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浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大学学报(农业与生命科学版)  2008, Vol. 34 Issue (4): 379-384    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2008.04.002
生物科学与技术     
C型产气荚膜梭菌α、β1、β2毒素基因融合及免疫原性研究
许崇波　陈向东　许崇利　逄越　高凤山
许崇波（大连大学 生物工程学院 生物有机化学辽宁省重点实验室,辽宁 大连116622;武汉大学 生命科学学院 微生物学国家重点学科,湖北 武汉430072）
陈向东（武汉大学 生命科学学院 微生物学国家重点学科,湖北 武汉430072）
许崇利（吉林化工学院 环境与生物工程学院,吉林 吉林132022）
逄越，高凤山（大连大学 生物工程学院 生物有机化学辽宁省重点实验室,辽宁 大连116622）　
 全文: PDF(428 KB)  
摘要：

为了构建具有良好免疫原性的α-β1-β2融合蛋白,利用PCR技术,从含C型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆质粒pETXAl中扩增出0.95 kb α毒素基因,将其连接到经Nco I单酶切并用碱性磷酸酶处理的含1.65 kb β1-β2融合基因的重组质粒pETXB1B2上,构建含2.6 kb α-β1-β2融合基因的表达质粒重组菌株BL21(DE3)(pETXAB1B2).经酶切鉴定和序列测定证实.构建的重组质粒pETXAB1B2含有α-β1-β2融合基因,且基因序列和阅读框架正确.经ELISA检测,重组菌株表达的α-β1-β2融合蛋白能够被α、β1和β2毒素抗体识别.表达优化结果表明,以IPTG为诱导荆诱导α-β1-β2融合基因表达的优化条件是:培养基PH 7.5,培养温度37℃,IPTG浓度0.4 mmol.L-1,菌体生长密度OD600达到1.0时加入IPTG,诱导时间5 h,此时α-β1-β2融合蛋白表达量为31.2%.免疫试验结果表明,α-β1-β2融合蛋白免疫的小鼠可以抵抗1MLD(最小致死量,minimum lethal dose)C型产气荚膜梭菌标准株C59-44毒素攻击,表明构建的重组菌株可以作为预防仔猪红痢基因工程亚单位苗的候选菌株.
出版日期: 2008-07-25
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引用本文:

许崇波　陈向东　许崇利　逄越　高凤山. C型产气荚膜梭菌α、β1、β2毒素基因融合及免疫原性研究[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2008, 34(4): 379-384.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2008/V34/I4/379

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