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(双月刊 1956年创刊)
主管:教育部
主办:浙江大学
主编:张国平
出版:浙江大学出版社
刊号:ISSN 1008-9209 CN 33-1247/S
邮发:国内 32-48 国外 BM4108
电话:0571-88272801
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当期目录

2012年, 第6期 刊出日期:2012-11-20 上一期    下一期
生物科学与技术
抗除草剂转基因水稻和大豆快速准确检测技术研究   收藏
马林1, 周练1, 周正剑1, 唐桂香2, 沈志成2, 寿惠霞1
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 647-654.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2011.10.241
摘要( 1879 )     PDF(3066KB)( 2260 )
以实验室培育的转基因水稻和大豆为研究材料,对含草铵膦乙酰转移酶基因(phosphinothricin acetyl transferase gene, bar) 和不与草甘膦结合的突变型5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶编码基因 (5-enolpyruvylshi- kimate-3-phosate synthase gene, EPSPS) 2种不同除草剂筛选标记的转基因植株进行叶片喷涂、叶片离体平板培养、种子萌发试验,以建立快速、准确的转基因鉴定方法,并探索可有效区分转化和非转化植株鉴定用的筛选剂剂量. 结果表明:这3种方法都能快速、简便、准确地鉴定相应的转基因植株;水稻和大豆叶片对农药吸收具有一定的差异,用300或135 mg/L草铵膦可有效区分是否转入bar基因,用1 %或0.25 %农达喷施可区分是否转入EPSPS基因;用含有50 mg/L草甘膦的平板培养离体大豆叶片可以方便地区分出转基因株系;种子萌发对除草剂剂量十分敏感,用远低于10 mg/L的2种除草剂即可有效区分阳性与阴性种子. 本研究建立的快速鉴定转基因植株的方法在转基因研究材料的鉴定及转基因安全评估中具有重要意义.
全文
2012年第6期   收藏
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 647-764.  
摘要( 606 )     PDF(10252KB)( 2432 )
生物科学与技术
烟草MITE位点间多态性 (IMP) 标记开发及其遗传作图应用   收藏
高玉龙1, 桂毅杰2, 肖炳光1,薄世平2, 严广号2, 樊龙江2
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 655-661.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.01.221
摘要( 1878 )     PDF(901KB)( 1446 )
为在烟草 (Nicotiana tabacum) 上进行IMP (inter-MITE polymorphism, MITE位点间多态性) 标记开发,利用美国烟草基因组测序数据和MITE (miniature inverted repeat transposable element,微型反向重复转座元件) 结构特征,通过生物信息学方法获得11 581组具有特异TIR (terminal inverted repeat,末端重复元件) 序列的MITE及其多序列联配结果,并根据联配结果设计219条烟草IMP引物;利用9个不同类型烟草代表性品种进行测试,其中119条引物PCR扩增成功,引物开发成功率为54.6 %;进一步对一个烤烟遗传群体亲本‘红花大金元’和Hicks Broadleaf’进行标记筛选,共获得29个多态性标记,群体检测表明有21个标记可以整合定位到一个SSR标记遗传连锁图上. 说明IMP标记在烟草中是一种可以利用的分子标记,但跟其他标记一样表现出较低的多态性,需高通量检测平台与之配套来提高其开发效率.
