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浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大学学报(农业与生命科学版)  2001, Vol. 27 Issue (5): 531-534    
论文     
缺失GDD保守区的黄瓜花叶病毒复制酶基因的克隆及植物表达载体构建
温瑞　 郑重　 周雪平
温瑞（浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029）　　　　　　
郑重（浙江大学,植物保护系,浙江,杭州,310029）　　　　　　
周雪平（浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029
 全文: PDF(252 KB)  
摘要： 以CMV亚组1株系Fny-CMV RNA2基因组为模板,根据其序列设计引物进行PCR扩增,得到2.5 kb的全长复制酶基因扩增产物.对此产物进行纯化,并用NcoI和BspHI进行双酶切,得到3个片段,将不含有GDD保守区的2个片段用T4 DNA连接酶连接,并对连接产物进行PCR扩增,得到2.2kb左右缺失GDD保守区的黄瓜花叶病毒复制酶基因的扩增产物.将其克隆到pGEM-T Easy Vector上,进行序列测定,结果表明GDD保守区确已缺失.该缺失不导致开放阅读框架的移码将缺失GID保守区的基因定向克隆到植物表达载体pBI121中,并经三亲交配导入根癌农杆菌中,经PCR及酶切鉴定,证实质粒已被导入.
出版日期: 2001-09-10
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温瑞　 郑重　 周雪平. 缺失GDD保守区的黄瓜花叶病毒复制酶基因的克隆及植物表达载体构建[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2001, 27(5): 531-534.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2001/V27/I5/531

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