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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2008, Vol. 37 Issue (5): 499-505    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2008.05.014
原著     
小鼠B7-H4重组腺病毒的构建及鉴定
闫佩毅;姚航平;钱韵;古丽娟;陶岚;张立煌
浙江大学医学院,免疫学研究所,浙江,杭州,310058
Construction and identification of recombinant adenoviral vecto r encoding B7-H4 gene
 全文: PDF(484 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:利用AdEasyTM XL system构建携带小鼠B 7-H4基因的重组腺病毒,并鉴定其生物学活性.方法:以RT-PCR方法从C5 7小鼠肺组织中扩增B7-H4全长基因并克隆到T载体,然后测序鉴定.经Xhol Ⅰ和EcoR Ⅴ双 酶切后接入pshuttle-CMV穿梭载体(简称PSC),构建重组腺病毒的穿梭质粒PSC-mB7-H4 ,并电转化至BJ5183-AD-1感受态细菌,经筛选获得携带mB7-H4的重组腺病毒的质粒pmB7 -H4/Ad.将此质粒转化人胚肾细胞(AD-293)产生复制缺陷的重组腺病毒mB7-H4/Ad .以RT-PCR及Western blot方法检测被mB7-H4/Ad感染的AD-293细胞中B7-H4 mRNA和蛋 白的表达,并观察重组腺病毒感染的小鼠成纤维细胞(L929)对T细胞增殖和细胞因子表达的影响. 结果:获得序列准确的mB7-H4基因并成功构建重组腺病毒表达质 粒,转化AD-293细胞获得重组腺病毒;细胞生物学实验证实,该重组腺病毒具有抑制CD3单抗诱导的T淋巴细胞的增殖和细胞因子的分泌. 结论:成功构建具有免疫抑制功能的mB7-H4重组腺病毒.
关键词： T淋巴细胞/免疫学;  重组,遗传;  腺病毒科/遗传学;  转染;  细胞增殖;  细胞,培养的;  质粒    
出版日期: 2008-09-25
基金资助:

国家重点基础研究发展计划(973计划)(2003CB515503)
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闫佩毅
姚航平
钱韵
古丽娟
陶岚
张立煌

引用本文:

闫佩毅;姚航平;钱韵;古丽娟;陶岚;张立煌. 小鼠B7-H4重组腺病毒的构建及鉴定 [J]. 浙江大学学报（医学版）, 2008, 37(5): 499-505.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2008/V37/I5/499

[1] 徐亦鸣,应可净. 中性粒细胞胞外诱捕网与肿瘤相关研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2020, 49(1): 107-112.
[2] 方娟,潘志成,郭晓纲. INK4基因座中反义非编码RNA调控细胞增殖与凋亡影响动脉粥样硬化的研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2020, 49(1): 113-117.
[3] 王青梅, 徐千姿, 魏安怡, 陈世硕, 张翀, 曾玲晖. 大剂量维生素C通过减少糖酵解和蛋白质合成抑制乳腺癌细胞增殖[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2019, 48(3): 296-302.
[4] 唐思阳,叶佳,李月舟. I1363T突变致人骨骼肌电压门控钠通道快失活受损的机制[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2019, 48(1): 12-18.
[5] 翁炳焕,徐威,苏岚,沈敏,李蓉,虞晓鹏,李兰娟. 脂质体介导SV40LT基因转染构建羊水染色体核型分析质控细胞系研究[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(5): 520-524.
[6] 夏海雄,李莉,周艳华,任平平,何志旭,舒莉萍. g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(1): 57-63.
[7] 张谊,张璃,张启瑜,洪炜龙,林孝华. 微小RNA222靶向调控基质金属蛋白酶1促进增生性瘢痕组织成纤维细胞生长[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(6): 609-617.
[8] 胡静 等. 记忆T细胞在行放射治疗的非小细胞肺癌患者中的表达及其预后预测价值[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(5): 523-528.
[9] 姜贻乾 等. 微小RNA-29b对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其分子生物学机制[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(4): 349-356.
[10] 田华 等. CD97免疫表位对乳腺癌细胞株MDA-MB231生物学行为的影响[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(4): 341-348.
[11] 王海凤 等. CXC趋化因子受体4通过S期激酶相关蛋白2调控乳腺癌细胞周期的机制[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(4): 357-363.
[12] 陈达华 等. CRISPR/Cas9基因编辑技术构建靶向敲除小鼠微小RNA-101a基因的一体化载体系统[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(4): 427-432.
[13] 汪河滨,李洋,刘馨刚,周峻,王青青,汤谷平. 普朗尼克—聚乙烯亚胺纳米胶束的制备及其细胞生物学特性[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2017, 46(2): 127-133.
[14] 曹鹏 等. 双氢青蒿素抗肿瘤分子生物学机制研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2016, 45(5): 501-507.
[15] 陈晓静 等. 微RNA-let-7e-3p在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中的表达及临床意义[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2016, 45(4): 342-348.