目的:建立并优化用于子宫肌瘤蛋白质组分析的二维电泳技术,提高其分辨率和重复性.方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向,采用垂直十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向,并对关键步骤如样品的溶解、上样量、电泳参数和染色方法进行一系列的优化.结果:获得质量较好的子宫肌瘤和正常肌层的二维电泳图谱.结论:采用蛋白溶解度增强的裂解液分步提取组织的蛋白质,有利于二维电泳图谱的完整性;RC DC蛋白定量方法是二维电泳较为理想的蛋白定量方法,直接关系到上样量;质谱兼容银染法并不降低蛋白斑点的分辨率;窄范围(pH 4~7)的IPG胶条较宽范围(pH 3~10)的IPG胶条具有较高的分辨率.
朱雪琼;石一复;陈怀增;陈琪. 子宫肌瘤蛋白质组研究中二维电泳方法的建立[J]. 浙江大学学报(医学版), 2004, 33(6): 550-553.
https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2004/V33/I6/550
Cited