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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2003, Vol. 32 Issue (6): 480-485    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2003.06.005
专题报道     
C末端缺失NR2B亚单位表达载体的构建及其在NMDA受体装配研究中的应用
杨巍;罗建红;高英;黄曼;郑婵颖
浙江大学医学院,神经生物学教研室,浙江,杭州,310006
Construction of expression vectors for C-terminally deleted NR2B subunit mutants and their application in the study of assembling of NMDA receptors
 全文: PDF(252 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:研究NMDA受体NR2B亚单位细胞内C末端,在NR1-1a/NR2B亚型NMDA受体装配和表面表达中的作用.方法:构建C末端不同缺失和GFP标记的NR2B亚单位表达载体,单独转染或与NR1亚单位共转染到HEK293细胞,用抗GFP多克隆抗体和Cy3荧光素交联的二抗作活细胞表面受体染色.结果:成功构建了8个C末端不同缺失的GFP-NR2B表达质粒(GFP-NR2BΔ1～Δ8).将GFP-NR1-1a,GFP-NR2B及GFP-NR2BΔ1～Δ8分别单独转染HEK293细胞,不能获得达细胞膜表面的表达.而将这些质粒分别与NR1-1a共转染293细胞,发现GFP-NR2B及C末端部分缺失的GFP-NR2BΔ1～Δ6,均能与NR1-1a一起表达于细胞膜表面,而仅留有PDZ结合基序的GFP-NR2BΔ7和C末端全长缺失的GFP-NR2BΔ8,则不能与NR1-1a一起表达于细胞膜表面.结论:NR1-1a与NR2B的共表达和装配,是形成NR1-1a/NR2B亚型NMDA受体并表达于细胞表面的必要条件.NR2B与NR1-1a装配时,NR2B对NR1-1a C1盒中内质网滞留基序的遮蔽和阻滞作用,并不依赖于NR2B C末端某一特定的区域,相反可能仅要求有一定长度的NR2B C末端.
关键词： 受体;  N-甲基-D-天冬氨酸/分析;  NR2B亚单位;  膜表面表达;  内质网滞留    
出版日期: 2003-11-25
基金资助:

国家重点基础研究发展计划(973计划)(G1999054003);国家自然科学基金(39970844)
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杨巍
罗建红
高英
黄曼
郑婵颖

引用本文:

杨巍;罗建红;高英;黄曼;郑婵颖. C末端缺失NR2B亚单位表达载体的构建及其在NMDA受体装配研究中的应用 [J]. 浙江大学学报（医学版）, 2003, 32(6): 480-485.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2003/V32/I6/480

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