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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2013, Vol. 42 Issue (6): 660-665    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2013.06.012
论著     
三种转染试剂介导pGPU6/GFP/Neo真核表达载体转染鸡胚成纤维细胞的比较研究
何星，李华，邵雁，胡莹，顾子春，陈力，马菁晶，兰志勇
浙江大学医学院附属邵逸夫医院整形科，浙江 杭州 310016
Comparison of three different methods in transfection of plasmid pGPU6/GFP/Neo to chicken embryo fibroblasts
HE Xing，LI Hua，SHAO Yan，HU Ying，GU Zichun，CHEN Li，MA Jingjing，LAN Zhiyong
Department of Plastic and Reconstructive Surgery，Sir Run Run Shaw Hospital，Zhejiang University School of Medicine，Hangzhou，310016，China
 全文: PDF(983 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的：采用不同转染试剂介导pGPU6/GFP/Neo质粒转染鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1，以获得最优化的方法。
方法：分别采用不同剂量（1.25 μl、2.0 μl、2.5 μl）的Lipofec-tamin2000、Gbfectene-Elite及HilyMax转染试剂介导1 μg质粒进行转染，观察其转染效率，测定其转染细胞存活率。
结果：HilyMax组的转染效率为（86.85%±2.32%），较Lipofectamin2000组（48.33%±3.24%）、Gbfectene-Elite组（37.35%±5.41%）高（F=18.882，P<0.05）；其中，HilyMax 2.5 μl组的转染效率最高为（90.53%±1.15%）。Lipofectamin2000组的细胞存活率（65.76%±5.78%）明显低于HilyMax组（89.54%±0.86%）、Gbfectene-Elite组（82.45%±3.56%）（F＝90.676，P＜0.05）。
结论：HilyMax对于鸡胚成纤维细胞具有最好的转染效率和最低的细胞毒性，推荐使用2.5 μl HilyMax：1 μg质粒进行鸡胚成纤维细胞的转染。
关键词： 转染,质粒DNA/遗传学;  鸡胚成纤维细胞/细胞学;  绿色荧光蛋白质类;  细胞毒性    
Abstract:

Objective： To compare three different methods in transfection of plasmid pGPU6/GFP/Neo into chicken embryo fibroblast.
Methods： Different doses （1.25 μl，2 μl，2.5 μl）of Lipofec-tamin2000，Gbfectene-Elite and HilyMax were used to transfect 1 μg plasmid pGPU6/GFP/Neo.The transfection efficiency was observed by the fluorescence and the cell viabilities were measured.
Results： The transfection efficiency of HilyMax was significant higher than that of Lipofectamin2000 and Gbfectene-Elite（86.85%±2.32% vs 48.33%±3.24% and vs 37.35%±5.41%; F=18.882，P<0.05）.The transfection efficiency of 2.5 μl HilyMax was highest（90.53%±1.15%）.The cell viability of Lipofectamin2000 was significantly lower than that of HilyMax and Gbfectene-Elite（65.76%±5.78% vs 89.54%±0.86% and vs 82.45%±3.56%;F＝90.676，P＜0.05）.
Conclusion： HilyMax has the highest transfection efficiency and the lowest cell toxicity in transfection of plasmid pGPU6/GFP/Neo into chicken embryo fibroblast，with the optimal ratio of 2.5 μl HilyMax：1 μg plasmid.
Key words: Transfection,plasma/genetics    Chicken embryo fibroblast/cytology    Green fluorescent protein    Cell toxicity
收稿日期: 2013-03-12 出版日期: 2013-11-25
基金资助:

浙江省自然科学基金资助项目（Y2110413）.
通讯作者: 李华（1960-），女，主任医师，硕士生导师，从事整形美容外科基础及临床研究；E-mail地址：hualihz@sina.com   
作者简介: 何星（1981-），男，博士，主治医师，从事整形外科、口腔颌面外科基础及临床研究.
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何星
李华
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兰志勇

引用本文:

何星，李华，邵雁，胡莹，顾子春，陈力，马菁晶，兰志勇. 三种转染试剂介导pGPU6/GFP/Neo真核表达载体转染鸡胚成纤维细胞的比较研究[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2013, 42(6): 660-665.

HE Xing，LI Hua，SHAO Yan，HU Ying，GU Zichun，CHEN Li，MA Jingjing，LAN Zhiyong. Comparison of three different methods in transfection of plasmid pGPU6/GFP/Neo to chicken embryo fibroblasts. Journal of ZheJiang University(Medical Science), 2013, 42(6): 660-665.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/10.3785/j.issn.1008-9292.2013.06.012    或    https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2013/V42/I6/660

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