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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2010, Vol. 39 Issue (6): 623-627    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2010.06.012
论著     
STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定
赵虹1,2,张惊宇1,徐万海3,杨子超1,赵庆杰2
1.哈尔滨医科大学,附属第四医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150001; 2.哈尔滨医科大学,附属第一医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150001 3.哈尔滨医科大学,附属第四医院泌尿外科,黑龙江,哈尔滨,150001
Construction and identification of lentiviral vector for RNA interference targeting STUB1 gene
 全文: PDF(347 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:构建人STUB1基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并进行鉴定.方法:针对筛选确定的人STUB1 基因RNAi有效靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Age I 和EcoR I 酶切后的pMagic 4.0载体连接,产生短发卡RNA 慢病毒载体.PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,并包装成慢病毒颗粒.结果:PCR鉴定与DNA测序证实,合成的含STUB1 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确.STUB1 shRNA慢病毒载体在293T细胞中成功包装成慢病毒颗粒.结论:成功构建人STUB1基因RNAi慢病毒载体以及包装成功慢病毒颗粒,为研究STUB1在胶质瘤发生发展过程中相关信号通路的作用,提供了稳定感染细胞的载体.
关键词： 慢病毒属/遗传学;  遗传载体;  RNA干扰;  神经胶质瘤;  聚合酶链反应;  慢病毒载体;  STUB1;  RNAi    
出版日期: 2010-11-25
基金资助:

黑龙江省自然科学基金面上资助项目(D200980)
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赵虹
张惊宇
徐万海
杨子超
赵庆杰

引用本文:

赵虹,张惊宇,徐万海,杨子超,赵庆杰. STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2010, 39(6): 623-627.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2010/V39/I6/623

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