Bacillus sp. C3细胞色素P450 CYP102A16酶活性研究   收藏
李泽莉1, 丁海涛2, 杨玉义2, 陈雪娇2, 赵宇华2,周启发1
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 662-668.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.01.061
摘要( 1450 )     PDF(512KB)( 1300 )
通过异源表达及Ni-NTA亲和层析纯化获得重组Bacillus sp. C3细胞色素P450 CYP102A16蛋白;以 CYP102A16纯酶为研究对象,系统研究温度、pH、有机溶剂、表面活性剂、金属和非金属离子等对该酶活性及其稳定性的影响;用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH) 消减法测定CYP102A16的酶活性. 结果表明:CYP102A16的最适反应温度为35 °C,最适反应pH为6.5~7.5,该酶在45 °C以下、pH 5.0~10.0的范围内稳定;CYP102A16能完全耐受20 %二甲基亚砜 (dimethylsulfoxide, DMSO)、30 %甲醇、10 %乙醇和20 %丙酮,经10 %乙腈、正丙醇和异丙醇处理后残余酶活性在45 %以上,经10 %正丁醇处理几乎失活;添加低质量浓度氯代十六烷基吡啶 (cetylpyridine chloride, CPC) (0.003~0.02 g/L) 和聚乙二醇辛基苯基醚 (Triton X-100) (0.1~0.2 g/L) 可使CYP102A16酶活性分别提高40 %和60 %左右,而添加低质量浓度十二烷基硫酸钠 (sodium dodecyl sulphate, SDS) (0.004~0.008 g/L) 对该酶活性无显著影响;1~20 mmol/L K+、20~50 mmol/L Na+、0.05 mmol/L Cd2+对CYP102A16酶活性表现出轻微的促进效应,NH4+、Ca2+、Mg2+、Fe3+、Co2+、Mn2+、Zn2+、Cu2+和乙二胺四乙酸 (ethylene diamine tetraacetic acid, EDTA) 均能不同程度地抑制CYP102A16的活性,在离子浓度为1~100 mmol/L时抑制效应表现为Ca2+ > Mg2+ > NH4+ > EDTA,抑制作用的大小总体上与离子浓度呈正相关
巨大芽孢杆菌MBFF6产絮凝剂培养条件的优化及絮凝剂的化学性质   收藏
曹芳,余秀梅,郭娟利,杨晓尧,潘康成
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 669-674.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.01.041
摘要( 1608 )     PDF(524KB)( 979 )
采用单因子试验,分别考察培养时间、碳源、氮源、碳氮浓度比、pH值、金属离子、培养温度和接种量对巨大芽孢杆菌MBFF6产絮凝剂的影响,同时对絮凝剂的热稳定性和化学性质进行研究. 结果表明:巨大芽孢杆菌MBFF6产絮凝剂的最佳培养基组成为葡萄糖5 g/L,(NH4)2SO4 0.5 g/L,K2HPO4 5 g/L,KH2PO4 2 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,初始pH 7;最佳培养条件为φ(接种量) = 2 %,温度30 °C,转速150 r/min,时间24 h;该絮凝剂具有良好的热稳定性;经化学反应分析,定性的判断出该絮凝剂的有效成分是多糖和蛋白质;经红外光谱分析,该絮凝剂分子结构中有羟基、氨基、羰基和甲氧基. 表明该絮凝剂产生菌MBFF6具有营养要求简单、发酵周期短和絮凝活性高的优点,是一株很有应用前景的絮凝剂产生菌.
感染肺炎链球菌的猕猴消化系统分泌型免疫球蛋白A的表达   收藏
陈恋1, 罗启慧1, 2, 章瑶1, 陈正礼1, 2,程安春1, 2, 3, 曾文2
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 675-683.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.01.121
摘要( 1236 )     PDF(3616KB)( 903 )
采用免疫组织化学和原位杂交方法检测分泌型免疫球蛋白A (SIgA) 在自发性感染肺炎链球菌的猕猴胃肠道以及肝脏、食管的表达变化,通过测定光密度值和表达面积比较感染前后的分泌变化,探讨SIgA在肺炎链球菌发病机制中的作用以及自发性肺炎链球菌性肺炎的病理特点. 免疫组化结果显示,和健康组比较,SIgA在感染组的光密度值以及表达面积在各组织中均有下降趋势,其中在空肠阳性细胞的表达面积下降显著 (P < 0.05);原位杂交结果和免疫组化结果基本一致,感染组各组织阳性细胞表达面积均较健康组减少,其中空肠、盲肠以及胃组织差异显著 (P < 0.05),感染组光密度值较健康组高,但差异均不显著 (P > 0.05). 阳性细胞的分布多集中于各胃肠段和食管的黏膜层,血管中可见较多阳性细胞,而肝脏中的阳性细胞多呈散在分布. 其中,阳性细胞主要包括胃肠道黏膜层的淋巴细胞和肝细胞、血管内细胞以及炎性浸润细胞,部分腺体细胞、上皮细胞和食管黏膜层未角化上皮细胞也有阳性反应. 上述结果表明,SIgA可通过以体液免疫为主的免疫机制帮助机体清除肺炎链球菌;SIgA作为黏膜免疫系统中重要的抗体分子在感染组组织中表达水平的降低可能是导致肺炎链球菌入侵机体从而引起感染的一个因素.
