根据传染性法氏囊病病毒( IBDV) HZ２ 株VP２ 基因序列设计１ 对引物,将该基因成功克隆到真核表达载体pDsRed２‐N１ 中,构建重组质粒pDsRed２‐N１‐VP２(简称PVP２) ;以PVP２ 作为过渡载体,运用PCR 定点突变技术,对第２７９ 位点和第２８４ 位点的氨基酸残基分别或同时进行突变,共构建P２７９ 、P２８４ 和PDA ３ 株突变体;在此基础上构建能稳定表达HZ２ 株IBDV 及其突变体VP２ 蛋白的Vero 细胞系,间接免疫荧光试验检测表明,Vero 细胞系中IBDV VP２ 蛋白已成功表达.这为进一步深入研究IBDV 毒力及抗原变异致病机制奠定了基础;此外,利用定点突变技术改造VP２ 蛋白,建立不同毒力的突变体,在探求高效、廉价的IBDV DNA 疫苗上也有广阔的应用前景和重要意义.

对豌豆表达序列标签‐微卫星(EST‐SSR)分子标记在蚕豆中的通用性与应用进行研究,以期为蚕豆开发出新的分子标记.结果表明:１６３对豌豆EST‐SSR 引物中有９９对可在蚕豆中获得有效扩增,其中３６对引物呈现明显的多态性,共检测到等位位点１４８个,平均每个位点的等位基因变异数为４.１个;各多态性引物的多态信息量(PIC)值变化范围为０.０３５到０.８１０ ,平均PIC 值为为０畅４８３４ ;实际观察杂合度( HO )变化范围为０.０００１到０.７００ ０ ,平均值为０.２１０３ ;期望杂合度( HE )变化范围为０.０３５７到０.８４５２ ,平均值为０.５３８８ ;主成分分析与非加权配对算术平均法(UPGMA)聚类分析表明,３０份蚕豆种质资源可明显分成２大类群.以上结果表明,本研究所开发的豌豆EST‐SSR标记在蚕豆上具有通用性和多态性,可为今后蚕豆遗传多样性、种质资源保存、比较作图和分子标记辅助育种提供新的研究依据.

单核苷酸多态性(SNP)是指在基因组水平上由单核苷酸的变异所引起的一种DNA 序列多态性.在人、拟南芥、水稻等二倍体生物中,已经开发出大量的SNP 标记并被用于群体结构分析、关联作图等研究,而在棉花、油菜、小麦等多倍体植物中,SNP 的开发与应用却进展迟缓.为促进多倍体植物中SNP 的开发,本文对多倍体植物中SNP 标记开发所遇到的难题进行了阐述,并对多倍体中SNP 标记开发方法进行了梳理,包括位点特异性引物的PCR 片段直接测序,利用多倍体的近缘二倍体区分SNPs和部分同源序列间的差异( homoeologous sequence variants , HSVs) ,利用２代测序技术大规模发掘SNPs ,基于公共数据库的序列通过生物信息学分析获取候选SNPs ,通过遗传(分离)模式的研究验证SNPs 等.利用上述方法可实现多倍体植物中SNP 标记的大规模开发

以４９个神经元的三维坐标为基础数据,选取并计算出１６个神经元的形态参数,然后对１６个参数进行因子分析,选取出表征神经元大小、发散程度以及生长发育特征的３个特征因子,采用ward 法对样本主因子进行系统聚类分析,从而对样本进行形态分类.结果表明:欧式距离为１.５左右时,研究样本可以分为运动神经元、双极中间神经元与锥体神经元、多级中间与三级中间神经元、感觉神经元以及普肯野神经元５类;神经元所处的发育程度对三级、多级与感觉神经元形态学分类有一定的干扰,因此,在形态学分类过程中,应使用发育成熟的神经元,避免造成干扰.

为了研究鸡冠花品种间耐热性差异的光合生理机制,选用耐热品种?世纪绿叶"和热敏品种?世纪铜叶"进行高温胁迫处理,从气体交换参数、叶绿体各成分含量、叶片对光能的吸收利用及能量分配等方面进行分析.结果表明:高温下生长的?世纪绿叶"叶绿素a 含量较高,增加了用于光化学的能量,同时非光化学猝灭(NPQ)中状态转换猝灭(qT)的成分较多,能够帮助及时耗散过剩光能,因此没有发生光抑制现象,其净光合速率(Pn)也较高;?世纪铜叶"具有较强的耐受高光强能力,但在高温下,其光合作用因非气孔因素导致下降而发生光抑制,这与高温导致其对光能的利用减少,产生了过多的激发能有关,同时,?世纪铜叶"叶绿素a 含量较少,能态猝灭(qE)和qT 含量较小而光抑制和光损伤猝灭(qI)比例较大,不能及时耗散过剩光能,因此对高温敏感.

