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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2008, Vol. 37 Issue (6): 605-611    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2008.06.011
专题报道     
肺炎链球菌ciaH/R基因重组表达及CiaH/R与β-内酰胺类耐药相关性
孙爱华;樊欢;夏肖萍;李向阳;严杰
浙江医学高等专科学校,浙江,杭州,310053;浙江大学医学院,病原生物学系,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院,附属邵逸夫医院检验科,浙江,杭州,310016;温州医学院附属第二医院检验科,浙江,温州,325000
Recombinant expression of Streptococcus pneumoniae ciaH/R genes and their correlation with β-lactam antibiotic resistance
 全文: PDF(396 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:构建肺炎链球菌ciaH和ciaR基因的原核表达系统,探讨CiaH和CiaR封闭后细菌耐药性变化.方法:采用PCR扩增全长ciaH和ciaR基因,以常规基因工程技术建立其原核表达系统.采用SDS-PAGE及Bio-Rad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rCiaH和rCiaR表达量.制备rCiaH和rCiaR兔抗血清及其IgG.检测IgG胞外或胞内封闭肺炎链球菌菌株CiaH和CiaR后,细菌对青霉素和头孢噻肟耐药性的变化.结果:与报道序列比较,所克隆的ciaH和ciaR基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.9;～100;和100;.所构建的工程菌E.coli BL21DE3pET42a-ciaH和E.coli BL21DE3pET42a-ciaR能高效表达目的重组蛋白rCiaH和rCiaR,其产量分别高达细菌总蛋白的33;和45;.rCiaH、rCiaR抗血清及其IgG免疫双扩散效价分别为1∶4、1∶4和1∶1、1∶1.CiaH-IgG胞外或胞内封闭CiaH、CiaR-IgG胞内封闭CiaR后,青霉素及头孢噻肟敏感菌株可出现对两种抗生素的耐药性,但对耐药菌株耐药性无明显影响.结论:成功地构建了肺炎链球菌ciaH/ciaR基因原核表达系统,为深入研究该TCS与耐药性关系奠定了基础.CiaH和CiaR均与肺炎链球菌对青霉素及头孢噻肟耐药性有关.
关键词： 链球菌,肺炎/药物作用;  基因细菌;  β  内酰胺抗药性;  二元信号传导系统;  ciaH/ciaR基因;  β  -内酰胺类抗生素;  耐药性     
出版日期: 2008-11-25
基金资助:

浙江省自然科学基金(X206956);卫生部科研项目(WKJ2007-2-005)
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孙爱华
樊欢
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李向阳
严杰

引用本文:

孙爱华;樊欢;夏肖萍;李向阳;严杰 . 肺炎链球菌ciaH/R基因重组表达及CiaH/R与β-内酰胺类耐药相关性[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2008, 37(6): 605-611.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2008/V37/I6/605

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