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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2004, Vol. 33 Issue (6): 504-508    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2004.06.008
原著     
人可溶性转化生长因子βⅡ型受体真核表达载体的构建及表达
杨小华;张立煌;史丽云;姚航平;郁子扬
浙江大学医学院,免疫学研究所,浙江,杭州,310006;浙江大学医学院,附属第一医院,浙江,杭州,310031
Construction and expression of the eukaryotic expression vector containing human soluble transforming growth factor beta receptor Ⅱ
 全文: PDF(211 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:构建人转化生长因子βⅡ型受体胞外区(sTGFβRⅡ)基因的真核表达载体,转染真核细胞CHO以表达sTGFβRⅡ蛋白,并检测其生物学活性.方法:以TGFβRⅡ的重组质粒为模板,用PCR方法扩增得到人TGFβRⅡ胞外区(1-159位氨基酸)的cDNA,将该cDNA重组到真核表达载体pCDNA3.1/myc-his(-)B(pCDNA)的EcoRⅠ和HindⅢ多克隆位点上,构建成pCDNA-sTGFβRⅡ重组质粒.经双酶切和核酸测序鉴定,将该重组质粒转染CHO细胞,用Western blotting法检测sTGFβRⅡ的表达,并测定其生物学活性.结果:CHO细胞转染pCDNA-sTGFβRⅡ重组质粒后,其培养上清经 Western blotting分析,显示有特异性的蛋白条带,所表达的蛋白能明显抑制TGFβ1对貂肺上皮细胞的增殖抑制作用.结论:成功克隆了sTGFβRⅡ基因,并获得有生物学活性的sTGFβRⅡ蛋白.
关键词： 受体,转化生长因子β  真核细胞;  pCDNA3.1/myc-his(-)B,转染,CHO细胞;  重组,遗传    
出版日期: 2004-11-25
基金资助:

国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA215111);浙江省科技厅资助项目(2003C30012)
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杨小华
张立煌
史丽云
姚航平
郁子扬

引用本文:

杨小华;张立煌;史丽云;姚航平;郁子扬. 人可溶性转化生长因子βⅡ型受体真核表达载体的构建及表达[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2004, 33(6): 504-508.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2004/V33/I6/504

[1] 邵喜英;陈占红;曹江;方永明;王晓稼. pcDNA3.1(+)-CYP19-GFP真核表达质粒构建[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2011, 40(2): 189-194.
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