哈维氏弧菌的主要致病因子及其特性分析
从大黄鱼致病菌哈维氏弧菌 ( Vibrio harveyi )GYC 1108-1株提取外膜蛋白 (OMP) 、脂多糖(LPS) 和胞外产物 (ECP) , 并进行毒性实验 , 以研究哈维氏弧菌的主要致病因子及其特征 . 结果表明 :OMP 、LPS 致病性较弱 , 而 ECP 可导致鱼死亡 , 初步得出哈维氏弧菌 GYC 1108-1株的主要致病因子为胞外产物 , 其对鱼的半数致死量 (LD 50 ) 为3.5μ g.g -1 ; 该蛋白酶与底物偶氮酪蛋白 (azocasein) 作用的最适 pH 为8.0 , 最适温度28℃ , 对热敏感 , 分子质量为55ku ; 该酶活性被碘乙酸抑制 , 也被 SDS 和 HgCl 2完全抑制 ,PMSF 和 ZnCl 2能部分抑制该蛋白酶活性 , 而 CuCl 2 、 CaCl 2 、 MgCl 2 对该酶活性影响不大 , 2‐巯基乙醇、 DTT 、 L ‐半胱酸、EDTA 和 EGTA 对该酶活性有促进作用 , 表明其为半胱氨酸蛋白酶 ; 研究发现 ECP 具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、淀粉酶、卵磷脂酶和脂肪酶活性 , 无脲酶活性 ; 免疫印迹结果发现GYC 1108-1 的 ECP 能与大黄鱼抗 GYC 11-8-1血清发生免疫发应 , 分子质量为55 ku 的半胱氨酸蛋白酶是具有免疫原性的物质 .