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当期目录

2005年, 第4期 刊出日期:2005-07-25 上一期    下一期
本期栏目: 述评  专题报道  原著  经验交流  综述  短篇报道 
述评
小儿内分泌疾病的诊治:儿科医师的新挑战   收藏
赵正言;傅君芬
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 287-292.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.001
摘要( 266 )     PDF(203KB)( 213 )

内分泌学与儿童生长、发育、保持代谢稳定、协调人体的生命过程有关,是儿科重要的专业之一.最近20年来,随着分子生物学、细胞生物学、免疫学、遗传学等学科的突飞猛进,我国小儿内分泌学也得到迅速发展.与儿童身高、性发育、肥胖等有关的内分泌疾病越来越受到重视,这些疾病的发生与遗传因素、环境因素以及生活方式有密切关系.大量的内分泌患儿在门诊就医,需要有更多的临床医师熟悉内分泌疾病.加强对小儿内分泌疾病的临床和基础研究,积累我国小儿内分泌资料和数据,是值得探索和实施的课题.

专题报道
围生期甲状腺功能低下对仔鼠大脑皮质及海马ARmRNA影响的研究   收藏
季钗;邵洁;赵正言;黄新文;毛姗姗
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 293-297.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.002
摘要( 223 )     PDF(197KB)( 144 )

目的:研究围生期甲状腺功能低下(甲低)对仔鼠大脑皮质及海马雄激素受体mRNA(ARmRNA)表达的影响.方法:对雌大鼠从孕15 d起每日以丙基硫氧嘧啶(PTU)溶液灌胃(50mg/d)至断奶,造成大鼠围生期甲低模型 , 部分甲低仔鼠每日腹腔注射左旋甲状腺素(L-T4)2μg/100g体重.收集出生后1、 5、10、15、20 d的正常、甲低及T4-替代仔鼠的大脑皮质及海马组织,用竞争性RT -PCR法测定ARmRNA水平.结果:正常组仔鼠生后ARmRNA水平随日龄增加而增高,海马高于大脑皮质,雄性组高于雌性组.与同日龄正常对照组相比,甲低组大脑皮质及海马ARmRNA水平明显降低.T4-替代组ARmRNA水平增加,但在10、20日龄的雄性组和15、20日龄的雌性组海马的表达仍未达正常对照组水平,大脑皮质各组与正常组已无显著性差异.结论:围生期甲状腺功能低下会引起发育期大鼠大脑皮质和海马的ARmRNA表达下降,及时替代治疗能恢复大脑皮质ARmRNA的正常表达,但海马的ARmRNA表达则未能达到正常水平.

围生期甲状腺功能低下大鼠海马神经元凋亡机制研究   收藏
黄新文;杨茹莱;赵正言;季钗;杨荣旺
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 298-303.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.003
摘要( 217 )     PDF(268KB)( 234 )

目的:探讨甲状腺功能低下(简称甲低)发育期大鼠海马神经元凋亡途径.方法:孕15 d SD大鼠丙基硫氧嘧啶(50 mg/d)灌胃造成仔鼠甲低动物模型.采用化学发光法测定1、5、10、15日龄仔鼠血清FT3及FT 4水平.应用透射电镜观察10日龄仔鼠海马神经元线粒体超微结构.Western Blottin g检测各日龄海马神经元胞浆及线粒体中Bax、细胞色素C与AIF基因以及胞浆中caspase-3活性片段P20蛋白表达的变化.结果:模型仔鼠各日龄血清FT4水平始终接近于药盒检测限(2.8 pmol/L),明显低于对照仔鼠(1、5日龄均P<0.01;10、15日龄均P<0.001);血清FT3较同日龄对照仔鼠降低(1日龄P<0.05;其它日龄均P<0.01).模型仔鼠形态改变的线粒体与对照相比明显增多(分别为57;和19;) . 与同日龄正常仔鼠比较,甲低仔鼠胞浆中Bax表达增加(均P<0.05),线粒体中Bax表达增加非常显著(均P<0.001);甲低仔鼠胞浆中细胞色素C表达增加(1、10、15日龄均 P<0.05,5日龄 P<0.001),线粒体中表达下降(均P<0.05);甲低仔鼠胞浆中AIF表达增加(均P<0.001),线粒体中表达下降(1、5日龄均P<0.001,10、15 日龄均P<0.01);甲低仔鼠caspase-3 P20表达明显增加(1、15日龄均P<0.01; 5、10日龄均P<0.001).结论:甲低发育期大鼠海马神经元凋亡可能通过线粒体凋亡途径介导.

