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浙江大学学报(医学版)  2020, Vol. 49 Issue (6): 697-704    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2020.12.04
专题报道     
无比山药丸对氢化可的松致肾阳虚模型小鼠性功能的影响
陈青青1(),单超文1,苏洁1,陈炜2,朱加明2,陈素红3,*(),吕圭源1,*()
1. 浙江中医药大学药学院, 浙江 杭州 311400
2. 杭州胡庆余堂药业有限公司, 浙江 杭州 310016
3. 浙江工业大学绿色制药协同创新中心, 浙江 杭州 310014
Effect of Wubi Shanyao pills on sexual function in mice with kidney-yang-deficiency induced by hydrocortisone
CHEN Qingqing1(),SHAN Chaowen1,SU Jie1,CHEN Wei2,ZHU Jiaming2,CHEN Suhong3,*(),LYU Guiyuan1,*()
1. College of Pharmacy, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 311400, China
2. Hangzhou Huqingyutang Pharmaceutical Co. Ltd, Hangzhou 310016, China
3. Collaborative Innovation Center of Green Pharmaceuticals, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China
 全文: PDF(1207 KB)   HTML( 16 )
摘要:

目的: 探讨无比山药丸对氢化可的松致肾阳虚模型小鼠性功能的影响。方法: 采用雄性昆明小鼠皮下注射氢化可的松10 d制备肾阳虚模型,灌胃给予无比山药丸(0.91、1.82、2.73 g/kg)连续9周。观察小鼠一般行为学(自主活动、抓力);交配实验检测雄鼠性行为(捕捉、骑跨、射精次数及潜伏期);ELISA法测定血清皮质醇、促肾上腺皮质激素、促黄体生成素、促卵泡生成素、雌二醇、睾酮水平;计算肾脏、附睾、睾丸和精囊器官指数;HE染色观察小鼠睾丸组织形态;TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测睾丸组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平。结果: 无比山药丸能提高肾阳虚模型小鼠自主活动次数、抓力及捕捉次数,缩短捕捉潜伏期(均P < 0.01);升高血清睾酮、皮质醇、促肾上腺皮质激素水平,降低血清促卵泡生成素水平(P < 0.05或P < 0.01);提高睾丸指数(P < 0.05),改善睾丸病变;抑制细胞凋亡,促进睾丸PCNA蛋白表达。结论: 无比山药丸能改善氢化可的松致肾阳虚小鼠性功能障碍,其机制可能与调节下丘脑-垂体-肾上腺轴,促进睾丸组织细胞增殖,抑制细胞凋亡有关。

关键词: 肾阳虚性功能无比山药丸小鼠氢化可的松    
Abstract:

Objective: To investigate the effect of Chinese medicine Wubi Shanyao pills on sexual function of kidney-yang-deficiency mice induced by hydrocortisone. Methods: Male Kunming mice were injected with hydrocortisone for 10 days to prepare the kidney-yang-deficiency model, and administrated with Wubi Shanyao pills (0.91, 1.82, 2.73 g/kg) for 9 weeks. The general behaviors of mice (autonomous activity, grasping power) were observed; sexual behaviors (capture, straddle, ejaculation frequency and incubation period) of mice were detected by mating experiment. The serum levels of cortisol, adrenocorticotropic hormone (ACTH), luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH), estradiol (E2) and testosterone were measured by ELIZA. The organ indexes of kidney, epididymis, testis and seminal vesicle were calculated. The histomorphology of testis was observed by HE staining. The apoptosis of testis cells was detected by TUNEL; and the expression level of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in testis was detected by immunohistochemistry. Results: Wubi Shanyao pills increased the number of independent activities, grasping power, capture frequency of model mice and shortened the capture latency (all P < 0.01); and also increased the serum levels of testosterone, cortisol, ACTH, decreased the serum levels of FSH (P < 0.05 or P < 0.01); increased testis index (P < 0.05), improved the pathological changes of testis, inhibited cell apoptosis, and promoted PCNA protein expression in testis. Conclusion: Wubi Shanyao pills can improve the sexual function of mice with kidney-yang-deficiency induced by hydrocortisone, which may be related to regulating the hypothalamus-pituitary-adrenal axis (HPA axis), promoting the proliferation of testicular cells, and inhibiting cell apoptosis.

Key words: Deficiency of kidney yang    Sexual function    Wubi Shanyao pills    Mouse    Hydrocortisone
收稿日期: 2020-10-26 出版日期: 2021-01-14
CLC:  R285.5  
基金资助: 国家自然科学基金(81873036);浙江省重点研发计划(2017C03052);浙江省重点实验室项目(2012E10002)
通讯作者: 陈素红,吕圭源     E-mail: qingqingchen1997@163.com;chensuhong@aliyun.com;lv.gy@263.net
作者简介: 陈青青(1997-), 女, 硕士研究生, 主要从事中药药理与新产品开发研究; E-mail:qingqingchen1997@163.com; https://orcid.org/0000-0003-4971-404X
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陈青青
单超文
苏洁
陈炜
朱加明
陈素红
吕圭源

引用本文:

陈青青,单超文,苏洁,陈炜,朱加明,陈素红,吕圭源. 无比山药丸对氢化可的松致肾阳虚模型小鼠性功能的影响[J]. 浙江大学学报(医学版), 2020, 49(6): 697-704.