以３个蝴蝶兰品种(系) (耐冷品种'婚宴',不耐冷品种'聚宝',中等耐冷性新品系'ZD‐１')为试验材料,经预处理后,测定各材料在低温(１０ ℃ 、５ ℃ 和０ ℃ )下处理１２ 、２４ 和４８h 后叶片相对电导率、叶片中可溶性糖和丙二醛(MDA)含量以及过氧化氢酶(CAT) 、超氧化物歧化酶(SOD)与抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性.结果表明:随着胁迫程度的加深,蝴蝶兰叶片的相对电导率和MDA 含量逐渐增加,可作为蝴蝶兰耐冷性的鉴定指标;可溶性糖含量的变化无明显规律;CAT 和SOD 酶活性随着胁迫程度的加深先增大后减小;APX 活性则呈持续增加趋势,也可作为蝴蝶兰耐冷性的鉴定指标;耐冷性品种'婚宴'在一定程度低温胁迫条件下能通过自身酶系统的保护,减少活性氧对其的伤害,而不耐冷品种
聚宝'的自身酶系统的保护能力较差.

用木质素降解菌１６‐２发酵麦麸制取膳食纤维,以总膳食纤维含量作为指标,确定最佳的发酵条件,并对最佳发酵条件下获取的膳食纤维制品的物化特性进行研究.结果表明:最佳的发酵条件为pH 值６.０ ,发酵温度２８ ℃ ,发酵时间７２h ;在最优发酵条件下获得的产品的总膳食纤维( TDF) 为８２.４１％ ,不溶性膳食纤维(IDF)为５５.１２ ％ ,可溶性膳食纤维(SDF)为２７.６０％ ;膳食纤维的溶胀性和持水力分别为０ mL.g ^{－ １} 和４.２ g. g^{－ １} ;其纤维素、木质素、粗蛋白、灰分质量分数分别为３０.１２％ 、１８.２８％ 、７.３９％ 和１５.０４％ ;获得的膳食纤维对重金属离子Cd２ ＋ 、Pb２ ＋ 和Cu２ ＋ 的最大束缚量分别为６６.９ 、２４９.６和１５.９ μmol.g^{－ １} ,对H_２ O_２ 的清除率为２３.１％ .由此可见,利用微生物发酵法所制得的麦麸膳食纤维的持水力和生理活性较好.

为研究甘肃棘豆( Oxytropis kansuensis Bunge)中降解疯草毒素——— 苦马豆素的内生细菌,采用选择性富集培养的方法,以苦马豆素作为唯一碳源,从甘肃棘豆内生细菌中筛选到１株苦马豆素降解菌,命名为Ab .在摇床转速为１５０r.min－ １ 、２８ ℃ 条件下培养３０h ,菌株Ab 对质量浓度为１００ mg.L － １苦马豆素的降解率为１１.５７７ １％ ;延长培养时间并不能提高其降解苦马豆素的能力,但可耐受高质量浓度(１ g.L －１)的苦马豆素.通过形态学、生理生化试验和１６S rDNA 序列比对分析对Ab 进行鉴定,结果表明,菌株Ab 为革兰阴性短小杆菌,在LB 平板上菌落呈圆形,中心凸起,边缘整齐,乳白色,表面光滑,属于短波单胞杆菌属( Brevundimonas) ,与缺陷短波单胞菌( Brevundimonas diminuta)同源性为１００％ .说明甘肃棘豆中存在降解苦马豆素的内生细菌Brevundimonas diminuta Ab ;降解苦马豆素的内生细菌可能与产生苦马豆素的内生真菌共同维持疯草中苦马豆素的动态平衡.

为了节省香菇生产对木屑资源的消耗,充分利用资源丰富的玉米秸秆,以玉米秸秆粉为主料,栎木屑和麦麸为辅料,采用有限制的配方均匀设计对其组合进行优化,并测定培养料中C 、N 含量及C/N 比,香菇必需氨基酸(EAA)含量和营养指数(NI)等５个指标.结果表明:玉米秸秆粉质量分数与香菇的EAA 含量、NI 存在显著负相关关系,栎木屑质量分数与香菇的EAA 含量、NI 存在显著正相关关系;培养料中的C 、N 含量和C/N 与EAA 存在显著的回归关系,与NI 间存在显著相关关系和回归方程,当玉米秸秆粉质量分数低于０.７４５０ ,栎木屑质量分数不低于０.１１６４时,不会对EAA 含量和NI 造成显著影响.说明玉米秸秆代料培养是可行的,有重要的经济价值和社会价值.