浙江省1999-2004年新生儿先天性甲状腺功能低下症筛查分析   收藏
陈肖肖;杨茹莱;施玉华;曹莉佩;周雪莲;毛华庆;赵正言
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 304-307.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.004
摘要( 259 )     PDF(171KB)( 386 )

目的:分析浙江省5年中新生儿先天性甲状腺功能低下症(简称甲低)筛查情况与发病率,报告筛查后的治疗随访和疗效评估.方法: 采用时间分辨荧光免疫法检测滤纸血斑中TSH值;采用化学发光免疫分析法检测血清中TSH、 T3、T4水平;确诊患儿给以左旋甲状腺素钠(优甲乐)初始剂量4~6 μg.kg -1.d-1口服治疗,定期复查,根据TSH、T3、T4水平相应进行个体化的药物剂量调整,治疗随访2~3年后停药观察,结合甲状腺核素扫描或超声检查、智力测定、骨龄检测及体格检查,进行评估.结果:5年共筛查1 112 784人,平均筛查率63.5;,筛查出甲低可疑患儿6 750人,召回6 335人,召回率93.8;,确诊甲低764 人,甲低的发生率为每1 457例活产婴儿中有1例(1/1 457).764例中治疗随访1.5~2年以上患儿244例经甲状腺核素扫描或/和超声检查,其中:甲状腺先天缺如9例;异位11例(5例伴囊肿、发育不良);发育不良35例 (9例伴囊肿);正常189例.智商测定107例,发育商(DQ)评分<85为2例、~90为9例、~100为28例、>100为68例,平均106.9.骨龄检测122例,正常90例,稍落后32例.体格检查106例,身高与体重全部达到相应年龄标准(±2s).停药观察128例,其中终止治疗 54例 ,重新恢复治疗9例,余65例继续停药观察.治疗评估:原发性甲低 55例;暂性性甲低169 例;亚临床性甲低20例.结论:①浙江省先天性甲状腺功能低下症发病率明显高于全国其他省市水平,治疗随访后评估绝大部分为暂性性甲低.②采用优甲乐初始剂量 4~6 μg.kg-1.d-1口服治疗,既安全又有效.③早期干预及规范的治疗和随访 ,完全能保证患儿正常的体格发育和智能发育.

血清脱氢表雄酮水平与女性性早熟关系的探讨   收藏
蒋优君;陈黎勤;梁黎;邹朝春;朱红;傅君芬;赵正言
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 308-311.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.005
摘要( 555 )     PDF(203KB)( 319 )

目的:探讨血清脱氢表雄酮与女性性早熟之间的关系.方法:60例特发性中枢性早熟(ICPP)女童,62例单纯乳房早发育(PT )女童及31例与年龄匹配的青春前期健康女童,采用ELISA法测定血清脱氢表雄酮(DHEA) 及硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)浓度,并对ICPP儿童进行达菲林治疗前、后的对比研究,随访其子宫、卵巢、骨龄及血清DHEA、DHEAS的变化.结果:①ICPP组血清Log(D HEA)、Log(DHEAS)为(0.81±0.36)μg/L,(2.31±0.31)μg/L,PT组为(0.72 ±0.30)μg/L,(2.31±0.28)μg/L,对照组为(0.32±0.26)μg/L(2.16±0.2 7)μg/L,三组比较差异有显著性意义(P<0.05);ICPP组与PT组两组之间比较差异无显著意义(P>0.05);TannerⅢ期的DHEA、DHEAS明显高于TannerⅡ期的DHEA、DHEA S,P<0.0 5.②经双变量相关分析,Log(DHEA)与身高、骨龄、子宫容积、卵巢容积呈正相关,与Lo g(LH峰值)、Log(FSH峰值)、体质指数(BMI)无相关性; Log(DHEAS)与身高、骨龄、卵巢容积呈正相关,与Log(LH峰值)、Log(FSH峰值)、子宫容积、BMI无相关性.③达菲林治疗3个月时,血清Log(DHEA)、Log(DHEAS)较治疗前明显下降 (P<0.05).治疗12个月时,血清Log(DHEA)、Log(DHEAS)与治疗前比较,差异无显著意义(P>0. 05),但子宫容积、卵巢容积、骨龄与年龄的比值治疗前、后比较差异有显著意义(P 均<0.05).结论:①性早熟女童血清DHEA和DHEAS水平增高,并随着Tanne r期的进展而升高;②血清DHEA和DHEAS水平随下丘脑-垂体-性腺轴的抑制,其浓度会有暂时性下降;③血清DHEA与性早熟女童生长加速、骨龄进展有关.

