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浙江大学学报(农业与生命科学版)  2006, Vol. 32 Issue (5): 483-488    
论文     
体外重折叠核糖核酸酶A及其荧光结构表征
谭培生  罗曼  盛清  关怡新  姚善泾
谭培生(浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027)      
罗曼(浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027)      
盛清(浙江理工大学,生命科学学院,浙江,杭州,310018)      
关怡新(浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027)      
姚善泾(浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027)
 全文: PDF(470 KB)  
摘要: 核糖核酸酶A(RNase A)作为蛋白质体外重折叠研究的模型蛋白,考察了稀释复性过程中脲浓度、稀释倍数、氧化还原环境(GSH浓度和GSH/GSSG比例)、pH值、温度以及聚集抑制剂的添加对该酶活性回收率的影响.在变性蛋白浓度为100 μg·mL-1,复性液含有2 mol·L-1脲,GSH浓度2 mmol·L-1,GSH/GSSG比为4:1,pH8.0,并添加终浓0.1%的PEG,转速为150 r·min-1,温度37℃的条件下复性,RNase A的活力回收率可达70%以上.利用荧光分析法对RNase A复性过程的结构变化进行了表征,在此基础上对RNase A体外重折叠过程蛋白质分子的构象变化以及活性中心的形成过程进行了阐述.
出版日期: 2006-09-27
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引用本文:

谭培生  罗曼  盛清  关怡新  姚善泾. 体外重折叠核糖核酸酶A及其荧光结构表征[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2006, 32(5): 483-488.

链接本文:

https://www.zjujournals.com/agr/CN/Y2006/V32/I5/483

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