CHEN Qingqing,SHAN Chaowen,SU Jie,CHEN Wei,ZHU Jiaming,CHEN Suhong,LYU Guiyuan. Effect of Wubi Shanyao pills on sexual function in mice with kidney-yang-deficiency induced by hydrocortisone. J Zhejiang Univ (Med Sci), 2020, 49(6): 697-704.

链接本文:

http://www.zjujournals.com/med/CN/10.3785/j.issn.1008-9292.2020.12.04        http://www.zjujournals.com/med/CN/Y2020/V49/I6/697

组别 n 自主活动(次) 抓力(g)
与正常对照组比较,**P<0.01;与模型对照组比较,#P<0.05,##P<0.01.
正常对照组 10 190±28 199±28
模型对照组 9 152±15** 157±10**
金匮肾气丸组 8 172±24 191±37
无比山药丸小剂量组 10 183±27## 188±6##
无比山药丸中剂量组 10 172±16 189±6##
无比山药丸大剂量组 10 177±19# 191±16##
表 1  各组自主活动及抓力比较
组别 n 捕捉 射精 骑跨
潜伏期(s) 次数(次) 潜伏期(s) 次数(次) 潜伏期(s) 次数(次)
与正常对照组比较,**P<0.01;与模型对照组比较,##P<0.01.
正常对照组 10 54±20 13.0±3.7 968±334 4.7±2.9 1238±400 3.5±2.7
模型对照组 9 86±31** 6.7±2.5** 1432±366** 2.3±2.1 1528±261 1.7±1.7
金匮肾气丸组 8 82±20 7.0±1.8 1326±339 3.5±2.7 1416±337 2.9±2.2
无比山药丸小剂量组 10 53±26## 7.9±1.5 1337±388 3.2±2.4 1417±404 2.5±1.9
无比山药丸中剂量组 10 54±32## 8.3±1.9 1210±289 4.5±3.0 1276±327 3.4±2.3
无比山药丸大剂量组 10 47±20## 11.6±2.2## 1113±382 4.6±3.2 1221±381 3.5±2.6
表 2  各组性行为比较
组别 n 促肾上腺皮质激素(pmol/L) 皮质醇(nmol/L)
与正常对照组比较,**P<0.01;与模型对照组比较,#P<0.05.
正常对照组 10 8.60±1.40 23.17±3.31
模型对照组 9 6.77±1.46** 18.46±2.52**
金匮肾气丸组 8 8.24±1.17# 21.67±2.54
无比山药丸小剂量组 10 8.43±1.57# 21.26±4.68
无比山药丸中剂量组 10 8.45±1.47# 21.04±2.54
无比山药丸大剂量组 10 7.77±1.19 21.76±3.97#
表 3  各组促肾上腺皮质激素和皮质醇水平比较
组别 n 黄体生成素(U/L) 卵泡刺激素(U/L) 雌二醇(pmol/L) 睾酮(nmol/L)
与正常对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与模型对照组比较,#P<0.05,##P<0.01.
正常对照组 10 4.35±0.41 38.1±3.3 38.7±8.1 2.02±0.30
模型对照组 9 4.91±0.10* 42.4±4.9 35.5±3.0 1.54±0.30**
金匮肾气丸组 8 4.57±0.35 42.8±6.6 33.3±4.3 1.78±0.22
无比山药丸小剂量组 10 4.48±0.49 34.2±7.0## 35.0±3.1 1.52±0.16
无比山药丸中剂量组 10 4.51±0.54 37.1±7.3 38.9±3.7 1.78±0.30#
无比山药丸大剂量组 10 4.64±0.31 41.8±7.8 39.4±3.6 1.82±0.22#
表 4  各组性激素水平比较
组别 n 睾丸指数 附睾指数 精囊指数 肾脏指数
与模型对照组比较,*P<0.05.
正常对照组 10 6.59±0.95 1.33±0.22 4.72±1.23 15.59±1.60
模型对照组 9 5.78±0.47 1.29±0.21 4.89±0.68 15.30±2.12
金匮肾气丸组 8 6.04±1.96 1.25±0.25 4.59±1.62 14.83±0.90
无比山药丸小剂量组 10 6.06±1.18 1.32±0.32 4.59±0.83 15.62±3.23
无比山药丸中剂量组 10 5.89±0.84 1.21±0.17 5.22±1.02 15.82±1.82
无比山药丸大剂量组 10 6.86±0.95* 1.47±0.12 5.32±1.37 16.84±3.68
表 5  各组生殖器官和肾脏指数比较
图 1  各组睾丸组织形态学表现
图 2  各组睾丸组织细胞凋亡情况
图 3  各组睾丸组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化
1 韩晓峰, 任江玲, 胡黎明 et al. 平凉市中老年男性性功能调查报告[J]. 现代泌尿外科杂志, 2011, 16 (2): 163- 165
HAI Xiaofeng , REN Jiangling , HU Liming et al. Prevalence of aging male sexual dysfunction in Pingliang city[J]. Journal of Modern Urology, 2011, 16 (2): 163- 165
