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浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大学学报(农业与生命科学版)  2009, Vol. 35 Issue (1): 27-32    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2009.01.003
生物科学与技术     
牛蛙皮肤抗菌肽Ranalexin 基因的原核表达及其抑菌活性
谢 芳,韩文瑜,雷连成,韩俊友,胡 博
吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
 XIE Fang, HAN Wen-Yu, LEI Lian-Cheng, HAN Jun-You, HU Bo
 全文: PDF(2773 KB)   HTML ( ) 
摘要：

    为了验证重组抗菌肽Ranalexin的抑菌活性,提取牛蛙皮肤组织总RNA,经RT-PCR 扩增抗菌肽基因ranalexin,克隆测序后,将该基因插入pGEX-3X融合表达载体,进行原核表达,通过改变IPTG剂量、培养液pH值、诱导表达温度和诱导时间优化表达条件,并采用谷胱甘肽氧化/还原系统对重组蛋白进行复性,用琼脂扩散法测定其体外抑菌活性.结果显示,扩增获得的牛蛙皮肤抗菌肽基因ranalexin 大小为201 bp,其序列与GenBank公布序列同源性达99.57%;正确构建了pGEX-3X-Ranalexin表达载体,最佳表达条件为IPTG终浓度1.0 mmol·L-1、诱导时间5～6 h;表达产物的分子质量约为34 kDa,并以包涵体的形式表达,经复性纯化后该重组蛋白对金黄色葡萄球菌具有明显的体外抑菌活性.说明牛蛙皮肤抗菌肽基因ranalexin 的原核表达载体构建成功,并获得了具有抑菌活性的重组抗菌肽GST-Ranalexin.
出版日期: 2009-01-27
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谢芳
韩文瑜
雷连成
韩俊友
胡博

引用本文:

谢芳, 韩文瑜, 雷连成, 韩俊友, 胡博. 牛蛙皮肤抗菌肽Ranalexin 基因的原核表达及其抑菌活性[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2009, 35(1): 27-32.

XIE Fang, HAN Wen-Yu, LEI Lian-Cheng, HAN Jun-You, HU Bo. . , 2009, 35(1): 27-32.

链接本文:

http://www.zjujournals.com/agr/CN/10.3785/j.issn.1008-9209.2009.01.003    或    http://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2009/V35/I1/27

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