重组人生长激素对生长激素缺乏症儿童骨代谢的影响   收藏
李筠;陈黎勤;梁黎
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 312-315.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.006
摘要( 223 )     PDF(160KB)( 300 )

目的:研究生长激素缺乏症(GHD)儿童用生长激素治疗前后的骨代谢指标和骨量的改变.方法:测定37例完全性生长激素缺乏症(CGHD)、31例部分性生长激素缺乏症(PGHD)和31例年龄、性别匹配的正常健康儿童的血清骨代谢指标、类胰岛素生长因子1(IGF1)和桡骨远端超声传播速度(SOS),比较各组差异;同时对29例接受重组人生长激素(rhGH)治疗的GHD儿童3~6月定期复查.结果: CGHD组血清骨碱性磷酸酶(BAP)、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ICTP)、IGF1显著低于正常对照组(P<0.05),ICTP与IGF1呈正相关(r=0.32,P=0.01);PGHD组IGF1低于正常对照组(P<0.05),其余各项指标与正常对照组比较无显著差异.GH治疗3月后BA P、ICTP、骨钙素(OC)和IGF1均显著高于基线值(P<0.05);ICTP和IGF1随治疗时间延长逐步增高.桡骨远端SOS SDS有增加趋势,但与基线值比较差异无显著性(P>0.05). 结论:CGHD儿童体内骨转换水平明显降低,桡骨远端骨量改变不明显;GH替代治疗半年后,骨形成和骨吸收指标明显增高,同时伴有骨量增加趋势.

肥胖青少年胰岛素抵抗常用评价方法的比较   收藏
王春林;梁黎;傅君芬;洪芳
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 316-319.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.007
摘要( 242 )     PDF(160KB)( 353 )

目的:探讨临床实用、敏感、能早期反映胰岛素抵抗的指标.方法:对126例不同程度体块指数(BMI)的肥胖青少年和25例正常体重对照组青少年,空腹行口服葡萄糖耐量和胰岛素释放试验,计算空腹血糖/空腹胰岛素(FBG/FINS)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、敏感指数(IAI)、总体胰岛素敏感指数(WBISI)及葡萄糖、胰岛素曲线下面积(AUCBG、AUCINS).结果:4组间空腹血糖无明显差异,而空腹胰岛素、空腹血糖/空腹胰岛素、稳态模型胰岛素抵抗指数、敏感指数、总体胰岛素敏感指数、胰岛素曲线下面积、葡萄糖曲线下面积,以及胰岛素曲线下面积与葡萄糖曲线下面积之比值的各项指标,经方差分析均有显著性差异.WBISI较HOMA-IR、IAI更能在早期反映出胰岛素的敏感性.结论: WBISI较稳态模型分析法(HOMA)更早地反映出胰岛素敏感性的变化,能够较好反映胰岛素抵抗的程度.