百山祖常绿阔叶林木本植物的克隆繁殖特性   收藏
陈娇1, 王伟2, 叶珍林3, 陈晓慧1, 蒋清玲1, 丁炳扬1
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 684-692.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.05.061
摘要( 1382 )     PDF(540KB)( 820 )
通过调查百山祖自然保护区动态样地内所有乔木和胸径≥ 1 cm或高度≥ 2 m灌木的母株产生根蘖的情况,分析不同生活型层次和不同物种的根蘖能力差异、根蘖率与母株胸径的关系以及根蘖率与生境的相关性. 结果表明:样地母株总数36 769株,根蘖总数34 786株,整个样地的根蘖率为0.94;该样地5种生活型物种的根蘖率存在差异,呈现冠层乔木>亚层乔木>小乔木>灌木>藤本;全部物种整体根蘖率和6个主要物种的根蘖率都随母株胸径增大呈先增加后下降的趋势,最大峰值均出现在略大于母株胸径区间的中间值处;样地沟谷、陡坡、缓坡、山脊4种生境的根蘖数、母株数、母株密度、根蘖密度、根蘖率存在差异,其中母株密度和根蘖率均呈现山脊>缓坡>陡坡>沟谷. 此结果反映出样地总体根蘖率较高,克隆繁殖是该群落木本植物的重要繁殖方式;冠层乔木、亚层乔木和小乔木的优势种、亚优势种的根蘖率普遍较高,表明克隆繁殖在群落结构形成中发挥着重要作用;物种在母株胸径与根蘖率方面呈现的一致性反映出根蘖的生长和定居在一定程度上依赖于母株的资源供给;根蘖率与生境的关系符合克隆植物基株的风险分摊原理.
恩诺沙星纳米乳的制备及其质量评价   收藏
杨雪峰,齐永华, 宁红梅, 王清华
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 693-699.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.01.051
摘要( 1808 )     PDF(1052KB)( 1614 )
为制备恩诺沙星纳米乳,首先通过滴定法绘制伪三元相图,研究不同表面活性剂、助表面活性剂、表面活性剂和助表面活性剂质量比 (Km) 形成纳米乳的区域,筛选出最佳制备处方,并对制备的恩诺沙星纳米乳进行质量评价. 结果表明:最佳的纳米乳处方为肉豆蔻酸异丙酯 (IPM)、聚氧乙烯蓖麻油-40 (EL-40)、乙酸 (HAc) 和水,其中Km为3∶2,各成分的质量分数为恩诺沙星15 %,IPM 3 %,EL-40和HAc 48 %,蒸馏水34 %;所制备的恩诺沙星纳米乳为O/W型,澄明均一,平均粒径为 (22.45 ± 2.92) nm,粒径呈正态分布,pH 4.36;该纳米乳对大肠杆菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923的最小抑菌浓度 (MIC) 均为其原料药MIC的1/2;在离心试验和温度试验条件下,未见乳液分层、破乳和药物析出现象. 结果显示,恩诺沙星纳米乳制备工艺简单、溶解度高、抗菌活性强、稳定性好.