以百山祖常绿阔叶林为研究对象,用种子雨收集器收集森林凋落物,对收集到的凋落物进行分类、鉴定、称量,研究百山祖常绿阔叶林的凋落量及其组成和叶凋落物的季节动态.结果表明:１)百山祖常绿阔叶林２００９年的凋落量为为４２４７.４７kg.hm^{－ ２} .a^{－ １},其中叶凋落量最多,占７１.５４％ (常绿树叶５１.３４％ ,落叶树叶２０.２０％ ) ,树皮和枝条占３.１７％ ,繁殖器官占１９畅２９％ ,杂物占６.００％ ;２)９ 个优势种均具有明显的叶凋落节律,根据其特征可分为３ 类:仅在秋冬出现凋落高峰的落叶树;仅在夏季出现高峰的常绿树;在夏季和秋冬均出现高峰的常绿树;３) 与同纬度的常绿阔叶林样地相比,百山祖常绿阔叶林的凋落量较少,这是对一定地带性环境的综合反映;４)叶凋落高峰受花期、果期的影响,同时也受台风天气的影响.

以辽宁地区主栽玉米品种沈玉２１号、东单９０号为试验材料,通过设置６个不同水平的镁肥用量(A_１ :０ kg。hm ^{－ ２} 、A_２ :２２.５ kg.hm^{－ ２} 、A_３ :４５ kg.hm^{－ ２} 、A_４ :６７.５ kg.hm ^{－ ２} 、A_５ :９０ kg.hm^{－ ２} 、A_６ :１１２.５kg.hm ^{－ ２} ) ,测定穗位叶片ABS/RC 、ET_０ /RC 、TR_０ /RC 、M_０ 、Sm 、φE_０ 等叶绿素荧光参数,研究不同镁肥用量对玉米光系统Ⅱ (photosystem Ⅱ , PS Ⅱ )荧光特性的影响.结果表明:与不施镁对照相比,沈玉２１号施镁４５ ～ ６７.５ kg.hm－ ２ ,叶片光系统Ⅱ 荧光参数值显著或极显著提高,镁肥施用量超过６７.５ kg.hm－ ２ 的处理(A_５ 和A_６ )除对_φE_０ 外的所有参数无提高作用,甚至显著地降低;而东单９０ 号施镁６７.５ ～９０ kg.hm ^{－ ２ ,}叶片光系统Ⅱ 荧光参数值显著或极显著提高,镁肥施用量低于６７.５ kg.hm－ ２ 的处理对除TR_０ /RC 外的所有参数无提高作用.综上,沈玉２１ 号的镁肥施用量为４５ ～ ６７.５ kg.hm^{－ ２} 、东单９０ 号的镁肥施用量为６７.５ ～ ９０ kg.hm ^{－ ２} 可以提高光系统Ⅱ 的线性电子传递效率,增加光合同化力,提高光能利用效率.

通过盆栽试验,研究使用基于辅酶Q１０发酵液制成的有机液肥对小白菜( Brassica campestris )生长和土壤酶活性的影响.结果表明:施用有机液肥能显著提高小白菜叶绿素含量、硝酸还原酶活性及根系活力,降低硝酸盐含量;施用有机液肥能够提高小白菜生物量,与对照相比增加２.０７％ ～ １４.５８％ ,其中喷施方式以喷施３００ 倍稀释液的效果较好;相关性分析表明,小白菜的生物量及养分含量与其叶绿素含量及根系活力生理指标呈显著或极显著正相关;以浇施方式进入土壤的有机液肥,能够显著提高土壤脲酶、过氧化氢酶、蔗糖酶活性,从而提高土壤有效养分含量和肥料利用率,对作物生长有积极作用.

为调整浙江省水蜜桃品种结构、延长供应期,并利于产地合理选择适宜品种,以浙江２个主栽品种黄肉桃'锦绣黄桃'和白肉桃'奉化玉露'为对照,对比研究４个日本引进品种'清水白桃'、'秋白桃'、'新川中岛白桃'和'黄金桃'以及２个国内品种'秋玉露'和'徐蜜'果实单果质量、果实大小、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸、还原性糖、有机酸、主要香气组分及其含量等生理指标,并结合品种生物学特性作出评价.结果表明:黄肉桃品种'黄金桃'风味品质优于对照品种'锦绣黄桃',其可溶性固形物含量高,可滴定酸含量低,总香气组分含量高,但个别年份始花期可能会遭遇晚霜冻;３个日本白肉桃品种的果实大小、固酸比和贮藏性显著优于对照品种'奉化玉露',特别是'清水白桃'香气最浓;２个国产品种'徐蜜'和;秋玉露'除果实大小和贮藏性优于'奉化玉露'外,其他风味品质无显著差异,而'徐蜜'质地不够细腻.

