Please wait a minute...
浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2011, Vol. 40 Issue (5): 467-474    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2011.05.002
专题报道     
霉酚酸对人骨髓来源间充质干细胞的作用
曹伟杰1,2，刘丽珍1，来晓瑜1，王冲1，2，于晓虹1，黄河1
1.浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心，浙江 杭州 310003； 2.郑州大学第一附属医院血液科，河南 郑州 450052
Effects of mycophenolic acid on human bone marrow-derived mesenchymal stem cells in vitro
CAO Wei-jie 1 ,2,LIU Li-zhen 1,LAI Xiao-yu 1,WANG Chong 1,2,YU Xiao-hong 1,HUANG He1
1.Bone Marrow Transplantation Center,The First Affiliated Hospital,Zhejiang University School of Medicine,Hangzhou 310003,China; 2.Department of Hematology,The First Affiliated Hospital,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052,China
 全文: PDF(2773 KB)   HTML ( ) 
摘要： 目的：研究霉酚酸（mycophenolic acid，MPA）对人骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）的作用及其机制。
方法：在MSCs生长和分化过程中加入不同浓度的MPA，用CCK-8方法分析MSCs增殖的情况，用Annexin V/PI双染色法检测MPA各浓度组的细胞凋亡，RT-PCR方法分析MSCs次黄嘌呤核苷酸脱氢酶（IMPDH）的表达；应用von Kossa染色、钙定量和real-time PCR方法分析MPA对MSCs成骨分化的影响。
结果：1~100 μmol/L的MPA呈时间浓度依赖性地抑制间充质干细胞的生长，添加鸟嘌呤核苷可以解除该抑制效应，且该抑制效应与细胞凋亡无关；RT-PCR结果显示，MSCs表达IMPDH Ⅰ和IMPDH Ⅱ两种亚型；von Kossa染色和钙定量显示，MPA抑制MSCs的成骨分化，Osteopontin和BMP-2的表达相应减低；进一步研究发现，MPA可能通过影响转录因子Runx2、Osterix的表达而影响MSCs的成骨分化。
结论：MPA通过耗竭鸟嘌呤核苷的方式呈时间浓度依赖性抑制人骨髓来源的间充质干细胞的增殖；同时，MPA通过抑制Runx2和Osterix蛋白的表达，抑制MSCs的成骨分化。
关键词： 霉酚酸/药理学;  间质干细胞/细胞学;  次黄嘌呤类;  成骨细胞/细胞学;  细胞分化/药物作用;  细胞增殖/药物作用;  鸟嘌呤核苷酸类    
Abstract: Objective： To investigate the effects of mycophenolic acid (MPA) on the proliferation and differentiation of human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs).
Methods： MSCs were treated with MPA at the concentration of 1 μmol/L,10 μmol/L,50 μmol/L,and 100 μmol/L,respectively.Cell proliferation was analyzed using CCK-8 method.Apoptosis was detected by PI/Annexin V assay kit.The mRNA expression of inosine-5′-monophosphate dehydrogenase (IMPDH) in MSCs was analyzed by RT-PCR.Osteogenic differentiation was analyzed by Von Kossa staining,Ca2+ quantification and real-time PCR.
Results： In the range of 1 μmol/L to 100 μmol/L,MPA caused a significant subdued proliferation rate of MSCs in a concentration- and time-dependent manner by guanosine depletion,and PI/Annexin staining showed no apoptosis induced by MPA.RT-PCR results showed that MSCs expressed both IMPDH I and IMPDH Ⅱ.von Kossa staining and Ca2+ quantification indicated that MPA inhibited osteogenic differentiation of MSCs,and real-time PCR detected a dose-dependent decrease in expression of Osteopontin and BMP-2.Further investigation showed that MPA down-regulated the expression of Runx2 and Osterix.
Conclusion： MPA can inhibit the proliferation of MSCs by guanosine depletion in a concentration- and time-dependent manner and inhibit the osteogenic differentiation of MSCs by down-regulation of the expression of Runx2 and Osterix.
Key words: Mycophenolic acid/ pharmacol； Mesenchymal stem cells/cytol    Hypoxanthines    Osteoblasts/cytol;Cell differentiation/drug eff； Cell proliferation/ drug eff； Guanine nucleotides
出版日期: 2011-09-25
服务　　
把本文推荐给朋友
加入引用管理器
E-mail Alert
RSS
作者相关文章　　

引用本文:

曹伟杰;刘丽珍;来晓瑜;王冲;于晓虹;黄河. 霉酚酸对人骨髓来源间充质干细胞的作用[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2011, 40(5): 467-474.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2011/V40/I5/467

[1] 王晓玲,欧阳旭梅,孙晓译. 基于间充质干细胞的小分子化学药物肿瘤靶向递送系统研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(5): 525-533.
[2] 朱保应,周建,高玉海,石文贵,魏振龙,李文苑,王媛媛,陈克明. 低频率低强度电磁场对体外培养大鼠颅骨成骨细胞成熟和矿化的影响[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(6): 585-592.
[3] 曹鹏 等. 双氢青蒿素抗肿瘤分子生物学机制研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2016, 45(5): 501-507.
[4] 娄鹏荣 等. 靶向RAD18的小干扰RNA对人食管鳞癌ECA-109细胞增殖和化疗敏感性的影响[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2016, 45(4): 364-370.
[5] 孔祥朋 等. 肌腱干细胞与骨髓间充质干细胞促进髌腱愈合的对比研究[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2016, 45(2): 112-119.
[6] 廖伟超, 何莹, 王斌生, 黄河. 依维莫司联合全反式维甲酸逆转急性早幼粒细胞白血病细胞耐药的研究[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2015, 44(5): 525-531.
[7] 胡会永;周俊;万芳;董力枫;张峰;王一刻;陈芳芳;陈益定. Evn-50对人乳腺癌MCF-7耐三苯氧胺细胞株生长和凋亡的影响[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2012, 41(5): 498-505.
[8] 赵妍敏;吴康妮;王颖佳;吴功强;曹伟杰;于晓红;黄河. 雷帕霉素协同去甲氧柔红霉素诱导人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡的作用[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2011, 40(5): 482-488.
[9] 朱丹雁，张翔南，杜悦，陈燕，王志强，楼宜嘉. 淫羊藿素诱导小鼠胚胎干细胞体外定向分化为神经细胞[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2007, 36(3): 217-223.
[10] 马振秋，黄晓佳，张纬萍，卢韵碧，魏尔清. 二氢青蒿素抑制大鼠胶质瘤C6细胞增殖和诱导凋亡[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2007, 36(3): 267-272.
[11] 廖志雄;沈建根;来晓瑜;黄河. 抗人间充质干细胞单克隆抗体的制备及生物学特性研究[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2006, 35(5): 517-522.
[12] 朱晓黎;李黎;施继敏;郑伟燕;余建;黄河. 霉酚酸诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及机制[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2005, 34(4): 339-343.
[13] 朱慧勇，王慧明，吴求亮，胡应乾，刘建华，朱康杰. PLGA/Ⅰ型胶原复合支架用于组织工程化骨再造的研究[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2005, 34(3): 233-236.