农业科学
水稻根系生长对弱光胁迫的响应   收藏
王丽1,2, 邓飞1,2, 郑军1, 赵柳1, 任万军1,2, 杨文钰1,2
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 700-708.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.01.091
摘要( 1749 )     PDF(521KB)( 919 )
通过盆栽控光试验,研究不同生育阶段遮荫对冈优906根系生长的影响以及不同品种对弱光胁迫的响应. 结果表明:抽穗前遮荫处理,随遮荫程度加重,冈优906根系体积、总吸收面积和活跃吸收面积均有所降低,根系生长受到抑制;始穗后轻度遮荫处理 (遮53 %光强),其根系体积、总吸收面积、活跃吸收面积和根冠比增加,根系生长得以促进,衰老延迟;始穗后重度遮荫 (遮73 %光强) 则不利于其根系正常生长,根系体积、总吸收面积、活跃吸收面积和根系α-萘胺氧化力降低. 不同品种根系生长对弱光的反应不同:冈优906耐荫性较强,有较高的根系α-萘胺氧化力和活跃吸收面积;耐荫性较弱的Ⅱ优498则表现为根系α-萘胺氧化力和活跃吸收面积的较大幅度减少. 灰色关联度分析表明,根系α-萘胺氧化力和活跃吸收面积可以作为耐荫性敏感鉴定的有效指标.
喷施6-糠氨基嘌呤对铝胁迫大麦幼苗的缓解效应   收藏
郭天荣*, 潘伟槐
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 709-714.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.04.233
摘要( 1629 )     PDF(432KB)( 756 )
采用营养液培养试验,研究叶面喷施不同浓度6-糠氨基嘌呤 (6-KT) (100、200、400和800 μmol/L) 对铝胁迫大麦幼苗生长、叶片叶绿素含量、游离脯氨酸含量、活性氧清除酶活性的影响. 结果表明:与单独铝胁迫相比,喷施100~400 μmol/L 6-KT 可改善大麦幼苗生长,提高叶绿素含量,降低叶片丙二醛 (malondialdehyde, MDA) 和脯氨酸含量,降低叶片过氧化物酶 (peroxidase, POD) 和超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD) 活性;喷施200和400 μmol/L 6-KT亦可降低过氧化氢酶 (catalase, CAT) 活性;当喷施200 μmol/L 6-KT时各指标的增幅最大,与对照组值最接近,但当喷施浓度为800 μmol/L时植株生物量、叶绿素含量下降,而MDA、脯氨酸含量和抗氧化酶活性上升. 表明适宜浓度的外源6-KT可有效缓解大麦由于铝毒害引发的生长抑制和氧化胁迫,但浓度过高则产生氧化作用.
食品科学
不同成熟度草莓鲜榨果汁的电子鼻和电子舌检测   收藏
高利萍, 王俊*, 崔绍庆
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 715-724.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2012.04.232
摘要( 1814 )     PDF(735KB)( 1439 )
采用电子鼻和电子舌,通过主成分分析 (principal component analysis, PCA)、线性判别分析 (linear discriminant analysis, LDA) 对不同成熟度草莓鲜榨果汁的风味品质进行检测区分,并通过偏最小二乘回归分析 (partial least squares, PLS) 建立电子鼻和电子舌传感器响应信号与草莓鲜榨汁理化指标之间的关系,定量预测草莓的品质指标. 结果表明:PCA和LDA法均对不同成熟度草莓鲜榨汁的区分效果较好,且电子舌的区分效果好于电子鼻,电子鼻和电子舌传感器响应信号融合后的区分效果与电子舌相当;通过PLS法,电子舌传感器响应信号能够较好地预测不同成熟度草莓鲜榨汁的可溶性固形物含量、Vc含量和pH值,但对总酸含量的预测能力稍差,其校正决定系数R2为0.876,预测决定系数R2为0.793;电子鼻和电子舌传感器响应信号融合后能够很好地预测不同成熟度草莓鲜榨汁的可溶性固形物、Vc和总酸含量及pH值,其预测能力好于单一的电子鼻或电子舌,其中对于电子舌不能很好预测的总酸含量其校正决定系数和预测决定系数分别上升为0.965和0.908. 表明采用上述方法能对样品进行较好地区分且能对样品的品质指标进行较好地预测,其中电子鼻和电子舌信号融合对样品的区分能力和预测能力增强,验证了电子鼻和电子舌结合是对样品气味和味道的综合信息进行评价.
