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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2005, Vol. 34 Issue (2): 110-115    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.02.004
专题报道     
小干扰RNA体外抑制HBs-GFP融合基因的表达
羊正纲;陈智;倪勤;徐宁;潘修成;金晗英;李星仪
浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院临床医学系2000级,浙江,杭州,310003
Inhibition of HBs-GFP fusion gene expression by RNA interference
 全文: PDF(581 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:利用增强型绿荧光蛋白(EGFP)和小发夹RNA(shRNA)表达载体技术,建立一种行之有效且相对经济的验证siRNA的方法.方法:将HBV S基因融合到EGFP中,建立HBs-GFP融合基因表达载体;同时构建带U6+27 RNA转录启动子的shRNA表达载体pAVU6+4sh357.二载体共转染HepG2细胞后,流式细胞仪检测HBs-GFP蛋白的荧光强度;同时RT-PCR和实时定量PCR法检测HBs-GFP mRNA水平的改变.结果:小干扰RNA有效抑制目的基因的表达,共转染后第72 h荧光蛋白抑制率为55.4;;HBs-GFP 融合基因的RNA表达受到显著抑制,抑制率达到90;.结论:载体法表达的小干扰RNA体外显著抑制HBs-GFP融合基因的表达.
关键词： 肝炎病毒,乙型;  RNA/遗传学;  RNA干扰;  表面抗原;  绿荧光蛋白    
出版日期: 2005-03-25
基金资助:

国家自然科学基金(30371270);浙江省科技厅资助项目(2003C13015)
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羊正纲
陈智
倪勤
徐宁
潘修成
金晗英
李星仪

引用本文:

羊正纲;陈智;倪勤;徐宁;潘修成;金晗英;李星仪. 小干扰RNA体外抑制HBs-GFP融合基因的表达[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2005, 34(2): 110-115.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2005/V34/I2/110

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