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浙江大学学报（医学版）
浙江大学学报（医学版）  2005, Vol. 34 Issue (1): 15-20    DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.01.004
专题报道     
问号钩端螺旋体磷脂酶C的活性及其内化时细胞内游离Ca2+水平的变化
王焕萍;严杰;李立伟;毛亚飞;李淑萍;罗依惠
浙江大学医学院,病原生物学教研室,浙江,杭州,310031
Phospholipase C activity and alteration of intracellular free Ca2+levels during internalization of Leptospira interrogans
 全文: PDF(592 KB)   HTML ( ) 
摘要：

目的:了解不同毒力的钩端螺旋体(简称钩体)对细胞内游离Ca2+水平的影响及其磷脂酶C(PLC)活性与细胞内游离Ca2+水平的关系.方法:建立问号钩体Vero和J774A.1细胞感染模型.采用fluo-3/AM胞内Ca2+特异荧光标记激光共聚焦技术,检测强毒力的问号钩体黄疸出血群赖型56601株和弱毒力的波摩那群波摩那型56608株及无毒力的双曲钩体Patoc Ⅰ株作用的Vero和J774A.1细胞胞内游离Ca2+水平.以[3H]PIP2为底物,采用同位素法检测上述3株钩体培养物上清、胞浆和胞膜中PLC的活性.结果:正常Vero和J774A.1细胞胞内游离Ca2+基础值分别为(102.3±8.2);和(105.9±7.3);,在观察时间内Patoc Ⅰ株钩体作用细胞的荧光强度变化百分数一直波动于(102.3±8.2);～(102.2±8.3);.问号钩体56601株感染的Vero和J774A.1细胞胞内游离Ca2+浓度呈双峰型增高,第一峰荧光强度变化百分数分别为(430.5±35.7);和(747.5±18.5);,第二峰荧光强度变化百分数分别为(380.6±17.4);和(804.6±22.4);.问号钩体56608株感染Vero和J774A.1细胞,其胞内游离Ca2+浓度均呈缓慢的单一坡型升高,其最大荧光强度变化百分数分别为(235.0±19.3);和(402.4±17.4);,明显小于56601株问号钩体(P<0.01).问号钩体56601株和56608株及双曲钩体Patoc Ⅰ株的培养物上清、胞浆蛋白和胞膜蛋白成分中均显示PLC活性(P<0.05).结论:不同毒力的问号钩体所感染细胞的胞内游离Ca2+水平及其峰型有明显差异,而且与被感染细胞的种类有关,与PLC活性无关.
关键词： 钩端螺旋体,问号/致病力;  细胞黏附;  胞吞作用;  Vero细胞;  J774A.1细胞;  钙;  磷脂酶C     
出版日期: 2005-01-25
基金资助:

国家自然科学基金(30170049)
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王焕萍
严杰
李立伟
毛亚飞
李淑萍
罗依惠

引用本文:

王焕萍;严杰;李立伟;毛亚飞;李淑萍;罗依惠. 问号钩端螺旋体磷脂酶C的活性及其内化时细胞内游离Ca2+水平的变化[J]. 浙江大学学报（医学版）, 2005, 34(1): 15-20.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/med/CN/Y2005/V34/I1/15

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