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浙江大学学报(农业与生命科学版)  2004, Vol. 30 Issue (2): 127-132    
论文     
捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证
余旭平  朱军莉  姚学萍  何世成  牛冬
余旭平(浙江大学,动物医学系,浙江,杭州310029)      
朱军莉(浙江大学,动物医学系,浙江,杭州310029)      
姚学萍(浙江大学,动物医学系,浙江,杭州310029)      
何世成(浙江大学,动物医学系,浙江,杭州310029)      
牛冬(浙江大学,动物医学系,浙江,杭州310029)
 全文: PDF(297 KB)  
摘要: 自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SP Amp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoRⅠ和XbaⅠ间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除HindⅢ位点端EcoRⅠ位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为 3.46 kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因.
出版日期: 2004-03-15
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引用本文:

余旭平  朱军莉  姚学萍  何世成  牛冬. 捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2004, 30(2): 127-132.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2004/V30/I2/127

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