原著
联合转染反义PDGF寡核苷酸和tPA基因抑制血管内膜增生的实验研究   收藏
吴忠均;时德;李德卫;郑树森
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 320-325.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.008
摘要( 208 )     PDF(448KB)( 288 )

目的:观察血管局部联合转染血小板源性生长因子 (PDGF)反义寡核苷酸(AODN)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)基因对自体移植动脉内膜增生的影响,并探讨其可能机制.方法:选100只新西兰雄性白兔,随机分为4组(每组25只):A组(对照组)、B组(PDGF-AODN转染组)、C组(tPA基因转染组 )、D组(PDGF-AODN和tPA基因联合转染组).将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0 cm )对换移植,移植血管分别用PDGF-AODN和pBudCE4.1/tPA液浸泡,血管吻合口用上述液体浸泡过的缝线吻合.每组按实验终点(术后3 d、1 w、2 w、4 w和8 w)分为5个亚组, 术后各实验终点取移植血管标本,用于病理学检测、电镜观察、发色底物检测tPA活性实验、3H-TdR掺入实验和免疫组织化学染色检测.结果:术后各时间点D 组移植血管的内膜面积、管腔狭窄程度、3H-TdR掺入量和PDGF阳性细胞数均显著低于A组(P<0.01),而且亦明显低于B和C组(P<0.05).扫描电镜观察显示C组和 D组血管壁只见少量血小板附着,未见血栓形成,而A组和B组血管壁可见大量血小板附着, 且有血栓形成.术后3 d、1 w、2 w、4 w时C组与D组的tPA基因表达产物活性明显高于A组( P<0.0 1).结论:血管局部联合转染PDGF-AODN和tPA基因能有效抑制VSMC增殖, 阻止内膜增生,防止移植血管狭窄.

音乐家与非音乐家的磁共振脑功能成像研究   收藏
崔恒武;章士正;狄海波;刘海;祝一虹;张峭巍;翁旭初;陈宜张
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 326-330.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.009
摘要( 258 )     PDF(239KB)( 215 )

目的:利用功能性磁共振成像(functional MRI) 技术,探讨音乐家与非音乐家脑功能的差异性.方法:在大学里征召男性右利手音乐家志愿者和非音乐家志愿者各12名,让他们听中国传统音乐"梁祝"片断及其同等物理能量的白噪音片断,同时进行全脑的fMRI扫描.结果:在白噪音刺激时 ,音乐家与非音乐家主要表现为双侧颞横回区较弱的激活;而在音乐刺激时,双侧听皮层区明显激活且范围扩大,涉及颞横回、颞上回及颞中回.但音乐家一般表现为左侧颞区优势( 10/12),而非音乐家一般为右侧优势(11/12),除双侧颞区激活外,音乐家还伴有其它脑区较强及较广泛的激活,尤其是楔叶、楔前叶、额内侧回、左枕中回等.结论:[ HTK〗音乐家与非音乐家对音乐的脑功能反应存在差异性.

线粒体ATP敏感性钾通道开放剂改善大鼠心脏冷保存   收藏
郭炜;沈岳良;陈莹莹;胡志斌;严志;夏强
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 331-338.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.010
摘要( 212 )     PDF(386KB)( 208 )

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪 (DE)对离体大鼠心脏冷保存效果的影响及作用机制.方法:SD大鼠随机分成对照组、DE组、DE+5-HD组.利用Langendorff离体鼠心灌注法,各组心脏在4℃条件下分别保存3 h和8 h后,复灌60 min,观察各组大鼠血流动力学的恢复情况、冠脉流出液中心肌酶漏出量、心肌水含量的变化及心肌超微结构改变.结果:在Celsior心麻痹液中添加30 μmol/L的DE后,能明显改善冷保存3 h心脏的左心室发展压力的恢复,降低心肌酶(LDH、CK)在某些复灌时间点上的漏出,但对保存后左心室舒张末期压力的抬高和冠脉流量的恢复及心肌水肿程度无明显作用;而相同浓度的DE添加到Celsior心麻痹液中,可明显降低冷保存8 h心脏左心室舒张末期压力的抬高,改善左心室发展压力和冠脉流量的恢复,降低心肌酶(LDH、CK、GOT)的漏出,缓解心肌水肿,对心肌的超微结构也有较好的保护作用,其中30和45 μmol/L DE组对冷保存8 h心脏的保护作用优于15 μmol/L DE组,而3 0及45 μmol/L DE组之间并无显著性差异.DE的上述作用可被线粒体ATP敏感性钾通道的特异性阻断剂5-HD所取消.结论:DE可通过激活线粒体ATP敏感性钾通道显著改善离体大鼠心脏冷保存效果.