通过测定草鱼( Ctenopharyngodon idella)食用鱼不同颜色肝脏的水分和粗脂肪含量,并运用冰冻组织切片油红O 染色技术对肝细胞进行染色,观察肝细胞脂肪滴的变化,利用Image‐pro plus ６.０ 软件测定其阳性面积率,判断不同颜色肝脏的草鱼食用鱼脂肪肝程度.结果表明:与草鱼正常肝相比,花肝、发白肝和发黄肝的水分含量分别降低６.３０％ 、１０.０１％和１４.１７％ ( P ＜０.０５) ,粗脂肪含量分别升高１９８.２５％ 、３３１.００％ 和４８５.５９％ ( P＜０.０５) ;参照人肝细胞脂肪变性级别的判断标准,正常肝、花肝、发白肝和发黄肝的级别分别评为１.１０ ± ０.３０ 、２.３０ ± ０.２０ 、３.４０ ± ０.５０ 和４.００ ± ０.２０ ;经Image‐pro plus ６.０ 软件分析,花肝、发白肝和发黄肝阳性面积率分别是正常肝的３.９２ 、６.３１ 和７.３２ 倍;以上指标经回归分析得到的回归方程为:肝脏粗脂肪含量(Y ) 与水分( X ) :Y ＝ － １.０８９ ９ X ＋ ８２.０３５ ７ ,R^２ ＝ ０.９８９( P＜ ０.０１) ;阳性面积率(Y )与粗脂肪含量( X) :Y ＝ ０.９７０ ２ X － ０.２０９ ０ ,R２ ＝ ０.９７３ ( P ＜ ０.０５ ) ;粗脂肪含量(Y )与肝细胞脂肪变性级别( X) :Y ＝ ３.６６２ ４ X － １.７８８ ６ ,R^２ ＝ ０.９８５ ( P ＜ ０.０１ ) ;阳性面积率(Y )与肝细胞脂肪变性级别( X) :Y ＝ ３.６２２ ４ X － ２.１３０ ６ ,R^２ ＝ ０.９９６( P＜ ０.０１) .结果证实,冰冻组织切片油红O 染色技术对鱼类脂肪肝的判断具有较好的参考价值,结合阳性面积率与肝脏粗脂肪含量、肝细胞脂肪变性级别具有显著的正相关,本试验建议将草鱼肝细胞阳性面积率＞ ２％ 定义为脂肪肝,其级别评定标准:２％ ～ ７％ 为轻度脂肪肝,７％ ～ １２％ 为中度脂肪肝,＞ １２％ 为重度脂肪肝.

应用PCR‐末端限制性片段长度多态性分析( PCR‐TRFLP) ,结合１６S rRNA 基因克隆文库和序列分析,研究托盘包装冷却猪肉在４ ℃ 贮藏过程中的菌相变化.结果表明:在整个贮藏过程的肉样TRFLP 图谱中共产生３５种谱带,表明冷却肉中微生物组成十分复杂;对应于假单胞菌( Pseudomonas)的谱带峰在贮藏过程中变化明显,其相对峰面积由０d 的５畅７％至贮藏末期达到８３.４％ ,表明贮藏末期主要优势腐败菌为假单胞菌.

以感官评定为基础对炖煮猪肉的色泽、组织形态、口感、汤汁气味和汤汁滋味进行权重分析,建立感官综合评分体系;在此基础上,利用模糊数学综合评价法对不同料水比、炖煮温度和炖煮时间下的样品进行综合评分,对猪肉炖煮工艺进行优化.结果表明:在料水比１ ∶ １ .５ ,炖煮温度７０ ℃ ,炖煮时间２h 时,猪肉感官品质最佳.模糊数学与感官评价相结合使结果更科学、合理、客观,在食品加工领域具有广阔的应用前景.

对浙江省１１个地级市１０种市售蔬菜的主要重金属与农药残留进行监测分析与风险评价.结果表明:１７项有检出的污染物为:镉＞铅＞氯氰菊酯＞汞＞毒死蜱＞三氟氯氰菊酯＞ 三唑磷＞乙酰甲胺磷＞甲胺磷＞氰戊菊酯＞氧化乐果＝对硫磷＝马拉硫磷＝敌敌畏＝甲氰菊酯＞敌百虫＝溴氰菊酯;风险程度属高度风险的指标为:镉、毒死蜱、铅、氯氰菊酯、三唑磷,中度风险指标为:甲胺磷、三氟氯氰菊酯、氧化乐果、对硫磷,其余指标为低度风险;对蔬菜安全的影响程度超过可接受限度的指标为:镉、三唑磷,属可接受限度的指标为:氧化乐果、甲胺磷、铅,其余指标对蔬菜安全没有影响;不同品种蔬菜的安全指数均小于１ 总体情况良好,安全程度由高至低为:黄瓜＞番茄＞丝瓜＞甘蓝＞茭白＞芹菜＞韭菜＞白菜＞茄子＞豇豆;不同亚区域的蔬菜安全指数均小于１,安全程度由高至低为:杭州＞金华＞绍兴＞温州＞丽水＞湖州＞台州＞舟山＞宁波＞嘉兴＞衢州.