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浙江大学学报(农业与生命科学版)  2009, Vol. 35 Issue (5): 516-522    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2009.05.007
生物科学与技术     
超鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆与真核表达
谭 兵,王红宁,张 毅,樊汶樵
谭兵(四川农业大学,动物医学院,四川,雅安625014)
王红宁(四川农业大学,动物医学院,四川,雅安625014;四川大学,生命科学学院,动物疾病防控与食品安全四川省重点实验室,四川,成都610064)
张毅,樊汶樵(四川大学,生命科学学院,动物疾病防控与食品安全四川省重点实验室,四川,成都610064)
TAN Bing, WANG Gong-Ning, ZHANG Yi, FAN Men-Qiao
 全文: PDF(1009 KB)  
摘要:

为了研究鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的生物学功能,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从刀豆蛋白(ConA)刺激的四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞中扩增出GM-CSF基因,进一步通过PCR等方法将该基因亚克隆入真核表达载体pCI-neo,构建出重组表达质粒pCI-GM-CSF,将pCI-GM-CSF转染COS-7细胞,提取表达产物进行活性检测.序列测定表明,四川山地乌骨鸡GM-CSF全基因长为435 bp,编码144个氨基酸,与GenBank 上公布的瓦赫宁鸡GM-CSF基因(AJ621740)氨基酸序列同源性达95.1%,与其他哺乳动物GM-CSF基因的氨基酸序列同源性低于30%.骨髓细胞增殖实验证实四川山地乌骨鸡GM-CSF能明显促进鸡骨髓细胞的增殖.以上结果表明,本实验成功克隆了四川山地乌骨鸡GM-CSF基因,证实四川山地乌骨鸡GM-CSF重组蛋白具有明显的生物学活性.

出版日期: 2009-09-27
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引用本文:

谭 兵, 王红宁, 张 毅, 樊汶樵. 超鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆与真核表达[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2009, 35(5): 516-522.

TAN Bing, WANG Gong-Ning, ZHANG Yi, FAN Men-Qiao. . , 2009, 35(5): 516-522.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/agr/CN/10.3785/j.issn.1008-9209.2009.05.007        https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2009/V35/I5/516

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