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浙江大学学报(医学版)  2007, Vol. 36 Issue (3): 229-235    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2007.03.004
专题报道     
微粒体Ⅱ相代谢酶基因在小鼠胚胎干细胞定向分化肝细胞中的表达
郭美媛,朱丹雁,杜悦,楼宜嘉
浙江大学药学院药理毒理与生化药学研究所,浙江 杭州 310058
Gene expressions of phase Ⅱ enzymes in mouse embryonic stem cell-derived hepatocytes
 全文: PDF(595 KB)   HTML (
摘要:

目的:评价微粒体Ⅱ相代谢酶基因在小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)定向分化肝细胞中的表达,为进一步探索酶蛋白表达及其催化活性提供依据.方法:ES细胞体外悬滴培养定向分化成肝细胞表型,RT-PCR法检测肝细胞发育依赖性基因AFP、ALB、CYP7a1的表达,免疫细胞化学法确认成熟肝细胞特异性标记物白蛋白(ALB)表达,RT-PCR法检测上述肝细胞中Ⅱ相代谢酶尿苷二磷酸葡萄糖醛酸结合酶系(UGTs)和微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(mGST1)基因表达.结果:ES细胞在定向分化至d 8时,肝细胞发育依赖性基因AFP和ALB有较高表达,d 18时AFP表达甚微而ALB表达显著增加,并伴有成熟肝细胞特异性基因CYP7a1的表达.定向分化呈肝细胞表型时,成熟肝细胞特异性蛋白ALB呈强阳性表达.分化过程中Ⅱ相代谢酶基因UGT1a1、UGT1a9在分化前后均稳定表达;UGT1a6表达呈发育依赖性;UGT2b5未见表达;mGST1在分化前后均有少量表达,但在成熟肝细胞中表达显著增加,与成熟小鼠肝相似.结论:ES细胞体外悬滴培养可定向分化为成熟肝细胞;Ⅱ相代谢酶UGTs、mGST1基因在分化成熟肝细胞表达与小鼠肝细胞相似,可望为Ⅱ相代谢酶代谢深层次研究提供高效模型.

关键词: 葡萄糖醛酸基转移酶%肝细胞%细胞分化%胚胎/细胞学%干细胞/生理学%细胞培养的%谷胱甘肽转移酶    
出版日期: 2007-05-25
基金资助:

国家自然科学基金(30672564;30472112;30171121)%浙江省自然科学基金(Y206473)

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引用本文:

郭美媛,朱丹雁,杜悦,楼宜嘉. 微粒体Ⅱ相代谢酶基因在小鼠胚胎干细胞定向分化肝细胞中的表达[J]. 浙江大学学报(医学版), 2007, 36(3): 229-235.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2007/V36/I3/229

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