doi: 10.3969/j.issn.1009-8291.2011.02.023
2 吕彬.鹿仲温肾水丸对肾阳虚型勃起功能障碍大鼠t、fsh、lh浓度的影响[D].哈尔滨: 黑龙江省中医药科学院, 2014.
LYU Bin. Effect of Luzhong wenshenshui Pill on T, FSH and LH concentration in erectile dysfunction rats with kidney yang deficiency[D]. Harbin: Heilongjiang College of traditional Chinese Medicine, 2014. (in Chinese)
3 杨金风 . 无比山药丸加减方辅治慢性肾小球肾炎脾肾阳虚型疗效观察[J]. 实用中医药杂志, 2018, 34 (2): 200- 202
YANG Jinfeng . Clinical observation on the treatment of chronic glomerulonephritis of spleen and kidney yang deficiency type with modified and modified matchless yam pill[J]. Journal of Practical Chinese Medicine, 2018, 34 (2): 200- 202
doi: 10.3969/j.issn.1004-2814.2018.02.047
4 李洁 . 无比山药丸加减治疗气阴两虚型肾性血尿的疗效及机制研究[J]. 中国社区医师, 2018, 34 (24): 86- 87
LI Jie . Effect and mechanism of Wubi Shanyao pills in treating renal hematuria due to deficiency of qi-yin[J]. Chinese Community Doctors, 2018, 34 (24): 86- 87
doi: 10.3969/j.issn.1007-614x.2018.24.054
5 方萍, 苏洁, 陈炜 et al. 无比山药丸对腺嘌呤致肾阳虚大鼠性功能障碍的影响[J]. 中国中药杂志, 2020, 45 (10): 2439- 2445
FANG Ping , SU Jie , CHEN Wei et al. Effect of Wubi Shanyao pills on sexual dysfunction in rats with adenine-induced kidney-Yang deficiency[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2020, 45 (10): 2439- 2445
doi: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20200107.403
6 张子怡, 陈宝军, 张庆, 等.肾阳虚证动物模型的造模方法与评价指标[J].福建中医药, 2014, 45(2):61-63. DOI:CNKI:SUN:FJZY.0.2014-02-034.
ZHANG Ziyi, CHEN Baojun, ZHANG Qing, et al. Methods and evaluation indexes of animal model of kidney yang deficiency syndrome[J]. Fujian Journal of Traditional Chinese Medicine, 2014, 45(2):61-63. DOI:CNKI:SUN:FJZY.0.2014-02-034.(in Chinese)
7 马超, 叶鸿博, 林喆, 等.4种肾阳虚模型的评价[J].吉林中医药, 2019, 39(4):508-511. DOI:CNKI:SUN:ZYJL.0.2019-04-024.
MA Chao, YE Hongbo, LIN Zhe, et al. Evaluation of four kidney-yang deficiency models[J]. Jilin Journal of Chinese Medicine, 2019, 39(4):508-511. DOI:CNKI:SUN:ZYJL.0.2019-04-024.(in Chinese)
8 吕圭源, 苏洁, 陈素红, 等.相同性味不同归经中药对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响[J].上海中医药杂志, 2011, 45(10):70-74. DOI:CNKI:SUN:SHZZ.0.2011-10-032.
LYU Guiyuan, SU Jie, CHEN Suhong, et al. Effects of herbs of same nature and flavor but different meridian tropism on estradiol-induced kidney-yang deficiency in mice[J]. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine, 2011, 45(10):70-74. DOI:CNKI:SUN:SHZZ.0.2011-10-032.(in Chinese)
