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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2007, Vol. 36 Issue (6): 588-591    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2007.06.012
原著     
人抵抗素基因全长的体外拼接及真核表达载体的构建
乔小芝;王宪锋;赵冬久;徐哲荣;俞玲娣;陈智;杨云梅
浙江大学医学院,附属第一医院干部病房,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院,第一附属医院传染病研究所,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院,解剖学教研室,浙江,杭州,310058
Assembly of full-length human resistin gene in vitro and construction of its eukaryotic expression vector
 全文: PDF(247 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:利用合成的寡核苷酸片段,在体外拼接人抵抗素(Resistin,Retn)基因的全长,并构建其真核表达载体.方法:根据已知抵抗素基因(GenBank:AF323081),设计并合成10条寡核苷酸片段,采用降落PCR方法进行拼接,获得预期大小的PCR产物后将其克隆入pSecTag2B载体进行测序确认.结果:降落PCR法扩增的特异条带与目的基因的大小一致.克隆载体测序结果与GenBank中已知序列完全符合.结论:降落PCR成功地拼接和扩增了人抵抗素全长基因,并构建了含有该基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定了实验基础.
关键词： 激素类,异位;  寡核苷酸类;  聚合酶链反应;  基因扩增;  人Resistin基因;  降落PCR;  表达载体    
出版日期: 2007-11-25
基金资助:

浙江省科技厅科研基金(2003C33031)
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乔小芝
王宪锋
赵冬久
徐哲荣
俞玲娣
陈智
杨云梅

引用本文:

乔小芝;王宪锋;赵冬久;徐哲荣;俞玲娣;陈智;杨云梅. 人抵抗素基因全长的体外拼接及真核表达载体的构建[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2007, 36(6): 588-591.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2007/V36/I6/588

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