胃-胰蛋白酶水解蜂王浆主蛋白制备血管紧张素转化酶抑制肽工艺的优化
采用胃胰蛋白酶水解蜂王浆主蛋白(MRJPs),对底物浓度、pH值、酶作用时间和蛋白酶浓度对水解效果的影响进行单因素分析,然后通过正交试验对胃胰蛋白酶共同作用的酶解工艺进行优化;最后采用超滤分离技术对王浆主蛋白水解产物(HMRJPs)进行分离,以制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽。结果表明:优化的酶解工艺为37 ℃恒温、质量比为1%的胃蛋白酶(pH=2.0)和胰蛋白酶(pH=7.5)各水解2 h;在最佳工艺条件下,MRJPs水解度为28.7%,总氮回收率为35.5%;通过SDSPAGE电泳未检测到MRJPs水解产物(HMRJPs)含有明显的蛋白条带;采用超滤法对HMRJPs分离得到分子质量范围为<1、1~5和>5 ku的3类血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,其ACE半抑制质量浓度(IC50)分别为0.33、0.61和1.09 mg·mL-1,即以分子质量<1 ku的产物活性最强。该结果为利用王浆主蛋白开发降压功能食品提供了科学依据。