|
|
整期
收藏
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2024 (6): 827-972.
摘要(
0 )
PDF(45228KB)(
0
)
|
|
|
小地老虎AiGSTe3对高效氯氟氰菊酯胁迫的响应及其功能分析
收藏
曹付,余佳敏,张今,李斌,王勇,江连强,李世广,李茂业,刘苏
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2024 (6): 867-878.
DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2023.09.211
为明确小地老虎(Agrotis ipsilon)谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase, GST)基因AiGSTe3对高效氯氟氰菊酯胁迫的响应及其生物学功能,从小地老虎转录组数据库中检索得到AiGSTe3的cDNA序列,分析该基因的序列特征和表达水平及其编码蛋白质的酶学特性、对高效氯氟氰菊酯的代谢活性和抗氧化能力。结果表明:AiGSTe3的可读框全长654 bp,编码由217个氨基酸残基组成的蛋白质,其编码的蛋白质属于ε(epsilon)家族。AiGSTe3在幼虫中肠和蛹期表达水平最高。使用致死中浓度(median lethal concentration, LC50)的高效氯氟氰菊酯处理小地老虎幼虫后,AiGSTe3表达水平在12 h时显著上调。利用大肠埃希菌成功表达了AiGSTE3重组蛋白,该重组蛋白能够催化1-氯-2,4-二硝基苯与还原型谷胱甘肽结合,其最大反应速率(vmax)为4.33 μmol/(min?mg),米氏常数(Km)为0.33 mmol/L。高效液相色谱法分析结果显示,AiGSTE3具有在体外代谢高效氯氟氰菊酯的能力。此外,过表达AiGSTE3能够显著增强大肠埃希菌细胞对氧化损伤的耐受性。综上所述,AiGSTe3能够响应高效氯氟氰菊酯胁迫,其编码的AiGSTE3不仅能够直接代谢高效氯氟氰菊酯,而且可以缓解高效氯氟氰菊酯诱导的氧化损伤。
|
|
|
鲨鱼翅种属DNA条形码鉴定方法的建立及应用
收藏
蒋晓霞,沙才华,罗宝正,邵建宏,徐博文,黄海超,赵福振,周傲白雪,陈轩
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2024 (6): 920-929.
DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2023.10.231
精准鉴别鲨鱼翅的种属来源,是海关等执法部门履行《濒危野生动植物种国际贸易公约》(Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora, CITES)时面临的一项重大挑战。本研究建立了鲨鱼物种的细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome c oxidase subunitⅠ, COⅠ)基因DNA条形码鉴定方法,并应用此技术对珠澳口岸截获的113个鲨鱼翅样本进行分析。结果表明:本研究共鉴定出19个物种,以大青鲨(Prionace glauca)和镰状真鲨(Carcharhinus falciformis)等真鲨科物种为主;被列入2019版CITES附录Ⅱ的样本数占比56.64%,被列入2023版CITES附录Ⅱ的样本数占比90.27%。所建立的方法对全部样本均产生特异性扩增,并测得有效序列;所测得物种的种内遗传距离≤2.08%,均值为0.63%,种间遗传距离为2.42%~27.27%,均值为15.37%,最小种间遗传距离大于最大种内遗传距离,种间平均遗传距离约为种内的24倍。所有物种依据亲缘关系在系统发育树内得以有效聚类,同科物种进一步聚集成小支,小支间未见物种交叉分布。综上所述,基于COⅠ基因的DNA条形码技术能够准确鉴定鲨鱼翅的物种来源,对鲨鱼的多样性保护具有重要意义。
|
|
|
天目多胎羊繁殖性状遗传分析
收藏
李雪,洪巍,刘桂芬,魏晨,何军敏,张果平,张文静,龙丽,杨存明,田可川,黄锡霞
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2024 (6): 954-962.
DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2023.11.091
繁殖性状是养羊业中重要的经济性状之一。本研究旨在探究影响天目多胎羊繁殖性状的非遗传因素及其遗传参数,所用数据来自浙江赛诺生态农业有限公司2014—2022年的5 335头天目多胎羊的繁殖性能记录,包括胎产羔数、胎羔羊平均初生重、胎总产羔重和胎羔羊存活数。运用SAS 8.1和DMU软件分析非遗传因素对繁殖性状的影响,估计遗传参数和育种值,并进一步探讨遗传趋势和表型趋势。结果表明:胎次、产羔年份和产羔类型对各性状均有极显著影响(P<0.01)。胎产羔数、胎羔羊平均初生重、胎总产羔重和胎羔羊存活数的直接遗传力估计值分别为0.016、0.063、0.049、0.034,均为低遗传力性状。胎产羔数与胎羔羊平均初生重在遗传和表型上均呈负相关,胎羔羊平均初生重与胎羔羊存活数在遗传上呈正相关,但两者在表型上呈负相关,其余性状在遗传和表型上均呈正相关。胎产羔数的平均育种值呈先上升后下降趋势,平均表型值整体呈上升趋势;胎羔羊平均初生重和胎总产羔重的平均育种值整体呈先下降后上升趋势,平均表型值呈先上升后下降趋势;羔羊存活数的平均育种值和平均表型值均呈先上升后下降趋势。本研究为天目多胎羊繁殖性状的遗传改良奠定了基础,同时也为育种工作提供了指导。
|
|
|
白色瘤胃球菌双功能糖苷水解酶IDSGH5-23的表达与性质分析
收藏
韩俊彦,丁钰杰,尉俏女,徐晓锋,章成昌,张骥,王佳堃,尹尚军,徐洁皓,王谦
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2024 (6): 963-972.
DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2023.09.281
葡聚糖酶和木聚糖酶等糖苷水解酶(glycoside hydrolase, GH)是能水解、消减饲料中非淀粉多糖类抗营养因子酶制剂的重要组分。本研究基于前期构建的湖羊瘤胃微生物宏转录组文库信息,从瘤胃微生物cDNA中克隆了一种兼具葡聚糖酶和木聚糖酶双功能酶的基因IDSGH5-23,将其在大肠埃希菌中进行异源表达,并研究了重组IDSGH5-23蛋白的催化性质。结果表明:IDSGH5-23的理论分子量和等电点分别为45.8 kDa和4.44,与来自白色瘤胃球菌(Ruminococcus albus)的GH5蛋白(GenBank登录号:WP_013499238.1)的氨基酸序列相似度达99.51%。在本试验条件下,IDSGH5-23的最适反应温度和pH值分别为30 ℃和6.0,在pH 4.0~7.0范围内较为稳定;IDSGH5-23能高效催化大麦β-葡聚糖、地衣多糖、魔芋胶和榉木木聚糖,其中,水解地衣多糖主要生成纤维三糖,水解大麦β-葡聚糖生成聚合度大于3的纤维寡糖,水解榉木木聚糖生成木三糖至木六糖。综上所述,本研究获取了一个来自瘤胃微生物的兼具葡聚糖酶和木聚糖酶双功能酶的IDSGH5-23,为研发饲用酶制剂和制备寡糖奠定了基础。
|
|