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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2007, Vol. 36 Issue (4): 364-370    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2007.04.010
原著     
定点突变法显示在高龄SHR大鼠心脏组织中KCNE2第98位氨基酸可能存在磷酸化修饰
王慧莲;吕社民;宁启兰;杨旭东;韩燕;钟波;Gea-Ny TSENG
西安交通大学医学院遗传与分子生物学系,陕西,西安,710061;佛吉尼亚联邦大学生理学系,美国,Richmond,VA,23298;西安交通大学医学院遗传与分子生物学系,陕西,西安,710061;佛吉尼亚联邦大学生理学系,美国,Richmond,VA,23298
KCNE2 protein S98 phosphorylation in heart of old SHR rats detected by point mutagenesis
 全文: PDF(494 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:探究在高龄SHR大鼠心室膜蛋白中,KCNE2蛋白是否发生了磷酸化修饰.方法:用碱性磷酸酶处理高龄SHR大鼠心室膜蛋白,以抗KCNE2的抗体(Ab2)为一抗进行免疫印迹;将在蛋白离体系统中翻译出的含c-myc的KCNE2融合蛋白经碱性磷酸酶处理后,分别以Ab2和抗c-myc的抗体为一抗的免疫印迹;以及一系列的c-myc-hKCNE2的单点(KCNE2Y96F和KCNE2S98A)和双点突变(KCNE2Y96F/S98A)实验.结果:高龄SHR大鼠心室膜蛋白样品经碱性磷酸酶处理后,极大地减弱了Ab2对KCNE2蛋白的识别能力;另外,蛋白离体系统中翻译出的含c-myc的KCNE2融合蛋白经碱性磷酸酶处理后,虽然极大地减弱了Ab2对其融合蛋白的识别能力,却没有影响抗c-myc抗体对KCNE2融合蛋白的识别能力.定点突变的结果显示,虽然以抗c-myc抗体为一抗的免疫印迹结果显示,蛋白质离体翻译系统成功地翻译出了单突变子KCNE2S96A及双突变子KCNE2Y96F/S98A蛋白,但不论样品被碱性磷酸酶处理与否,Ab2在这些样品中均检测出很弱的KCNE2蛋白免疫条带.结论:在高龄SHR大鼠心室组织中,KCNE2第98位丝氨酸可能发生了磷酸化修饰.然而该位点的磷酸化修饰是否会通过影响心脏的电生理,而在SHR大鼠心脏病变过程中起着一定的作用,有待于从电生理的水平上进一步研究.
关键词： 磷酸化;  点突变;  心脏;  Q-T延长综合征;  钾通道;  KCNE2蛋白;  大鼠,近交SHR    
出版日期: 2007-07-25
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王慧莲
吕社民
宁启兰
杨旭东
韩燕
钟波
Gea-Ny TSENG

引用本文:

王慧莲;吕社民;宁启兰;杨旭东;韩燕;钟波;Gea-Ny TSENG. 定点突变法显示在高龄SHR大鼠心脏组织中KCNE2第98位氨基酸可能存在磷酸化修饰[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2007, 36(4): 364-370.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2007/V36/I4/364

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