将PCR扩增的烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)Y35分离物βC1基因克隆到pET-32a原核表达载体,构建原核表达重组载体pET32a-Y35βC1重组载体导入大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导、Ni2+NTA亲和柱纯化获得与硫氧还蛋白融合的重组蛋白Y35βC1以Y35βC1重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤细胞技术制备了9株能够稳定传代并分泌抗Y35βCI蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别制备它们的单抗腹水9株单抗腹水的间接ELISA效价在10-5～10-6之间Y35βC1单克隆抗体的研制为该蛋白的亚细胞定位及功能研究,明确Y35βC1基因在致病过程中的作用机理奠定了基础
姜磊 吴建祥 周雪平. 与烟草曲茎病毒相伴随的DNAβ的βC1基因原核表达及蛋白的单抗制备[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2008, 34(2): 132-136.
https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2008/V34/I2/132
Cited
