目的:研究氨氯地平经人肝细胞色素P450 3A4(CYP3A4)的代谢,建立反相高效液相色谱的测定人肝转基因细胞CYP3A4酶S9孵育液中氨氯地平浓度的方法.方法:与人肝转基因细胞提取的S9上清液孵育之后的样品,用3倍量的甲醇沉淀后离心,取上清液用0.45 μm微孔滤膜滤过后进样.采用Hypersil C18柱,以乙腈-磷酸盐缓冲液(45∶55,v/v,pH 4.5)为流动相,普萘洛尔为内标,在250 nm波长处测定.结果:氨氯地平浓度在0.2～30.0 μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9993,方法平均回收率为(98.2±2.4);(n=5),日内和日间相对标准偏差(RSD)均小于10;,检测限为20 ng/ml,定量限为0.2 μg/ml(回收率为104.0;,RSD为11.4;,n=5).结论:建立的反相高效液相色谱方法简便、准确,可用于研究氨氯地平在人肝CYP3A4转基因细胞中的代谢.