稳定表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白突变体细胞系的建立
根据传染性法氏囊病病毒( IBDV) HZ2 株VP2 基因序列设计1 对引物,将该基因成功克隆到真核表达载体pDsRed2‐N1 中,构建重组质粒pDsRed2‐N1‐VP2(简称PVP2) ;以PVP2 作为过渡载体,运用PCR 定点突变技术,对第279 位点和第284 位点的氨基酸残基分别或同时进行突变,共构建P279 、P284 和PDA 3 株突变体;在此基础上构建能稳定表达HZ2 株IBDV 及其突变体VP2 蛋白的Vero 细胞系,间接免疫荧光试验检测表明,Vero 细胞系中IBDV VP2 蛋白已成功表达.这为进一步深入研究IBDV 毒力及抗原变异致病机制奠定了基础;此外,利用定点突变技术改造VP2 蛋白,建立不同毒力的突变体,在探求高效、廉价的IBDV DNA 疫苗上也有广阔的应用前景和重要意义.