霉酚酸诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及机制   收藏
朱晓黎;李黎;施继敏;郑伟燕;余建;黄河
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 339-343.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.011
摘要( 250 )     PDF(268KB)( 153 )

目的:研究霉酚酸(Mycophenolic acid,MPA)诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及其机制.方法:光学显微镜及透射电镜观察细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞仪分析细胞Annexin V表达、周期变化及caspase-3活性.人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji作为对照.结果:MPA诱导Molt-4细胞的凋亡率与作用浓度和时间成正比;细胞被阻滞于 S期.MPA作用24 h后细胞内caspase-3活性增高,呈浓度依赖性.MPA不诱导Raji细胞凋亡 .结论:MPA可诱导Molt-4细胞凋亡,其作用可能与激活caspase-3有关.

CⅡTA基因在五种人类恶性血液病细胞株细胞中的表达及意义   收藏
魏国庆;林茂芳
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 344-347.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.012
摘要( 256 )     PDF(166KB)( 178 )

目的:探讨5种血液病细胞株细胞的HLA-Ⅱ类抗原表达,以及对IFN-γ诱导HLA分子表达的反应性与MHCⅡ类分子反式激活因子 (CⅡTA) 表达的关系.方法:采用流式细胞术和免疫组化法检测肿瘤细胞HLA分子及CⅡTA 蛋白的表达,RT-PCR检测肿瘤细胞CⅡTA基因表达.混合淋巴细胞反应检测肿瘤细胞刺激外周血T细胞反应的能力.结果:肿瘤细胞HLAⅡ类分子表达与CⅡTA表达一致; 结构型或诱导型表达CⅡTA的肿瘤细胞,经IFN-γ作用后其HLAⅠ、Ⅱ类抗原表达增高;IFN -γ诱导后仍不表达CⅡTA的肿瘤细胞,其对IFN-γ促HLAⅡ表达的作用不反应.Jurkat诱导后刺激T细胞表达高水平的IL-2 mRNA.结论:某些恶性血液病细胞株细胞对IFN-γ不能诱导HLA分子表达与CⅡTA诱导型表达缺陷有关,表明CⅡTA参与调控肿瘤细胞 HLAⅠ、Ⅱ类抗原表达,可能在肿瘤免疫逃逸中起重要作用.

慢性髓系白血病来源的树突状细胞生物学特性的研究   收藏
童向民;金洁;钱文斌;孟海涛;薛永权
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 348-352.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.013
摘要( 221 )     PDF(287KB)( 207 )

目的:体外诱导慢性髓系白血病(CML)原代细胞分化生成树突状细胞(Dendritic cells DCs),并研究其生物学特性和功能.方法: 分离初诊13例CML患者的骨髓单个核细胞和5例正常人外周血的单个核细胞,用rhGM -CSF 1 000 U/ml、rhIL-4 500 U/ml和TNF-α50 U/ml联合培养10 d;形态学(Wright染色、倒置显微镜、透射电镜),免疫学(CD80、CD86、CD83、CD 1a、HLA-DR)鉴定,荧光原位杂交(FISH)进行细胞遗传学分析,ELISA检测分泌IL- 12的能力和混合淋巴细胞反应(MLR)检测抗原递呈功能.结果:慢性白血病细胞体外诱导后,大部分细胞呈现树突状细胞的典型形态,而且有免疫标记的明显上调(CD 86 24.49±25.87 vs 61.73±28.54;CD1a 10.41±9.52 vs 47.26±3 5.60,P<0.05);FISH证实这类DC还携带有白血病克隆,并且具有分泌IL-12和刺激T淋巴细胞增殖的能力.结论:在体外可成功地将CML细胞诱导分化成树突状细胞 ,这类DC与正常DC无论在形态学和免疫学表达方面均相似,但是功能较弱.

