促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAP激酶,MAPK)链是真核生物信号传递网络中的重要途径之一.MAPK链由3类蛋白激酶MAP3K-MAP2K-MAPK组成,通过依次磷酸化将上游信号传递至下游应答分子.本文主要阐述MAPK链在植物的逆境反应、抗病反应和激素调控等信号传递网络中的功能.

自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SP Amp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoRⅠ和XbaⅠ间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除HindⅢ位点端EcoRⅠ位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为 3.46 kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因.

对水稻受稻瘟病菌诱导的新因子Rim2的基因组结构进行了研究.以Rim2 cDNA片段作探针, 筛选水稻BAC文库并对其亚克隆, 获得了一个基因组DNA克隆Rim2-569.序列分析表明, Rim2-569序列具备Class 2 转座子的基本结构特征.它两端具有完整的末端颠倒重复(TIRs), 若干正向和反向的亚末端重复 (STRs) , 以及插入位点3 bp的同向重复.它TIRs上的保守序列CACTG有别于以往报道的CACTA转座子.该因子包含一个开读框, 其预测蛋白与CACTA转座子编码的TNP2、TNPD等转座酶有低程度的同源性.该因子没有能够编码类似TNP1/TNPA 的DNA结合蛋白的开读框.Southern杂交显示, Rim2因子在多个不同起源的水稻品种上广泛存在,连同检索结果,证明该家族具有很多拷贝.上述特点表明, 该因子属于一个与CACTA转座子有一定差异的新的转座子大家族.

应用定量结构-活性关系(QSAR)研究方法,对邻苯二甲酸酯类化合物的好氧生物降解性能与其化学结构间的相关性进行了研究,建立了受试物的好氧生物降解速率常数与分子连接性指数和结构参数的定量关系.结果表明,对邻苯二甲酸酯类化合物而言,取代基的空间结构参数是影响受试物好氧生物降解性能的重要因素.

群体水果动态图像的采集系统是水果品质实时检测与分级机器人系统的关键组成部分之一,主要由计算机、摄像机、图像采集卡、涡流式接近开关、水果和动态图像采集软件等组成.涡流式接近开关作为水果运动状况检测传感器,用于检测水果位置和触发动态图像采集.群体水果动态图像采集软件在Visual C++6.0环境下结合MIL-LITE函数库实现.根据水果实时自动检测和分级的特点及功能要求,提出了群体水果动态图像的时间序列连续场扫描采集方法,在来自于水果运动状况检测传感器的外触发信号的触发下,计算机视觉系统采集从时间t1到时间tn期间视场内连续运动的水果图像,这些渐进的时间序列水果图像在计算机内被综合后即可检测视场内的每一个水果的外观品质指标,用于分级控制.试验结果表明,该系统可在外界输入信号的触发下,以每秒12帧的速率实时采集群体水果的动态图像,研究结果达到了预期的目标.

探讨了在种衣剂中应用烯效唑防止油菜高脚苗及田间应用的效果.试验在油菜种衣剂中添加不同浓度的烯效唑并用于包膜3个油菜品种的种子,经室内试验筛选得到较适烯效唑浓度的种衣剂配方.田间试验表明,筛选出的含较适烯效唑浓度的油菜种衣剂Coat I包膜种子后可以有效防止油菜苗期的蚜虫危害,显著降低三叶期幼苗苗高、根颈长,显著增加叶龄和绿叶数;促进根颈粗和苗干重的增加.Coat I包膜处理还能改善油菜的经济性状,增加有效分枝数和单株角果数,提高了3个品种的籽粒产量,其中双72品种增产达18.9%.表明烯效唑通过种衣剂包膜种子处理能提高幼苗素质,有效解决油菜高脚苗问题,为油菜的高产稳产奠定基础.

采用不添加蛋白酶的方法从百合根茎中提取分离水溶性非淀粉多糖(WSNSP).用离子交换色谱和凝胶过滤色谱纯化WSNSP,测定了WSNSP的相对分子质量,其值为97.8 kD.另外,研究发现一些多糖是与蛋白质结合在一起的.

在25 ℃下,以菜蛾3龄幼虫作寄主,研究了菜蛾啮小蜂对已被菜蛾盘绒茧蜂寄生寄主的产卵寄生行为及其在与菜蛾盘绒茧蜂共寄生寄主中的发育情况. 菜蛾啮小蜂能产卵寄生已被菜蛾盘绒茧蜂产卵寄生的寄主,形成共寄生,其寄生率随寄主体内的菜蛾盘绒茧蜂卵的孵化而下降. 菜蛾啮小蜂能寄生寄主体内的菜蛾盘绒茧蜂高龄幼虫,直接将卵产在绒茧蜂体内,而形成重寄生,重寄生率随寄主体内绒茧蜂幼虫年龄增大呈增大趋势. 共寄生寄主中的啮小蜂不能发育到成虫. 重寄生的啮小蜂能完成发育,并从绒茧蜂的茧中羽化. 当未被寄生和已被菜蛾盘绒茧蜂寄生的寄主同时存在时,啮小蜂主要寄生于未被寄生的寄主. 表明菜蛾啮小蜂具有辨别寄主是否已被绒茧蜂寄生的能力.

