免疫斑点法和免疫捕获RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒
黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是葫芦科作物上重要的病毒之一。用提纯的黄瓜绿斑驳花叶病毒免疫新西兰大白兔制备 CGMMV的多克隆抗体 。该多克隆抗体的间接ELISA效价达1:512000,与CGMMV17.5 ku外壳蛋白有特异性反应,而与烟草花叶病毒、齿兰环斑病毒和健康植物没有任何反应。用ACP-ELISA分析多抗灵敏度表明多抗检测1:40960倍稀释的CGMMV病叶时仍呈阳性反应。用该多抗建立了检测CGMMV的免疫斑点法 (dot-ELISA)和免 疫捕获 RT-PCR方法(IC-RT-PCR) 。病叶汁液可被dot-ELISA检出的最大稀释度为1:10240。IC-RT-PCR从感染 CGMMV的病叶组织中扩增到与预期大小相同的480 bp DNA条带,且当 CGMMV病叶 稀释1:163840倍时检测仍呈阳性。检测CGMMV的 dot-ELISA和 IC-RT-PCR方法的建立为该病毒 病的诊断和控制提供了技术支撑 。