中国人Bat26多态性及其在胃癌微卫星不稳定性研究中的意义   收藏
吕炳建;来茂德;黄琼;盛宏强
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 353-357.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.014
摘要( 226 )     PDF(209KB)( 154 )

目的:探讨中国人Bat26多态性及其在胃癌微卫星不稳定性(MSI)研究中的应用价值.方法:运用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染方法检测389份外周血Bat26,34例胃癌组织和正常黏膜还检测Bat26和其它11个微卫星位点.结果:①423份中国人外周血或正常黏膜Bat26凝胶电泳未发现条带改变.②34例胃癌发现2例MSI-H,均为Bat26+,Bat26改变和MSI-H有很好的一致性( P<0.05).③与RER-胃癌比较,MSI-H(RER+)胃癌上皮内淋巴细胞、瘤周淋巴细胞浸润更明显,更易表现为推进性生长(P<0.05).结论:①国人基因组Ba t26为近单态性,可不设正常对照用于肿瘤MSI研究.②Bat26改变反映胃癌的MSI-H状态, 且MSI-H胃癌有明显的临床病理特点.

先天性巨细胞病毒感染患儿的听力筛查   收藏
莫薇;章毅英;雷云秋;孙伟;邵佩芬;孙越峰;周媛媛;赵正言
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 358-360.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.015
摘要( 282 )     PDF(119KB)( 300 )

目的:探讨先天性巨细胞病毒(CMV)感染对婴幼儿听力的影响.方法:应用耳声发射(DPOAE)、听觉脑干诱发电位(ABR), 对38例先天性CMV感染儿(感染组)及16例非感染儿(对照组),于新生儿期进行听力筛查及评估.结果:感染组38例66耳(86.8;)通过首次筛查,6个月内复查58耳(76.3 ;)通过;6个月以后随访52耳(68.4;)通过.对照组16例31耳(96.9;)通过.感染组38例76 耳,极重度听力损失13耳(17.1;),重度听力损失5耳(6.6;),中重度听力损失6耳(7 .9;).感染组婴幼儿ABRⅤ波反应阈值明显高于对照组(P<0.005).在随访中感染组听力损失,新生儿期3例(7.9;),3~4个月9例(23.7;),6个月以后3例(7.9;). 结论:先天性CMV感染可引起速发性与迟发性听力损失.采用检测先天性CMV 感染与新生儿听力筛查相结合的方法进行听力筛查及评估,可早期发现听力异常.

新的人内源性逆转录病毒NP9基因的分子克隆与病毒蛋白表达   收藏
任跃忠;戴巧定;徐荣臻
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 361-364.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.016
摘要( 211 )     PDF(219KB)( 183 )

目的:研究新近发现的人内源性逆转录病毒NP9基因与自身免疫性疾病的相关性及其可能的作用机制,构建该基因的蛋白表达系统. 方法:提取自身免疫性疾病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的总RNA,利用RT-PCR 技术,扩增NP9基因,然后将该片段进行T-A克隆并测序鉴定,纯化回收后亚克隆于原核表达载体pQE30中,然后提取质粒,酶切鉴定;最后经IPTG诱导,原核表达重组子在M15宿主菌进行表达,并进行SDS-PAGE与Western 印迹分析与鉴定.结果:应用RT-PCR 技术,从系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的总RNA中扩增到一条大小约为250 bp的片段,经T-A克隆与测序鉴定,证实此片段为NP9基因,具有一个完整的开放阅读框架;将pQE 30-NP9重组子转化入宿主菌,用IPTG诱导菌体表达NP9重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western印迹技术鉴定证实:在相对分子量约9kD处见明显的病毒特异性的高表达条带.结论:已成功克隆了新的人内源性逆转录病毒NP9基因,并经IPTG诱导,在M15宿主菌中表达了相应的病毒蛋白,为进一步研究该逆转录病毒与自身免疫性疾病的相关性奠定基础.