资源与环境科学
铜绿假单胞菌M2联合小白菜对Pb污染土壤的生物修复   收藏
陈宝1,2, 徐晓萌2, 曲娟娟1*, 董蕾1, 闫立龙1, 孙兴滨3
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 732-740.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2011.10.081
摘要( 1334 )     PDF(1015KB)( 858 )
从Pb污染矿区筛选到1株铜绿假单胞菌 (Pseudomonas aeruginosa) (M2),采用盆栽试验研究其对Pb污染土壤中小白菜生长、Pb吸收和根际微生物的影响. 结果表明:接种M2菌后小白菜生物量提高20.9 %~31.3 %,地上部Pb含量提高15.0 %~25.4 %,根部Pb含量提高15.6 %~36.8 %;对可培养微生物数量的测定表明,在同样的Pb污染浓度下,接种铜绿假单胞菌的土壤中细菌和真菌数量明显提高,细菌提高17.8 %~29.6 %,真菌提高7.2 %~15.4 %,而放线菌提高不明显;细菌16S rDNA的变性梯度凝胶电泳分析表明,接种铜绿假单胞菌的土壤细菌种类比对照土壤多50.0 %~60.0 %. 结果证明,接种铜绿假单胞菌能够促进小白菜生长,维持土壤细菌多样性,对土壤Pb污染的植物修复有明显的促进作用.
F对厌氧颗粒污泥的产甲烷毒性及降解性能的影响   收藏
徐丽丽1, 赵芝清1,2, 沈晓莉2, 方苗苗2, 竺立3, 傅柳松1
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 741-746.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2011.11.281
摘要( 1332 )     PDF(481KB)( 1127 )
采用厌氧毒性试验 (anaerobic toxicity assay, ATA) 研究F对厌氧颗粒污泥的产甲烷毒性. 结果表明:当F质量浓度为25 mg/L时,产甲烷过程几乎不受影响;当F质量浓度由25 mg/L上升至100 mg/L时,产甲烷量96 mL降至64 mL;当F质量浓度由100 mg/L上升至400 mg/L时,产甲烷量仅由64 mL降至60 mL. 随之2次连续投加F的试验结果表明:当F质量浓度为25 mg/L时,甲烷化过程仍然保持与对照相当的活性;当F质量浓度为100~400 mg/L时,甲烷化过程则受到了更为严重的抑制. 恢复试验结果表明:当F质量浓度为25和100~400 mg/L时,F分别属于代谢毒素和生理毒素. 此外,蔗糖基质的降解性随着F质量浓度的增加而降低.
基于粗糙集和证据理论的水质分析预警技术研究   收藏
朱琼瑶, 张光新,冯天恒, 黄平捷, 侯迪波
浙江大学学报(农业与生命科学版). 2012 (6): 747-754.   DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2011.11.141
摘要( 1553 )     PDF(522KB)( 820 )
针对水质检测监测和信息管理系统中监测指标种类较多、水质指标之间往往存在内在关联、水质变化规律隐含较深、水质分析预警准确度难以保证的问题,研究和分析了粗糙集和Dempster-Shafer (D-S) 证据理论,提出了基于粗糙集和D-S证据理论联合应用的水质预警算法. 结果表明:该方法降低了实际工作中存在的水质历史数 据缺失、冲突和冗余问题以及数据量偏少对分析预警结果的影响,有效减少了预警分析的计算量;通过实际数据,以高锰酸盐指数 (CODMn) 指标分析预测为例,对比分析了单属性拟合预测、基于粗糙集理论的趋势预测、粗糙集和D-S证据理论联合分析预测3种方法的优点和不足,验证了本研究方法是有效的.