用纯化的重组鸭IL-2蛋白免疫BALB/c 小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞进行筛选,阳性孔经三次有限稀释法克隆,成功获得5株能稳定传代并分泌抗鸭IL-2单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞,分别命名为:1H4、2B3、4G12、5F6、5H6,其中一株对鸡IL-2具有交叉反应性.各单克隆抗体腹水间接ELISA效价在1∶32000～1∶512000之间,抗体类型除mAb 5H6为IgG2a亚类外,其余4株mAb均为IgG1亚类,5株mAb的轻链都为κ链.经Western-blot分析表明,所获得的5株抗鸭IL-2单克隆抗体与鸭IL-2具有反应性,推测它们是针对序列决定簇的.

以浙江省慈溪市周巷镇蔬菜基地为例,按照国家发布的<土壤环境质量标准>和<农产品安全质量标准无公害蔬菜产地环境要求>评价,在地理信息系统技术支持下,利用加权指数求和法评价模型,在全国蔬菜地分等标准基础上结合周巷镇实际情况对其蔬菜地进行了分等.评价结果表明:本方法优于国家农业行业标准-蔬菜地分等;周巷镇蔬菜基地中属一等地为9 hm2;二等地为50 hm2;三等地为134 hm2;四等地为90 hm2.所以周巷镇可以建立无公害蔬菜基地.

在获得一个与白菜核雄性不育相关的编码细胞色素P450(CYP450)的基因CYP86MF的基础上,采用PCR技术在该基因的内部第901个碱基至第1338个碱基之间设计引物,扩增出438 bp序列作为反义基因片段.把该反义片段连接至pBI121双元载体质粒上得到CaMV35S组成型启动子的表达载体pBI35S-AMF,随后利用"三亲杂交"法将pBI35S-AMF质粒转入农杆菌LBA4404和EHA105两个菌株中.PCR扩增和酶切鉴定结果表明,所构建的反义CYP86MF基因植物表达载体pBI35S-AMF是正确的,并已成功导入了根癌农杆菌中.随后,按照已建立的遗传转化体系对‘上海青'白菜进行了转化,并获得130了多株转化再生植株.

对药用植物猫人参(大籽猕猴桃Actinidia macrosperma)中的无机元素应用电感耦合等离子体原子发射光谱法进行了半定量分析测定,结果表明,该植物中富含人体所需的各种无机元素(尤其是Ca、Mg、Mn、Fe等的含量), 具有较高的开发利用价值.

药用植物猫人参是浙江省的地方习惯用药,学名为大籽猕猴桃Actinidia macrosperma.C.F.Liang,其根茎部位入药,主产于浙江的富阳、临安等地,安徽、江西等地亦有。猫人参味苦、性寒,归肺、胃经,具有解毒消肿、祛风除湿的功效。……

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对国产菱属(Trapa L.)植物10个种16个样品的遗传变异进行了研究.从50个10碱基随机引物中筛选出18个多态性引物用于正式扩增,共扩增出205条DNA带,其中多态性带为165条,占79.5%.根据DNA扩增结果计算了菱属各种间的Nei's遗传一致度和遗传距离,并采用UPGMA构建了聚类树状图.根据RAPD分析的聚类结果,结合野外观察和形态学性状的聚类分析我们建议:(1)将国产菱属植物划分为3个种,即欧菱(T.natans L.)、野菱(T. incisa Sieb. et Zucc.)和细果野菱(T. maximowiczii Korsh.);(2)除细果野菱外,其余2个种中果实角的数目均有从四角转变为二角的,所以把角刺数目作为菱属种间划分的主要依据这一点值得商榷;(3)欧菱、丘角菱可能是栽培菱的野生种或近缘种;(4)细果野菱为现存菱属中最原始的种.

在葡萄深休眠期后,15%和20%的石灰氮处理能有效地降低葡萄枝条中下部芽的ABA的含量,提高GA与IAA的含量.18%NH4NO3处理对枝条下部芽的IAA含量提高作用不显著,但显著降低ABA含量,提高GA含量.15%和20%的石灰氮及18%NH4NO3处理后都能促进淀粉降解,使枝条中下部芽积累高浓度的可溶性糖,有利于中下部芽的萌发,并使芽提早萌发7 d左右.100和150 mg/L GA3处理枝条各部分芽的ABA含量显著下降,GA、IAA的含量显著提高,且上中部芽的内源激素变化比下部芽更显著,上中部芽的淀粉含量显著低于下部芽,可溶性糖含量显著高于下部芽,最终导致芽的萌发不整齐.

