株高效好氧反硝化细菌(f1、f2、f3、f5、f7),他们对总氮(TN)的去除率分别为90.4%、91.2%、94.6%、95.6%、97%,表现出较好的总氮去除能力.将6株异养硝化细菌和5株好氧反硝化细菌扩大培养后,建立SBR反应器进行氨氮去除的试验研究.PCR-DGGE图谱表明,在反应器运行的不同时期,微生物群落结构发生动态演替.在反应器稳定运行期间,筛选的异养硝化细菌wgy5,wgy21,好氧反硝化细菌d5和Pseudomonas sp.的细菌是系统的优势菌群.

为了提高水稻种植面积遥感信息提取精度,将根据水稻生长期所选择的多时相遥感影像经过大气校正和几何校正后,实施单波段统计、主成份变换和比值变换,选出最佳组合波段,通过分析概率神经网络(probabilistic neural network,PNN)的学习算法和基本结构,对最佳组合波段影像实现PNN模型分类,并将其分类结果与反向传播(back propagation,BP)神经网络模型和最小距离法的分类结果进行比较.结果表明:PNN模型比最小距离法的分类精度高出近6个百分点;PNN模型比BP模型的分类精度高出近13个百分点;对于水稻种植面积提取精度,PNN模型比最小距离法的结果高出15个百分点.从本次试验可知,PNN模型是一种有效的遥感影像分类方法,在作物种植面积提取方面将具有独到的功效.