植物甾醇高效液相色谱法正相和反相检测方法对比
分别使用正相柱和反相柱,采用高效液相色谱紫外检测器(high performance liquid chromatographyultraviolet detector, HPLCUV)法测定植物甾醇,比较2种色谱柱法对植物甾醇检测的优缺点. 正相色谱条件为:以Hypersil SiO2 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)为色谱柱,流动相为V(正己烷)∶V(异丙醇)=99∶1,柱温35 ℃,流速1.0 mL/min,检测波长205 nm;反相色谱条件为:以默克 RP18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)为色谱柱,流动相为纯甲醇,柱温35 ℃,流速1.0 mL/min,检测波长205 nm. 结果表明:混合甾醇在反相柱分离下出现3个峰,各种甾醇的分离度好;正相柱的甾醇只有1个峰,但样品在正相体系中的溶解性高于反相体系,而且正相体系甾醇出峰时间比反相体系快,可节约实验时间. 说明在不要求各种甾醇分离效果的前提下,正相柱更适合用于植物甾醇检测.