采用ELISA的方法检测35例泛发性皮肤瘙痒症患者的外周血单核细胞 (PBMC) 在体外经PHA诱导后T辅助细胞不同功能亚群细胞因子IL-4、IL-6及IFN-γ的分泌,同时以20例正常人的PBMC作对照. 结果表明: 泛发性皮肤瘙痒症患者PBMC中T辅助-2型 (Th2) 的细胞因子IL-4的产生明显高于正常对照(P<0.05), 而T辅助-1型 (Th1) 的细胞因子IFN-γ的产生明显低于正常对照(P<0.05),细胞因子IL-6的产生在泛发性皮肤瘙痒症患者PBMC与正常对照的PBMC中无明显差异 (P>0.05).同时,患者的瘙痒程度评分分数与其IL-4的产生呈正相关,而与其γ-IFN的产生呈负相关(P值均<0.05).

测定和比较了蜂胶醇提液(EEP)和蜂胶水提液(WSP)对糖尿病SD大鼠的影响. 结果表明,EEP和WSP均能降低糖尿病SD大鼠的空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HBAlc)、果糖胺(FRU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、丙二醛(MDA)水平,减少总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的消耗,降低肾重与体重的比值. 表明蜂胶能够改善糖尿病SD大鼠的糖、脂肪、蛋白质代谢,减少糖尿病肾病的危害.

应用紫外差光谱和荧光光谱法研究了水溶液中酰胺类除草剂乙草胺、丙草胺、丁草胺、异丙甲草胺与脲酶分子间的相互作用.结果表明,随着除草剂浓度的增加(0.0～1.6 μmol/L),脲酶的紫外吸收光谱发生红移,吸收强度减弱.除草剂对脲酶的荧光均有猝灭作用,且静态猝灭是引起脲酶荧光猝灭的主要原因.从荧光猝灭结果求出除草剂和脲酶的结合常数及结合位点数:乙草胺K= 1.17×103 L/mol,n=0.81;丙草胺K=1.46×102 L/mol,n=0.67;丁草胺K= 2.29×101 L/mol,n=0.50;异丙甲草胺K=1.49×103 L/mol,n=0.84.

运用超薄切片电镜技术比较观察了高粱花叶病毒(SrMV)和甘蔗花叶病毒(SCMV)侵染玉米叶片细胞的超微结构变化,结果显示:线状SrMV和SCMV粒子分散或成束分布在感病细胞的细胞质内,同时在细胞质中产生大量柱状内含体.SrMV引起风轮体和卷筒体,属于Edwardson等划分的第Ⅰ型,一些内含体分布于细胞壁附近,有的直接与细胞壁胞间连丝相接.SCMV引起风轮体、卷筒体和片层聚集体,属于第Ⅲ型,一些成束的病毒粒子和内含体存在于筛管中.对两种病毒的细胞病理学效应作了比较,并对可能与病毒胞间运动相关的超微结构进行了讨论.

用羧苄青霉素等抗生素进行抑菌试验,以羧苄青霉素和头孢霉素的抑菌效果较好.头孢霉素对高梁愈伤组织的毒性表现出比羧苄青霉素大.浓度低于500 mg/L羧苄青霉素对高梁愈伤组织的生长起促进作用;而分化率随着羧苄青霉素浓度的提高而下降.在农杆菌介导高梁遗传转化时,选用羧苄青霉素是合适的,浓度以250 mg/L为宜.高梁愈伤组织对潮霉素的反应比卡那霉素更敏感,高梁不同基因型愈伤组织对卡那霉素和潮霉素的反应在褐化(死亡)率上表现不同.在以潮霉素作为抗性筛选标记时,选择压以50～75 mg/L为宜.

建立了一套利用分光光度法测定植物组织内氰化物含量的实验程序,该程序包括氰化物的吸收、反应和吸光度测定等步骤,测定波长为550 nm.用该法测定的结果表明水稻(秀水11)干种子内几乎没有游离态的氰化物,但氰化物含量会随着种子萌发进程而不断升高.

壳聚糖是自然界中最丰富的多糖之一.壳聚糖酶能够降解壳聚糖生成壳寡糖,壳寡糖具有多种生物学特性,用途广泛.壳聚糖酶主要分布在微生物和一些植物中,理化性质较稳定.根据其底物特异性和断裂键的专一性可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三类.根据已测序壳聚糖酶的氨基酸序列相似性,壳聚糖酶分别属于糖苷水解酶46号、75号和80号.目前,只有2种壳聚糖酶的3级结构被测定.