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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2009, Vol. 38 Issue (3): 283-288    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2009.03.011
原著     
紫外线诱导人角质形成细胞衰老的作用与端粒酶表达无关
王懿娜;吴炜;彭国平;方红
浙江大学医学院,附属第一医院,浙江,杭州,310003
Telomerase expression is not involved in aging process of human keratinocytes induced by UVB irradiation
 全文: PDF(388 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:探讨人永生化角质形成细胞(HaCaT)和人皮肤原代角质形成细胞(HEKa)接受紫外线照射后的衰老机制及其凋亡、坏死和细胞周期的改变. 方法:中波紫外线(UVB)小剂量、多次照射HaCaT细胞和HEKa细胞,以细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)化学染色法观察细胞衰老状态,流式细胞术检测细胞凋亡、坏死和细胞周期阻滞情况;ELISA法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blot检测redox蛋白p66Shc的表达;RT-PCR法检测细胞内人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因在UVB照射前后的表达情况.结果:UVB照射后,SA-β-Gal细胞化学染色结果显示HaCaT细胞和HEKa细胞均呈现强阳性染色.HaCaT细胞的凋亡率从(1.81±0.25);增至(4.43±0.28);,坏死率从(0.05±0.01);上升至(0.10±0.03);,但细胞周期未见明显阻滞;HEKa细胞的凋亡率从(0.65±0.05);增至(59.53±2.35);,坏死率达(3.89±0.24);,较对照组显著增加(P＜0.05),且细胞周期大部分阻滞于G0/G1期.HaCaT细胞和HEKa细胞的细胞内SOD活性经UVB照射后显著下降(P＜0.05),而MDA水平则明显增高.p66Shc蛋白在UVB照射后表达增强.HaCaT细胞在UVB照射前后均高表达hTERT基因,而HEKa细胞不表达hTERT基因.结论:HaCaT细胞和HEKa细胞均可被UVB诱导进入"应激性早衰"状态,此衰老与细胞内氧化应激水平密切相关,而与端粒酶表达无关;但HaCaT细胞的凋亡率、坏死率及细胞周期阻滞情况较HEKa细胞好,这可能与HaCaT细胞高表达端粒酶水平,从而对细胞损伤修复能力及分化调节能力较强有关.

关键词： 紫外线;  角蛋白细胞/辐射效应;  表皮;  端粒,末端转移酶;  细胞衰老;  细胞凋亡;  基因表达    
出版日期: 2009-07-09
基金资助:

中华医学会-欧莱雅中国人健康皮肤项目(2007);浙江省卫生厅资助项目(2006B865)
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王懿娜
吴炜
彭国平
方红

引用本文:

王懿娜;吴炜;彭国平;方红. 紫外线诱导人角质形成细胞衰老的作用与端粒酶表达无关[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2009, 38(3): 283-288.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2009/V38/I3/283

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