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浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大学学报(农业与生命科学版)  2006, Vol. 32 Issue (6): 638-644    
论文     
沙门氏菌耐药基因检测芯片的构建
马孟根　 王红宁　 余勇　 张东　 刘世贵　
马孟根（四川大学,生命科学学院,四川大学"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台,四川,成都,610064;四川省动物防疫监督总站,四川,成都610041）　　　　　　
王红宁（四川大学,生命科学学院,四川大学"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台,四川,成都,610064;四川农业大学,动物科技学院,四川,雅安,625014）　　　　　　
余勇（四川省动物防疫监督总站,四川,成都610041）　　　　　　
张东（四川省动物防疫监督总站,四川,成都610041）　　　　　　
刘世贵（四川大学,生命科学学院,四川大学"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台,四川,成都,610064）　
 全文: PDF(230 KB)  
摘要： 以氨基糖苷类、四环素类、磺胺类和氯霉素类四大类抗生素的11种耐药基因为靶基因,构建了耐药基因的检测芯片.确定芯片点样温度为25℃,湿度为65%;各样点中心距离为1000 μm,样点直径为220 μm.芯片点样结束后,室温干燥6 h,60℃水合处理30 s,80℃干燥10 s,254 nm波长紫外交联10 min.以532 nm(绿光)波长扫描采集杂交信号,激光扫描分辨率为10 μm,激光功能90%,PMTG 85%.选用tetA基因进行杂交动力学研究,确定靶基因的点样浓度为100 ng·μL-1,探针最适浓度为3600 pg·μL-1,系统检测灵敏度为3 pg·μL-1.基因芯片杂交的主要参数为:44℃预杂交2 h,52℃杂交6 h.杂交信号的判读标准为:样点信噪比(S/N)≥1.5及信号强度中位值≥1000.芯片杂交特异性高,重复性好,实现了11种耐药基因的同时检测.
出版日期: 2006-11-27
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引用本文:

马孟根　 王红宁　 余勇　 张东　 刘世贵　. 沙门氏菌耐药基因检测芯片的构建[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2006, 32(6): 638-644.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2006/V32/I6/638

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