Please wait a minute...
浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2006, Vol. 35 Issue (5): 507-511    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2006.05.008
原著     
10-23 DNA enzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的切割活性
侯伟;沃健儿;刘克洲;李敏伟
浙江大学医学院,附属第一医院传染病研究所,卫生部传染病重点实验室,浙江,杭州,310003
Cleavage of in vitro transcripts of hepatitis B virus C gene by 10-23 DNA enzyme
 全文: PDF(190 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:探讨10-23 DNA enzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的特异切割活性.方法:设计并合成3种能针对乙型肝炎病毒C基因开放阅读框A1816UG的特异性脱氧核酶,分别命名为DrzBC-7、DrzBC-8和DrzBC-9.应用体外转录的方法获得相应的底物RNA,观察DrzBC-7、DrzBC-8和DrzBC-9对其的体外切割效应.以DrzBC-9为例,观察不同浓度的MgCl2对体外切割效率的影响,根据Lineweaver Burk作图法,计算相关的酶动力学参数Km、Kcat和Kcat/Km.结果:通过体外转录获得用于切割反应的底物RNA,其大小为300 nt.在特定的切割条件下,DrzBC-7、DrzBC-8和DrzBC-9均能对相应的底物RNA进行有效的切割,切割产物分别为109 nt和191 nt.以DrzBC-9为例,在切割反应体系中缺乏MgCl2时,未见有切割反应.MgCl2浓度在150 mmol·L-1时达到最高切割效率,再提高MgCl2的浓度,切割效率未见明显增大.酶动力学参数Km、Kcat和Kcat/Km分别为1.4×10-9 mol·L-1,1.6 min-1和 1.1×109 mol·L-1·min-1.结论:针对乙型肝炎病毒C基因的10-23 DNA enzyme在体外对相应的转录产物有特异切割作用.
关键词： DNA催化性;  DNA;  单es,链;  肝炎病毒,乙型/遗传学;  基因组,病毒/遗传学;  重组,遗传;  转染    
出版日期: 2006-09-25
基金资助:

国家自然科学基金(30271183;30471539)
服务　　
把本文推荐给朋友
加入引用管理器
E-mail Alert
RSS
作者相关文章　　
侯伟
沃健儿
刘克洲
李敏伟

引用本文:

侯伟;沃健儿;刘克洲;李敏伟. 10-23 DNA enzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的切割活性[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2006, 35(5): 507-511.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2006/V35/I5/507

[1] 曲文政,庄英粮,李学坤. 表观遗传修饰在神经退行性变性疾病中的作用研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2021, 50(5): 642-650.
[2] 韩恒毅,冯帆,李海涛. 表观遗传与肿瘤代谢研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2021, 50(1): 1-16.
[3] 段玲艳,尹香菊,孟红恩,方学贤,闵军霞,王福俤. 铁稳态代谢表观遗传调控机制的研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2020, 49(1): 58-70.
[4] 宛昱君,刘君妍,王妤婷,成小雨,沙莎,贾婉莹,胡德邻,李昕宇,郭凤. 钙调蛋白及其突变体与电压门控钠离子通道1.2异亮氨酸-谷氨酰胺基序的结合作用[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2020, 49(1): 71-75.
[5] 杜啸添,欧阳宏伟. 组蛋白甲基化水平与骨关节炎病理发展的关联性[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2019, 48(6): 682-687.
[6] 殷一旋,朱晖,钱叶青,金晶磊,梅瑾,董旻岳. 2057名双胎妊娠孕妇无创产前筛查结果分析[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2019, 48(4): 403-408.
[7] 唐思阳,叶佳,李月舟. I1363T突变致人骨骼肌电压门控钠通道快失活受损的机制[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2019, 48(1): 12-18.
[8] 史婧,冯钰. 细菌RNA聚合酶抑制剂的分子生物学机制研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2019, 48(1): 44-49.
[9] 翁炳焕,徐威,苏岚,沈敏,李蓉,虞晓鹏,李兰娟. 脂质体介导SV40LT基因转染构建羊水染色体核型分析质控细胞系研究[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(5): 520-524.
[10] 胡争,马丁. 人乳头瘤病毒相关宫颈癌的精准筛查和治疗[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(4): 338-343.
[11] 赵锦,夏海雄,刘雨杰,RavinderPal,范安然,何志旭,曾令文. 采用等温链置换扩增结合纳米金测流层析试纸条检测登革热病毒[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(4): 405-412.
[12] 田广烽,高慧,胡莎莎,舒强. 遗传和表观遗传机制在先天性心脏病中的研究进展[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(3): 227-238.
[13] 杨静娟,吴峰峰,陈江华,杨毅. 脓毒性急性肾损伤小鼠线粒体DNA损伤修复相关基因的筛选[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(1): 41-50.
[14] 夏海雄,李莉,周艳华,任平平,何志旭,舒莉萍. g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(1): 57-63.
[15] 王佳静,谷海瀛. 幽门螺杆菌的基因分型技术及其应用[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2018, 47(1): 97-103.