经验交流
肺功能检测在小儿呼吸道疾病中的临床应用   收藏
陈一芳;考验;忻学英;江克文
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 365-367.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.017
摘要( 202 )     PDF(118KB)( 289 )

目的:分析和评估肺功能检测在小儿呼吸道疾病中的临床价值.方法:采用便携式肺功能仪检测6 261例呼吸道疾病患儿.部分病例定期随访,对其中268例咳嗽变异性哮喘儿童(CVA),147例哮喘儿童(AS)治疗前后进行第1秒用力呼气容积(FEV1),用力肺活量(FVC),组变异率(PEFR)的自身对照,以及咳嗽变异性哮喘与哮喘儿童肺功能比较.结果:哮喘儿童经糖皮质激素气雾剂治疗后肺功能明显改善,治疗前FEV1(1.029±0.398)L,治疗后( 1.180±0.427)L,治疗前FVC(1.147±0.468)L,治疗后(1.318±0.480)L,P <0.001.咳嗽变异性哮喘与哮喘儿童肺功能变化一致,咳嗽变异性哮喘组PEFR大于15; 13 2例,小于15; 136例,哮喘儿童组大于15; 68例,小于15; 79例,P>0.05.结论:肺功能检测是诊断哮喘必不可少的手段,为指导治疗,判断预后,评价疗效提供可靠的依据,应广泛推广于儿科临床.

高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片中的有关物质   收藏
王临润;黄明珠;朱素慧
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 368-371.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.018
摘要( 414 )     PDF(146KB)( 370 )

目的:检测盐酸二甲双胍片剂中的双氰胺及其它有关物质.方法:HPLC色谱条件:色谱柱为SHIMADZU-VP ODS柱(250×4.6 mm ,5 μm);双氰胺流动相:甲醇∶10 mmol/L 磷酸二氢钠(含1 mmol/L 十二烷基硫酸钠 )(60∶40)用磷酸调pH至5.5; 检测波长:218 nm,流速:0.8 ml/min.其他有关物质流动相:甲醇∶10 mmol/L 磷酸二氢钠(含1 mmol/L十二烷基硫酸钠)(55∶45)用磷酸调pH 至5.5;检测波长:232 nm;流速:0.8 ml/min.结果:双氰胺与二甲双胍主峰可以达到良好的分离,试验结果重现性好.结论:本法灵敏度高,专属性强,分离较好,操作简便、快速,结果准确、可靠.

液质联用测定血清中地氯雷他定及人体药动学研究   收藏
卢晓阳;申屠建中;陈志根;黄明珠;周慧丽;郑国钢
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 372-374.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.019
摘要( 340 )     PDF(127KB)( 313 )

目的:研究地氯雷他定血清浓度测定方法及其在健康人体内的药动学.方法:18名健康男性志愿者单剂量口服地氯雷他定片, 在设计的时间点取静脉血,采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)测定血药浓度.药动学参数采用3P97程序计算.结果:单次口服10mg地氯雷他定片后的主要药动学参数tmax、Cmax、AUC0-t、AUC0-∞、t 1/2(ke)、Ke、CL,分别为(1.611±0.366)h 、(4.455±1.990)μg·L -1、(58.50±21.34)μg·L-1·h-1、(60.59±22.32)μg·L -1·h-1、(20.303±5.833)h、(0.0372±0.0116)h-1和(0.1 838±0.0563)L·h-1.结论:地氯雷他定在研究人体内口服吸收较快,约1.5 h达血药浓度峰值,平均消除半衰期为20 h.

综述
鞘脂类研究进展   收藏
黄韵;余应年;杨军
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 375-379.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.020
摘要( 382 )     PDF(172KB)( 201 )

鞘脂类一直被认为仅是细胞结构的组成部分,随着研究的深入,人们发现它是重要的信号分子,与细胞的生长、老化、减数分裂、成熟和死亡都紧密相关,还参与肿瘤侵袭、热休克反应和遗传毒性应激反应等.因此,对鞘脂类代谢进行干预是一种潜在的治疗肿瘤的手段.

短篇报道
Kartagener综合征一例   收藏
杨懋颖;柴莹;沈钢;金自瑛
浙江大学学报(医学版). 2005 (4): 379-380.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.04.021
摘要( 297 )     PDF(113KB)( 170 )