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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2005, Vol. 34 Issue (2): 148-151    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.02.011
原著     
血管活性肠肽真核表达质粒的构建及鉴定
张松照;沈建根;廖志雄;潘建平
浙江大学免疫学研究所,浙江,杭州,310031;浙江大学医学院附属第二医院,浙江,杭州,310009;浙江大学免疫学研究所,浙江,杭州,310031
Construction of recombinant plasmid containing mouse vasoactive intestinal peptide gene and its expression in COS-7 cells
 全文: PDF(216 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:构建一种具有生物学活性的血管活性肠肽(VIP)的真核表达质粒.方法:利用RT-PCR从小鼠胸腺淋巴细胞中克隆有信号肽序列的VIP cDNA,插入真核表达载体pcDNA3.1,构建含VIP的重组质粒pcDNA3.1-VIP,转染COS-7细胞,用ELISA和Western blot鉴定表达的蛋白,细胞因子释放抑制法测定生物学活性.结果:经酶切和基因测序证实,克隆的基因片段为带有信号肽序列的VIP基因;经转染的COS-7细胞表达VIP蛋白,并能有效地抑制巨噬细胞的TNF-α释放.结论:成功构建了能够表达具有生物学活性的真核表达质粒pcDNA3.1-VIP.
关键词： 血管活性肠肽;  质粒;  克隆,分子;  基因表达    
出版日期: 2005-03-25
基金资助:

国家自然科学基金(30170874);浙江省教育厅资助项目(20040232)
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张松照
沈建根
廖志雄
潘建平

引用本文:

张松照;沈建根;廖志雄;潘建平. 血管活性肠肽真核表达质粒的构建及鉴定[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2005, 34(2): 148-151.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2005/V34/I2/148

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