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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2001, Vol. 30 Issue (6): 252-255    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2001.06.003
原著     
大肠癌相关基因ST13的原核表达及鉴定
邵吉民;郑树;耿礼仪
浙江大学医学院基础医学系,浙江,杭州,310031;浙江大学肿瘤研究所,浙江,杭州,310009
Expression and Identification of Colorectal-cancer-related Gene ST13 in E.coli
 全文: PDF(156 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的: 原核表达大肠癌相关基因ST13,并予以鉴定.方法:将ST13 cDNA经PCR扩增和亚克隆,与GST原核表达载体pGEX-4T-2重组,转化E.coli INVαF′菌表达,经Gluta th ione Sepharose 4B亲和层析GST-ST13融合蛋白,再以凝血酶切得到ST13蛋白.结果:限制性酶切和DNA测序表明,ST13cDNA ORF正确克隆于pGEX-4T-2多克隆位点 .经IPTG诱导表达的GST-ST13融合蛋白主要存在于可溶性上清,表达量占大肠杆菌总蛋白2 0;.经亲和层析,每升诱导菌回收融合蛋白2.5 mg,纯度为91.3;.Western-blot证实, 原核表达的ST13蛋白、细胞中天然ST13蛋白的10;SDS-PAGE表观分子量,约50 kD.结论:成功构建了ST13基因原核表达质粒,并大量表达和纯化了ST13蛋白.
关键词： 肠肿瘤/遗传学;  基因表达;  序列分析;  DNA;  重组;  遗传;  大肠癌;  ST13基因;  原核表达    
出版日期: 2001-11-25
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邵吉民
郑树
耿礼仪

引用本文:

邵吉民;郑树;耿礼仪. 大肠癌相关基因ST13的原核表达及鉴定[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2001, 30(6): 252-255.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2001/V30/I6/252

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