9 赵健, 桂士良, 崔腾腾, 等.睾酮的生理作用及临床应用进展[J].中国性科学, 2020, 29(1):20-24. DOI:CNKI:SUN:XKXZ.0.2020-01-008.
ZHAO Jian, GUI Shiliang, CUI Tengteng, et al. Progress in the physiological role and clinical application of testosterone[J]. Chinese Journal of Human Sexuality, 2020, 29(1):20-24. DOI:CNKI:SUN:XKXZ.0.2020-01-008.(in Chinese)
10 王亚轩, 蔡广增, 杨书文 et al. 原因不明少精子症睾丸生精细胞增殖与凋亡变化的研究[J]. 中华泌尿外科杂志, 2002, 11 (23): 651- 653
WANG Yaxuan , CAI Guangzeng , YANG Shuwen et al. Study on changes of proliferation and apoptosis of spermatogenic cell in idiopathic oligospermia[J]. Chinese Journal of Urology, 2002, 11 (23): 651- 653
doi: 10.3760/j:issn:1000-6702.2002.11.003
11 李欣, 颜勇 . 肾阳虚大鼠睾丸生精细胞增殖与凋亡的变化[J]. 承德医学院学报, 2007, 1 (24): 1- 3
LI Xin , YAN Yong . Changes of proliferation and apoptosis of apermatogenic cells in shenyang-defect rat[J]. Journal of Chengde Medical College, 2007, 1 (24): 1- 3
doi: 10.3969/j.issn.1004-6879.2007.01.001
12 陈秋菊.衰老对人和小鼠睾丸精子发生影响及其机制的研究[D].广州: 暨南大学, 2004.
CHEN Qiuju. Studies on effects of agingon spermatogenesis nd its mechnaism in men and mice[D]. Guangzhou: Jinan University, 2004. (in Chinese)
[1] 舒敏, 张文哲, 金湘博, 曾玲晖, 项迎春. 敲除Sirt3后激活自噬对阿尔茨海默病有保护作用[J]. 浙江大学学报(医学版), 2020, 49(6): 750-757.
[2] 王华英, 吕佳佩, 陈丽萍, 俞万钧. 趋化因子CXCL12可能参与白细胞介素17A对小鼠肺成纤维细胞的活化[J]. 浙江大学学报(医学版), 2020, 49(6): 758-764.
[3] 赵慧慧,汤慧芳. 基于基因敲除的炎性肠疾病复合动物模型研究进展[J]. 浙江大学学报(医学版), 2018, 47(6): 665-670.
[4] 王青梅,舒敏,徐千姿,谢一乙,阮盛哲,王健达,曾玲晖. 和厚朴酚对癫痫小鼠学习记忆能力的改善作用[J]. 浙江大学学报(医学版), 2018, 47(5): 450-456.
[5] 魏振龙,石文贵,陈克明,周建,王鸣刚. 淫羊藿素通过CXCR4/SDF-1信号通路促进小鼠成骨细胞成熟和矿化[J]. 浙江大学学报(医学版), 2017, 46(6): 571-577.
[6] 陈达华 等. CRISPR/Cas9基因编辑技术构建靶向敲除小鼠微小RNA-101a基因的一体化载体系统[J]. 浙江大学学报(医学版), 2017, 46(4): 427-432.
[7] 刘芙蓉 等. 新生小鼠皮层神经元动作电位发放模式研究[J]. 浙江大学学报(医学版), 2016, 45(3): 275-280.
[8] 白亮 等. 高表达过氧化物酶体增殖子激活受体γ诱导小鼠原代肝细胞发生脂肪变性[J]. 浙江大学学报(医学版), 2016, 45(1): 68-74.
[9] 王静, 胡燕, 谭笔琴, 王佳佳, 赵梦婷, 翁勤洁, 朱狄峰, 汪慧英. 小鼠pLCK-CD69-IRES-EGFP表达载体构建及CD69转基因小鼠的建立[J]. 浙江大学学报(医学版), 2015, 44(5): 511-516.
[10] 洪庆, 张力三, 陈寅, 何旭东, 胡兴越. 缺血性卒中患者急性期营养代谢相关指标的变化[J]. 浙江大学学报(医学版), 2015, 44(1): 61-66.
[11] 厉旭云,徐小方,黄静,等. 水通道蛋白4基因敲除对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的影响[J]. 浙江大学学报(医学版), 2014, 43(3): 281-286.
[12] 张立权,徐佳妮,王珍珍,等. 自发活动实验在小鼠全脑缺血后功能损伤[J]. 浙江大学学报(医学版), 2014, 43(3): 339-345.
[13] 李盛建,黄竹燕,叶夷露,等. 物体材质与检测间隔时间对小鼠新物体识别实验结果的影响[J]. 浙江大学学报(医学版), 2014, 43(3): 346-352.
[14] 徐倩,金梦媚,郑文文,朱丽,徐水凌. Toll样受体2/4-核因子κB信号通路在人结核分枝杆菌侵入小鼠树突细胞2.4中的作用[J]. 浙江大学学报(医学版), 2014, 43(2): 200-206.
[15] 李国政,等.
环磷酸腺苷反应元件结合蛋白靶基因Staufen在小鼠海马的原位杂交定位
[J]. 浙江大学学报(医学版), 2014, 43(1): 66-70+76.