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浙江大学学报(工学版)
J4  2005, Vol. 39 Issue (5): 756-760    
论文     
人源性rhG-CSF单链抗体基因的克隆和表达
浙江大学 生命科学学院，浙江 杭州310027
 全文: PDF 
摘要：

从构建的噬菌体表面展示文库中，筛选出全新的人源抗重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）特异单链抗体（ScFv）的噬菌体克隆。ScFv被克隆到pCANTAB 5E载体上，以E. coli TG1为宿主，进行噬菌体表面呈现，以rhG-CSF为靶抗原进行免疫亲和富集筛选，经酶联免疫吸附试验（ELISA）鉴定，得到一株高亲和力克隆。DNA序列分析表明，该ScFv基因全长733 bp，其中重链可变区（VH）为366 bp，轻链可变区（VL）为322 bp。抗rhG-CSF的ScFv在E. coli HB2151中以可溶形式分泌表达，产物主要分布于周质中，占周质总蛋白的质量分数为20%～25%，经免疫印迹试验（Western-blot）分析显示该单链抗体黏均分子量为31 kD。
关键词： 单链抗体;  G-CSF抗原;  克隆;  表达    
出版日期: 2005-05-20
基金资助:

浙江省卫生厅优秀青年人才基金资助项目（2002QN2002）.
作者简介: 石君帆（1962—），男，浙江杭州人，博士，副研究员，从事分子和细胞生物学研究. E-mail: shijunfan@hotmail.com
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石君帆
钱凯先
杜润潘

引用本文:

石君帆 钱凯先 杜润潘. 人源性rhG-CSF单链抗体基因的克隆和表达[J]. J4, 2005, 39(5): 756-760.

DAN Jun-Fan, JIAN Kai-Xian, DU Run-Bo. . J4, 2005, 39(5): 756-760.

链接本文:

http://www.zjujournals.com/xueshu/eng/CN/    或    http://www.zjujournals.com/xueshu/eng/CN/Y2005/V39/I5/756

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