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浙江大学学报(医学版)  2008, Vol. 37 Issue (6): 585-591    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2008.06.008
专题报道     
问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定
姜久昆;林旭瑷;严杰;薛峰
浙江大学医学院,病原生物学系,浙江,杭州,310058;浙江大学医学院,病原生物学系,浙江,杭州,310058;浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室,浙江,杭州,310003
Prediction and immunologic identification of antigenic epitopes in genus-specific outer membrane protein LipL41 of Leptospira interrogans
 全文: PDF(463 KB)   HTML (
摘要:

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别.方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位.采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组PⅢ.分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组PⅢ免疫杂交反应性.结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位.经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段.各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体PⅢ蛋白N端并有效表达.各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其Western Blot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定.结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位.共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位.差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象.

关键词: 钩端螺旋体,问号/免疫学细菌外膜蛋白质类/生物合成细菌外膜蛋白质类/分离外膜脂蛋白/属特异性抗原LipL41/1/LipL41/2抗原表位/预测噬菌体展示免疫学鉴定    
出版日期: 2008-11-25
基金资助:

国家自然科学基金(30671863);中国博士后科学基金(20060401070)

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林旭瑷
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薛峰

引用本文:

姜久昆;林旭瑷;严杰;薛峰. 问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定[J]. 浙江大学学报(医学版), 2008, 37(6): 585-591.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2008/V37/I6/585

[1] 罗冬娇,胡野,Dennin RH,严杰. 问号钩端螺旋体lipL21基因改建及其表达产物免疫原性变化和定位[J]. 浙江大学学报(医学版), 2007, 36(5): 458-464.