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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2008, Vol. 37 Issue (1): 45-50    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2008.01.009
专题报道     
细胞裂解液对蛋白质定量方法的影响
徐珊珊;阎春兰;刘黎明;曾群力
浙江大学医学院,浙江省生物电磁学重点实验室,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院,毒理学教研室,浙江,杭州,310058
Effects of different cell lysis buffers on protein quantification
 全文: PDF(333 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:观察不同细胞裂解液对Bradford法和bicinchoninic acid(BCA)法的影响,以确定适合蛋白质组学研究中细胞全蛋白含量的定量方法.方法:采用Bradford法和BCA法测定牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)样品溶液,样品BSA溶液分别由双蒸水和不同裂解液(荧光差异双向凝胶电泳裂解液、三种传统双向凝胶电泳裂解液)配制;然后,采用这两种方法测定上述裂解液所提取的细胞全蛋白样品;采用Bradford法定量反复冻融、不同比色杯和不同时期标准曲线下的样品.结果:各细胞裂解液对Bradford法均有显著性影响,使所定量的BSA浓度普遍偏高1.2至2倍,但定量值可随着加样浓度的增加而增加(r=0.989～0.996,P<0.05);各裂解液对BCA法也均有显著性的干扰,多数定量结果超出仪器读数范围;对于同批全蛋白溶液样品,BCA法的定量结果与Bradford法相比可有千倍差异;反复冻融后蛋白浓度变化统计学上无显著性差异,但有下降趋势,不同比色杯和不同时期标准曲线对Bradford法无显著影响.结论:Bradford法是蛋白质组学中细胞全蛋白定量的较适方法,但需根据具体实验进行优化.
关键词： 蛋白质组学;  蛋白质类/分析;  电泳,凝胶,双向;  血清白蛋白,牛    
出版日期: 2008-01-25
基金资助:

国家自然科学基金(50137030);国家自然科学基金(30170792);浙江省科技攻关重点科研项目(021106135);浙江省自然科学基金面上项目(301524);浙江省卫生厅资助项目(2004ZD006)
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徐珊珊
阎春兰
刘黎明
曾群力

引用本文:

徐珊珊;阎春兰;刘黎明;曾群力. 细胞裂解液对蛋白质定量方法的影响[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2008, 37(1): 45-50.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2008/V37/I1/45

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